Cum să sigilați o placă PCR

Introducere

plăci PCR, un element de bază al laboratorului de mulți ani, devin și mai răspândite în contextul modern, pe măsură ce laboratoarele își măresc debitul și folosesc din ce în ce mai mult automatizarea în fluxurile lor de lucru. Atingerea acestor obiective, păstrând în același timp acuratețea și integritatea experimentelor, poate fi dificilă. Una dintre zonele comune în care se pot strecura erorile este sigilareaplăci PCR, cu o tehnică slabă care permite evaporarea probelor, modificând pH-ul și, prin urmare, perturbând funcțiile enzimatice și invitând contaminarea. Învățați cum să sigilați aplacă PCRelimină corect aceste riscuri și asigură rezultate reproductibile.

Găsiți sigiliul potrivit pentru placa dumneavoastră PCR

Capace de plăci vs. garnituri de film vs. capace
capacesunt o modalitate bună de a vă sigila farfuria cu o etanșare etanșă, oferindu-vă în același timp flexibilitatea de a desigila și resigila foarte ușor placa după cum aveți nevoie, fără nicio risipă. Cu toate acestea, capacele au câteva dezavantaje cheie.

În primul rând, va trebui să cumpărați capacul specific care este compatibil, ceea ce le face să nu fie versatile. Va trebui să vă asigurați că capacul pe care îl alegeți se potrivește plăcii, care depinde de producătorul acesteia, și să alegeți fie bombat, fie plat în funcție de termociclorul pe care îl utilizați.

În al doilea rând, aplicarea capacelor pe placă poate fi foarte repetitivă și plictisitoare, cu riscul de contaminare încrucișată dacă puneți capacul greșit pe puțul greșit.

În timp ce garniturile de film sunt mai puțin flexibile în ceea ce privește îndepărtarea și înlocuirea, acestea sunt foarte versatile, deoarece se potrivesc cu orice tip de placă PCR, indiferent de cine este producătorul. Ele pot fi pur și simplu tăiate la dimensiune, făcându-le foarte eficiente.

O altă opțiune este un capac de farfurie. Acestea oferă mai puțină protecție decât capacele și etanșările și sunt utilizate în principal doar pentru acoperirea pe termen scurt pentru a preveni contaminarea.

Sigilii cu folie optică vs

Indiferent dacă aveți nevoie de un sigiliu optic, transparent sau de unfolie de aluminiupentru a sigila farfuria este decis de formatul experimental.Filme de etanșare opticăsunt transparente pentru a vă permite să observați mostrele, protejându-le în același timp și prevenind evaporarea. Ele sunt, de asemenea, deosebit de utile în experimentele qPCR care implică efectuarea de măsurători foarte precise ale fluorescenței direct de pe placă, caz în care veți avea nevoie de o peliculă de etanșare care filtrează cât mai puțină fluorescență. Este important să vă asigurați că sigiliul sau capacul pe care îl utilizați are un nivel suficient de ridicat de claritate optică pentru a vă asigura că citirile sunt exacte.

Foliile de folie sunt adecvate pentru orice probe care sunt sensibile la lumină sau care urmează să fie depozitate la sub 80°C. Din acest motiv, majoritatea mostrelor destinate depozitării pe termen lung vor necesita o folie de folie. Filmele de folie sunt, de asemenea, perforabile, ceea ce este util fie pentru examinarea godeurilor individuale, fie pentru transferul de probe cu ace. Acest lucru se poate întâmpla manual sau ca parte a unei platforme robotizate.

De asemenea, luați în considerare că substanțele agresive care includ acizi, baze sau solvenți vor necesita o etanșare care să le reziste, caz în care o etanșare cu folie este probabil mai potrivită.

Adeziv vs. Film de termoetanșare
Sigilii cu film adezivsunt foarte directe și ușor de aplicat. Tot ce aveți nevoie este ca un utilizator să aplice sigiliul pe placă și să folosească un instrument de aplicare simplu pentru a apăsa în jos și a forma o etanșare etanșă.

Sigiliile termice sunt mai avansate, oferind o etanșare mai durabilă, care are rate de evaporare reduse în comparație cu un sigiliu adeziv convențional. Această opțiune este adecvată dacă doriți să stocați mostre pe termen lung, deși aceasta vine cu o cerință suplimentară pentru echipamentul de etanșare a plăcilor.

Cum să sigilați o placă PCR

Metoda de etanșare a plăcii

Autoadeziv

1. Asigurați-vă că lucrați pe o suprafață de lucru plană și stabilă

2. Scoateți folia din ambalaj și îndepărtați suportul

3. Așezați cu grijă sigiliul pe placă, asigurându-vă în același timp că toate godeurile sunt acoperite

4. Folosiți un instrument de aplicare pentru a aplica presiune pe placă. Începeți de la un capăt și treceți la celălalt, apăsând uniform

5. Repetați acest lucru de mai multe ori

6. Rulați aplicatorul în jurul puțurilor exterioare, pentru a vă asigura că acestea sunt și ele bine sigilate.

Sigilări termice

Sigilarea termică funcționează prin topirea filmului pe marginea fiecărei godeuri, cu ajutorul unui dispozitiv de etanșare a plăcilor. Pentru a utiliza un dispozitiv de etanșare termică, consultați instrucțiunile furnizate de producătorul echipamentului. Asigurați-vă că producătorul de la care vă aprovizionați echipamentul este de renume, deoarece este foarte important ca sigiliul să fie adecvat, eficient și etanș.

Sfaturi de etanșare a plăcilor

o. Când aplicați presiune pe garnitură, mergeți atât în ​​direcția orizontală, cât și în direcția verticală pentru a asigura o etanșare adecvată

b. Este întotdeauna o practică bună să efectuați o operațiune de testare a ceea ce faceți, iar acest lucru nu este diferit cu etanșarea plăcii. Testați cu o farfurie goală înainte de a utiliza una cu probe.

c. Când testați, scoateți sigiliul și verificați dacă adezivul s-a lipit corect, fără goluri. Există o reprezentare vizuală a acestui lucru în primul document de referință. Dacă nu ați sigilat placa în mod corespunzător, atunci când îndepărtați sigiliul vor exista goluri în care adezivul nu s-a lipit complet de placă.

d. Pentru expedierea și transportul mostrelor, s-ar putea să găsiți că este util să aplicați un sigiliu din plastic deasupra sigiliului din folie pentru o protecție suplimentară (în special împotriva perforației).

e. Asigurați-vă întotdeauna că nu există denivelări sau riduri atunci când aplicați filmul - acestea vor cauza scurgeri și evaporare