Cum să sigilați o placă PCR

Introducere

Farfurii PCR, o bază a laboratorului timp de mai mulți ani, devin și mai răspândite în mediul modern, pe măsură ce laboratoarele își extind randamentul și își folosesc tot mai mult automatizarea în cadrul fluxurilor lor de lucru. Atingerea acestor obiective, în timp ce păstrarea exactității și integrității experimentelor poate fi dificilă. Una dintre zonele comune în care erorile se pot strecura este cu sigilareaFarfurii PCR, cu o tehnică slabă care permite evaporarea eșantioanelor, modificarea pH -ului și, prin urmare, perturbarea funcțiilor enzimatice și invitarea contaminării. Învățând cum să sigilați unPlacă PCRelimină corect aceste riscuri și asigură rezultatele reproductibile.

Găsiți sigiliul potrivit pentru placa dvs. PCR

Placă Caps vs. Sigilii de film vs. Papace
Capacesunt o modalitate bună de a -ți sigila placa cu o etanșare strânsă, în timp ce îți oferă totuși flexibilitatea de a dezlega foarte ușor și de a rezilia placa așa cum ai nevoie fără deșeuri. Cu toate acestea, capacele au câteva dezavantaje cheie.

În primul rând, va trebui să cumpărați plafonul specific compatibil, ceea ce le face să nu fie versatile. Va trebui să vă asigurați că capacul pe care îl alegeți se potrivește plăcii, care depinde de producătorul său și să alegeți fie cuptor, fie plat pe baza termociclerului pe care îl utilizați.

În al doilea rând, aplicarea capacelor pe placă poate fi foarte repetitivă și obositoare, cu riscul de contaminare încrucișată dacă puneți capacul greșit pe bine greșit.

În timp ce sigiliile de film sunt mai puțin flexibile în ceea ce privește eliminarea și înlocuirea, acestea sunt foarte versatile, deoarece se vor potrivi cu orice tip de placă PCR, fără a ține cont de cine este producătorul. Ele pot fi pur și simplu tăiate la dimensiuni, ceea ce le face foarte eficiente.

O altă opțiune este un capac de placă. Acestea oferă o protecție mai mică care se placă și sigiliile și sunt utilizate în principal doar pentru acoperirea pe termen scurt pentru a preveni contaminarea.

Sigilii optice vs. folie de film

Indiferent dacă aveți nevoie de un sigiliu optic, clar sau unFilm din folie de aluminiuPentru a sigila placa dvs. este decis de formatul dvs. experimental.Filme de etanșare opticăsunt transparente pentru a vă permite să observați probe, în timp ce le protejați și prevenind evaporarea. De asemenea, sunt deosebit de utile în experimentele qPCR, care implică efectuarea măsurătorilor extrem de precise ale fluorescenței direct de pe placă, caz în care veți avea nevoie de un film de etanșare care filtrează cât mai puțină fluorescență. Este important să vă asigurați că sigiliul sau capacul pe care îl utilizați are un nivel suficient de ridicat de claritate optică pentru a vă asigura că citirile sunt corecte.

Filmele de folie sunt adecvate pentru eșantioanele sensibile la lumină sau care trebuie păstrate la 80 ° C. Din acest motiv, majoritatea eșantioanelor destinate stocării pe termen lung vor necesita un film cu folie. Filmele cu folie sunt, de asemenea, piercinabile, ceea ce este util fie pentru examinarea puțurilor individuale, fie pentru transferul de probe de ace. Acest lucru poate apărea manual sau ca parte a unei platforme robotizate.

De asemenea, luați în considerare că substanțele agresive care includ acizi, baze sau solvenți vor necesita un sigiliu care să le reziste, caz în care un sigiliu de folie este probabil mai adecvat.

Film adeziv vs.
Sigilii de film adezivsunt foarte simple și se aplică ușor. Tot ce ai nevoie este ca un utilizator să aplice sigiliul pe placă și să folosească un instrument simplu aplicator pentru a apăsa în jos și a forma un sigiliu strâns.

Garniturile de căldură sunt mai avansate, oferind o etanșare de durată mai lungă, care a redus ratele de evaporare în comparație cu un sigiliu adeziv convențional. Această opțiune este adecvată dacă doriți să stocați probe pe termen lung, deși acest lucru vine cu o cerință suplimentară pentru echipamentele de etanșare a plăcilor.

Cum să sigilați o placă PCR

Metoda de etanșare a plăcilor

Autoadeziv

1. Asigurați -vă că lucrați la o suprafață de lucru plat și stabil

2. Scoateți filmul din ambalajul său și îndepărtați suportul

3. Puneți cu atenție sigiliul pe farfurie, asigurându -vă în același timp că toate puțurile sunt acoperite

4. Utilizați un instrument aplicator pentru a aplica presiune pe placă. Începeți de la un capăt și treceți -vă drumul către celălalt, apăsând uniform

5. Repetați acest lucru de nenumărate ori

6. Rulați aplicatorul în jurul puțurilor exterioare, pentru a vă asigura că acestea sunt sigilate în mod corespunzător.

Garnituri de căldură

Garniturile de căldură funcționează prin topirea filmului pe marginea fiecărui puț, cu ajutorul unui etanșare a plăcilor. Pentru a opera un etanșant de căldură, consultați instrucțiunile furnizate de producătorul echipamentului. Asigurați -vă că producătorul de la care vă furnizați echipamentul este de renume, deoarece este foarte important ca sigiliul să fie adecvat, eficient și etanș.

Sfaturi de etanșare a plăcilor de etanșare

o. Când aplicați presiune pe sigiliu, mergeți atât în ​​direcții orizontale, cât și verticale pentru a asigura o etanșare corespunzătoare

b. Este întotdeauna o practică bună să efectuați un test de orice faceți, iar acest lucru nu este diferit cu etanșarea plăcilor. Testați cu o placă goală înainte de a utiliza una cu probe.

C. Când testați, scoateți sigiliul și căutați să vedeți că adezivul s -a blocat corect, fără goluri. Există o reprezentare vizuală a acestui lucru în primul document de referință. Dacă nu ați sigilat placa în mod corespunzător, atunci când scoateți sigiliul, vor exista goluri în care adezivul nu a făcut să se lege complet de placă.

D. Pentru transportul și transportul de probe, este posibil să găsiți că este util să aplicați un sigiliu de plastic pe partea de sus a sigiliului de folie pentru o protecție suplimentară (în special împotriva piercingului).

e. Asigurați -vă întotdeauna că nu există denivelări sau riduri la aplicarea filmului - acestea vor provoca scurgeri și evaporare