Micropipeta este probabil cel mai folosit instrument în laborator. Sunt folosite de oamenii de știință dintr-o gamă largă de sectoare, inclusiv mediul academic, spitale și laboratoare de criminalistică, precum și dezvoltarea de medicamente și vaccinuri pentru a transfera cantități precise, foarte mici de lichid.
Deși poate fi enervant și frustrant să reperezi bule de aer în vârful pipetei de unică folosință dacă nu sunt observate sau ignorate, poate avea un impact enorm asupra fiabilității și reproductibilității rezultatelor.
Vestea bună este că există câteva măsuri simple pe care le puteți lua pentru a preveni bulele de aer și pentru a îmbunătăți eficiența laboratorului, satisfacția operatorului, precum și acuratețea și precizia rezultatelor.
Mai jos, explorăm consecințele obținerii unei bule de aer în vârful pipetei și ce ar trebui să faceți în continuare.
Consecința bulelor înVârf de pipetă
Chiar dacă utilizați pipete cele mai precise, de vârf, bine întreținute, întreținute și calibrate, fiabilitatea rezultatelor dumneavoastră poate fi afectată de erorile de laborator. Când bulele intră însfatpoate avea mai multe rezultate.
● Când utilizatorul observă bula de aer, trebuie să petreacă timp distribuind lichidul aspirat în mod corespunzător, să scoată vârful și să înceapă din nou procesul.
● Bulele de aer nedetectate pot duce la un transfer de volum scăzut, modificând astfel concentrația amestecurilor de reacție, ducând la experimente eșuate și la rezultate discutabile sau nesigure.
Aceste rezultate pot avea mai multe consecințe (1).
● Scăderea eficienței laboratorului – Testele și analizele vor trebui repetate, implicând costuri de muncă și materiale, care pot fi destul de substanțiale.
● Rezultate îndoielnice sau incorecte ale testelor – Dacă sunt publicate rezultate incorecte, pot exista consecințe mai grave, inclusiv diagnosticare greșită și rezultate slabe ale pacientului.
● Retragerea manuscriselor din jurnale – Dacă colegii nu reușesc să-ți reproducă rezultatele din cauza bulelor de aer care provoacă rezultate inexacte, lucrările pot fi retrase.
Cele mai bune practici pentru a preveni bulele de aer
În majoritatea cazurilor, bulele de aer din vârfurile pipetei sunt cauzate de o eroare a operatorului. Tehnica slabă din cauza antrenamentului insuficient sau a oboselii este de obicei problema de bază.
Pipettarea este o operațiune calificată care necesită 110% atenție, pregătire și practică adecvate pentru a obține rezultate consistente și precise.
Deși există câteva lucruri pe care le puteți face pentru a reduce erorile generale de pipetare, mai jos am evidențiat câteva dintre cele mai bune practici care pot fi folosite pentru a evita bulele de aer învârfuri de pipetă.
Îmbunătățiți tehnica utilizatorului
Pipetați încet
Dacă pistonul este eliberat prea repede la aspirare, în vârf pot fi introduse bule de aer. Acest lucru poate fi deosebit de problematic atunci când se transferă lichide vâscoase. Un efect similar poate apărea dacă pistonul este eliberat prea repede după distribuire.
Pentru a evita bulele de aer la aspirare, aveți grijă să acționați pistonul pipetelor manuale într-o manieră lină și regulată, aplicând o forță constantă.
Utilizați adâncimea corectă de imersie
Neimersarea vârfului pipetei suficient de adânc sub meniscul rezervorului de lichid poate duce la aspirarea aerului și astfel formarea de bule.
Cu toate acestea, scufundarea vârfului prea adânc poate aspira mai mult lichid din cauza presiunii crescute sau pot apărea picături pe exteriorul vârfului, așa că este important să se scufundevârful pipeteila adâncimea corectă.
Adâncimea recomandată variază între dimensiunea pipetei, tipul și marca. În timp ce recomandările producătorului ar trebui urmate, iată un ghid general oferit de Laboratorul Național de Fizică.
Ghid pentru adâncimea de imersie a vârfului
Volumul pipetei (µl) și adâncimea de imersie (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-UmedVârfuri de pipetă
La pipetarea volumelor mai mari de 10µlvârfuri de pipetăsunt de obicei pre-umezite prin umplerea lor de mai multe ori cu lichidul distribuit și expulzandu-l în deșeuri pentru a îmbunătăți acuratețea.
Nepre-umedarea acestora poate duce la formarea de bule de aer, mai ales atunci când se utilizează lichide vâscoase sau hidrofobe. Pentru a evita bulele de aer, asigurați-vă că pre-umezi vârfurile atunci când pipetezi un volum mai mare de 10 µl.
Utilizați tehnici de pipetare inversă, dacă este cazul
Substanțe vâscoase: O problemă comună la pipetarea substanțelor vâscoase, cum ar fi soluții de proteine sau acizi nucleici, glicerol și Tween 20/40/60/80 este formarea frecventă de bule atunci când se utilizează tehnica de pipetare înainte.
Pipetarea lent, folosind tehnica de pipetare inversă reduce riscul formării de bule la transferul soluțiilor vâscoase.
Tehnica ELISA
Pipettarea inversă este, de asemenea, recomandată atunci când se pipetează volume miciPlăci de microtest cu 96 de godeuripentru tehnici ELISA. Atunci când bulele de aer sunt atrase în pipetă sau distribuite în godeuri atunci când se adaugă reactivi, aceasta poate influența valorile densității optice și rezultatele. Se recomandă pipetarea inversă pentru a minimiza sau elimina această problemă.
Folosiți pipete ergonomice
Pipetele de stil vechi care nu au fost concepute cu ergonomia în minte necesită mai mult efort fizic, obosești și tehnica ta de pipetare devine neglijentă și săracă. Erorile menționate mai sus, cum ar fi eliberarea rapidă a pistonului, pot apărea mai frecvent.
Investind într-o soluție mai ergonomică, veți putea menține o tehnică excelentă și veți preveni formarea de bule de aer din cauza tehnicii slabe.
Fă-ți timp pentru a instrui personalul
Instruirea și evaluarea periodică a personalului în tehnicile de pipetare poate asigura reducerea erorilor operatorului și a formării de bule de aer.
Luați în considerare mai multe soluții automatizate
După cum sa menționat mai sus, majoritatea bulelor de aer sunt cauzate de operator. Este posibil să se reducă eroarea și confortul operatorului prin utilizarea pipetelor electronice sau a unei platforme flexibile de manipulare a lichidelor, cum ar fiRobot de manipulare a lichidelor Agilent Bravo.
Utilizați de bună calitateVârfuri de pipetă
Micropipetele sunt de obicei achiziționate cu grijă, dar adesea se acordă puțină atenție calității vârfului pipetei de unică folosință. Datorită influenței pe care o are un vârf asupra rezultatelor pipetei, standardul ISO 8655 necesită o calibrare suplimentară dacă sunt utilizate pipete și vârfuri de la diferiți producători.
Acest lucru se poate datora faptului că multe sfaturi ieftine pot arăta bine inițial, dar atunci când le studiați cu atenție, ele pot avea fulgerări, proeminențe, zgârieturi și bule de aer sau pot fi îndoite sau conțin impurități.
Cumpărarea vârfurilor de bună calitate din polipropilenă de înaltă calitate poate reduce apariția bulelor de aer.
Pentru a încheia
Introducerea bulelor de aer în vârful pipetei are un impact asupra eficienței laboratorului, precum și asupra inexactității și impreciziei rezultatelor. Am observat câteva lucruri pe care le puteți face pentru a evita bulele de aer să pătrundă învârful pipetei.
Cu toate acestea, dacă de calitate slabăvârfuri de pipetăprovoacă pătrunderea bulelor de aer în vârful pipetei, veți fi încântați să aflați că se potrivește universalvârfuri de pipetăsunt fabricate la cele mai înalte standarde și sunt fabricate din polipropilenă pură de calitate premium.
Compania Suzhou Ace Biomedicalproduce vârfuri de pipetă universale de înaltă calitate de 10,20,50,100,200,300,1000 și 1250 µL, 96 vârfuri/rack. Durabilitate excepțională – toate suporturile pentru vârfuri ACE fac față cerințelor utilizării cu pipetoarele multicanal. Steril, fără filtru, fără RNază/DNază și apirogen.
Bine ați venit să ne întrebați pentru mai multe detalii.
Ora postării: 29-12-2022