O que são criotubos?
Frascos de armazenamento criogênicosão recipientes pequenos, tampados e cilíndricos projetados para armazenar e preservar amostras em temperaturas ultrabaixas. Embora tradicionalmente estes frascos tenham sido feitos de vidro, agora são muito mais comumente feitos de polipropileno por razões de conveniência e custo. Os criotubos foram cuidadosamente projetados para suportar temperaturas tão baixas quanto -196°C e para acomodar uma ampla variedade de tipos de células. Estes variam desde células-tronco de diagnóstico, microrganismos, células primárias até linhas celulares estabelecidas. Além disso, também pode haver pequenos organismos multicelulares armazenados dentro defrascos de armazenamento criogênico, bem como ácidos nucleicos e proteínas que precisam ser armazenados em níveis de temperatura de armazenamento criogênicos.
Os frascos de armazenamento criogênico vêm em vários formatos diferentes, e encontrar o tipo correto que atenda a todas as suas necessidades garantirá que você mantenha a integridade da amostra sem pagar a mais. Leia nosso artigo para saber mais sobre as principais considerações de compra ao selecionar o frasco criogênico certo para sua aplicação laboratorial.
Propriedades do frasco criogênico a serem consideradas
Threads externos versus internos
Muitas vezes as pessoas fazem essa escolha com base na preferência pessoal, mas na verdade existem diferenças funcionais importantes a serem consideradas entre os dois tipos de linha.
Muitos laboratórios optam frequentemente por frascos com rosca interna para minimizar o espaço de armazenamento dos tubos e permitir um melhor ajuste nas caixas do freezer. Apesar disso, você pode considerar que a opção encadeada externamente é a melhor opção para você. Considera-se que apresentam menor risco de contaminação, devido ao design que torna ainda mais difícil a entrada de qualquer coisa que não seja a amostra no frasco.
Os frascos com rosca externa são geralmente preferidos para aplicações genômicas, mas qualquer uma das opções é considerada adequada para biobancos e outras aplicações de alto rendimento.
Uma última coisa a considerar sobre o rosqueamento – se o seu laboratório utiliza automação, você pode precisar considerar qual rosca pode ser usada com as pinças do instrumento.
Volume de armazenamento
Os frascos criogênicos estão disponíveis em vários tamanhos para atender à maioria das necessidades, mas geralmente variam entre a capacidade de 1 mL e 5 mL.
O segredo é garantir que o frasco criogênico não esteja cheio demais e que haja espaço extra disponível, caso a amostra inche durante o congelamento. Na prática, isso significa que os laboratórios optam por frascos de 1 mL ao armazenar amostras de 0,5 mL de células suspensas em crioprotetor, e frascos de 2,0 mL para 1,0 mL de amostra. Outra dica para não encher demais os frascos é fazer com que você use frascos criogênicos com marcações graduadas, o que evitará qualquer inchaço que possa causar rachaduras ou vazamentos.
Tampa de rosca vs Flip Top
O tipo de cobertura que você escolher depende principalmente se você usará nitrogênio em fase líquida ou não. Se estiver, você precisará de frascos criogênicos com tampa de rosca. Isso garante que eles não possam abrir acidentalmente devido a manuseio incorreto ou mudanças de temperatura. Além disso, as tampas de rosca permitem uma recuperação mais fácil das caixas criogênicas e um armazenamento mais eficiente.
No entanto, se você não estiver usando nitrogênio em estágio líquido e precisar de uma tampa mais conveniente e mais fácil de abrir, uma tampa articulada é a melhor opção. Isso economizará muito tempo, pois é muito mais fácil de abrir, o que o torna particularmente útil em operações de maior rendimento e naquelas que usam processos em lote.
Selo de segurança
A melhor maneira de garantir uma vedação segura é certificar-se de que a tampa e o frasco do criovial sejam construídos com o mesmo material. Isso garantirá que eles encolham e se expandam em uníssono. Se forem feitos com materiais diferentes, então encolherão e expandirão em taxas diferentes à medida que a temperatura muda, provocando lacunas e potenciais fugas e consequente contaminação.
Algumas empresas oferecem arruelas duplas e flange para o mais alto nível de segurança de amostras em criotubos com rosca externa. Os criotubos O-Ring são considerados os mais confiáveis para criotubos com rosca interna.
Vidro vs Plástico
Por segurança e conveniência, muitos laboratórios usam agora plástico, geralmente polipropileno, em vez de ampolas de vidro termoseláveis. As ampolas de vidro são agora consideradas uma escolha ultrapassada, pois durante o processo de vedação podem ocorrer vazamentos invisíveis, que quando descongelados após armazenamento em nitrogênio líquido podem causar sua explosão. Eles também não são tão adequados às técnicas modernas de rotulagem, o que é fundamental para garantir a rastreabilidade das amostras.
Parte inferior autônoma versus parte inferior arredondada
Os frascos criogênicos estão disponíveis tanto independentes com fundo em forma de estrela quanto com fundo arredondado. Se você precisar colocar seus frascos em uma superfície, certifique-se de escolher o independente
Rastreabilidade e rastreamento de amostras
Esta área de armazenamento criogênico é frequentemente negligenciada, mas o rastreamento e a rastreabilidade das amostras são aspectos cruciais a serem considerados. As amostras criogénicas podem ser armazenadas durante muitos anos, período durante o qual o pessoal pode mudar e, sem registos devidamente mantidos, podem tornar-se não identificáveis.
Certifique-se de escolher frascos que facilitem ao máximo a identificação da amostra. As coisas que você deve observar incluem:
Grandes áreas de escrita para registrar detalhes suficientes para que os registros possam ser encontrados se um frasco estiver localizado em um local incorreto – geralmente a identidade da célula, a data congelada e as iniciais da pessoa responsável são adequadas.
Códigos de barras para auxiliar sistemas de gerenciamento e rastreamento de amostras
Bonés coloridos
Uma observação para o futuro: estão sendo desenvolvidos chips ultrarresistentes ao frio que, quando instalados em frascos criogênicos individuais, poderiam armazenar um histórico térmico detalhado, bem como informações detalhadas sobre lotes, resultados de testes e outra documentação de qualidade relevante.
Além de levar em consideração as diferentes especificações dos frascos disponíveis, também é necessário refletir sobre o processo técnico de armazenamento de criotubos em nitrogênio líquido.
Temperatura de armazenamento
Existem vários métodos de armazenamento para armazenamento criogênico de amostras, cada um operando em uma temperatura específica. As opções e a temperatura em que operam incluem:
Fase líquida LN2: mantém uma temperatura de -196°C
Fase vapor LN2: são capazes de operar em faixas específicas de temperatura entre -135°C e -190°C dependendo do modelo.
Congeladores de vapor de nitrogênio: -20°C a -150°C
O tipo de células armazenadas e o método de armazenamento preferido do pesquisador determinarão qual das três opções disponíveis seu laboratório usará.
No entanto, devido às temperaturas extremamente baixas utilizadas, nem todos os tubos ou designs serão adequados ou seguros. Os materiais podem se tornar extremamente frágeis em temperaturas extremamente baixas. Usar um frasco não adequado para uso na temperatura escolhida pode causar a quebra ou rachadura do recipiente durante o armazenamento ou descongelamento.
Verifique cuidadosamente as recomendações dos fabricantes sobre o uso adequado, pois alguns frascos criogênicos são adequados para temperaturas tão baixas quanto -175°C, alguns -150°C, outros apenas 80°C.
É importante notar também que muitos fabricantes afirmam que os seus frascos criogénicos não são adequados para imersão na fase líquida. Se estes frascos para injetáveis forem armazenados na fase líquida quando regressarem à temperatura ambiente, estes frascos para injetáveis ou as respetivas tampas podem quebrar devido a um rápido aumento de pressão causado por pequenas fugas.
Se as células forem armazenadas na fase líquida do nitrogênio líquido, considere armazenar as células em frascos criogênicos adequados selados termicamente em tubos crioflex ou armazenar as células em ampolas de vidro hermeticamente fechadas.
Horário da postagem: 25 de novembro de 2022