A micropipeta é provavelmente a ferramenta mais utilizada em laboratório. Ela é utilizada por cientistas em uma ampla gama de setores, incluindo academia, hospitais e laboratórios forenses, bem como no desenvolvimento de medicamentos e vacinas, para transferir quantidades precisas e muito pequenas de líquido.
Embora possa ser irritante e frustrante detectar bolhas de ar na ponta da pipeta descartável, se elas não forem detectadas ou ignoradas, isso pode ter um grande impacto na confiabilidade e reprodutibilidade dos resultados.
A boa notícia é que existem algumas medidas simples que você pode tomar para evitar bolhas de ar e melhorar a eficiência do laboratório, a satisfação do operador, bem como a precisão dos resultados.
Abaixo, exploramos as consequências de uma bolha de ar na ponta da sua pipeta e o que você deve fazer em seguida.
A Consequência das Bolhas noPonta de pipeta
Mesmo que você utilize as pipetas mais precisas, de alta qualidade, bem conservadas, revisadas e calibradas, a confiabilidade dos seus resultados pode ser afetada por erros de laboratório. Quando bolhas entram na pipeta,dicapode ter vários resultados.
● Quando o usuário avistar a bolha de ar, ele deve gastar tempo dispensando o líquido aspirado adequadamente, ejetar a ponta e iniciar o processo novamente.
● Bolhas de ar não detectadas podem resultar em transferência de baixo volume, alterando assim a concentração das misturas de reação, levando a experimentos malsucedidos e resultados questionáveis ou não confiáveis.
Esses resultados podem ter várias consequências (1).
● Redução da eficiência do laboratório – Testes e ensaios terão que ser repetidos, gerando custos de mão de obra e materiais, que podem ser bastante substanciais.
● Resultados de testes questionáveis ou incorretos – Se resultados incorretos forem divulgados, pode haver consequências mais sérias, incluindo diagnósticos incorretos e resultados ruins para o paciente.
● Retirada de manuscritos de periódicos – Se os colegas não conseguirem replicar seus resultados devido a bolhas de ar que causam resultados imprecisos, os artigos poderão ser retirados.
Melhores práticas para evitar bolhas de ar
Na maioria dos casos, bolhas de ar nas pontas das pipetas são causadas por erro do operador. A técnica inadequada devido a treinamento insuficiente ou fadiga costuma ser o problema subjacente.
A pipetagem é uma operação especializada que requer 110% de atenção, treinamento adequado e prática para obter resultados consistentes e precisos.
Embora existam várias coisas que você pode fazer para reduzir erros gerais de pipetagem, abaixo destacamos algumas práticas recomendadas que podem ser empregadas para evitar bolhas de ar empontas de pipeta.
Melhore a técnica do usuário
Pipetar lentamente
Se o êmbolo for liberado muito rapidamente durante a aspiração, bolhas de ar podem ser introduzidas na ponta. Isso pode ser especialmente problemático ao transferir líquidos viscosos. Um efeito semelhante pode ocorrer se o êmbolo for liberado muito rapidamente após a dispensação.
Para evitar bolhas de ar ao aspirar, tome cuidado para operar o pistão das pipetas manuais de maneira suave e regular, aplicando força consistente.
Use a profundidade de imersão correta
Não mergulhar a ponta da pipeta profundamente o suficiente abaixo do menisco do reservatório de líquido pode resultar na aspiração de ar e, consequentemente, na formação de bolhas.
No entanto, mergulhar a ponta muito profundamente pode aspirar mais líquido devido ao aumento da pressão ou podem ocorrer gotículas na parte externa da ponta, por isso é importante mergulhar a pontaponta de pipetaaté a profundidade correta.
A profundidade recomendada varia de acordo com o tamanho, o tipo e a marca da pipeta. Embora as recomendações do fabricante devam ser seguidas, aqui está um guia geral fornecido pelo Laboratório Nacional de Física (NFL).
Guia para profundidade de imersão da ponta
Volume da pipeta (µl) e profundidade de imersão (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pré-molhadoPonteiras de pipeta
Ao pipetar volumes maiores que 10µlpontas de pipetageralmente são pré-umedecidos, enchendo-os várias vezes com o líquido que está sendo dispensado e expelindo-o para o lixo para melhorar a precisão.
A falta de umedecimento prévio pode resultar em bolhas de ar, especialmente ao usar líquidos viscosos ou hidrofóbicos. Para evitar bolhas de ar, certifique-se de umedecer previamente as pontas ao pipetar volumes superiores a 10 µl.
Use técnicas de pipetagem reversa se apropriado
Substâncias viscosas: Um problema comum ao pipetar substâncias viscosas, como soluções de proteínas ou ácidos nucleicos, glicerol e Tween 20/40/60/80, é a formação frequente de bolhas quando a técnica de pipetagem direta é usada.
Pipetar lentamente, usando a técnica de pipetagem reversa, reduz o risco de formação de bolhas ao transferir soluções viscosas.
Técnica ELISA
A pipetagem reversa também é recomendada ao pipetar pequenos volumes emPlacas de microteste de 96 poçospara técnicas de ELISA. Quando bolhas de ar são aspiradas para dentro da pipeta ou dispensadas nos poços ao adicionar reagentes, isso pode influenciar os valores de densidade óptica e os resultados. A pipetagem reversa é recomendada para minimizar ou eliminar esse problema.
Use pipetas ergonômicas
Pipetas antigas, que não foram projetadas com ergonomia em mente, exigem mais esforço físico, cansam você e sua técnica de pipetagem se torna desleixada e deficiente. Erros mencionados acima, como a liberação rápida do êmbolo, podem ocorrer com mais frequência.
Ao investir em uma solução mais ergonômica, você poderá manter uma técnica excelente e evitar a formação de bolhas de ar devido à técnica inadequada.
Reserve um tempo para treinar a equipe
Treinar e avaliar regularmente a equipe em técnicas de pipetagem pode garantir que os erros do operador e a formação de bolhas de ar sejam reduzidos.
Considere mais soluções automatizadas
Como observado acima, a maioria das bolhas de ar é causada pelo operador. Pode ser possível reduzir o erro e o conforto do operador usando pipetas eletrônicas ou uma plataforma flexível para manuseio de líquidos, como aRobô de manuseio de líquidos Agilent Bravo.
Use boa qualidadePonteiras de pipeta
As micropipetas geralmente são adquiridas com cuidado, mas muitas vezes pouca atenção é dada à qualidade da ponta descartável. Devido à influência que a ponta tem nos resultados da pipetagem, a norma ISO 8655 exige uma calibração extra se forem utilizadas pipetas e ponteiras de fabricantes diferentes.
Isso pode ocorrer porque muitas pontas baratas podem parecer boas inicialmente, mas quando você as estuda com cuidado, elas podem apresentar flashes, saliências, arranhões e bolhas de ar, ou estar tortas ou conter impurezas.
Comprar pontas de boa qualidade feitas de polipropileno de alta qualidade pode reduzir a ocorrência de bolhas de ar.
Para concluir
A presença de bolhas de ar na ponta da pipeta afeta a eficiência do laboratório, bem como a imprecisão e a imprecisão dos resultados. Observamos algumas medidas que você pode tomar para evitar a entrada de bolhas de ar na ponta da pipeta.ponta de pipeta.
No entanto, se a qualidade for ruimpontas de pipetaestão causando a entrada de bolhas de ar na ponta da sua pipeta, você ficará satisfeito em saber que nosso encaixe universalpontas de pipetasão feitos com os mais altos padrões e são feitos com polipropileno puro de qualidade premium.
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Data de publicação: 29 de dezembro de 2022