کریوویالونهپه عموم ډول د حجرو لینونو او نورو مهمو بیولوژیکي موادو کریوجینک ذخیره کولو لپاره کارول کیږي، په دیورونو کې چې د مایع نایتروجن څخه ډک وي.
په مایع نایتروجن کې د حجرو په بریالي ساتنه کې ډیری مرحلې شاملې دي. پداسې حال کې چې بنسټیز اصول یو ورو کنج دی، دقیق تخنیک کارول کیږي د حجرو ډول او کارول شوي کریوپروټیکټینټ پورې اړه لري. دلته د خوندیتوب ډیری ملاحظات او غوره تمرینونه شتون لري چې په پام کې ونیول شي کله چې په داسې ټیټ تودوخې کې د حجرو ذخیره کول.
د دې پوسټ موخه دا ده چې په مایع نایټروجن کې د کریوویالونو ذخیره کولو څرنګوالي یوه عمومي کتنه وړاندې کړي.
Cryovials څه دي؟
Cryovials کوچني، پوښ شوي ویالونه دي چې په خورا ټیټ حرارت کې د مایع نمونو ذخیره کولو لپاره ډیزاین شوي. دوی ډاډ ترلاسه کوي چې په کریوپروټیکټینټ کې ساتل شوي حجرې د مایع نایټروجن سره مستقیم تماس ته نه راځي، د حجرو تخریب خطر کموي پداسې حال کې چې لاهم د مایع نایټروجن خورا یخ کولو اغیز څخه ګټه پورته کوي.
ویالونه معمولا په یو لړ حجمونو او ډیزاینونو کې شتون لري - دوی په داخلي یا بهر کې د فلیټ یا ګردي بوتلونو سره تار شوي کیدی شي. جراثیمي او غیر تعقیم شکلونه هم شتون لري.
څوک کارويCyrovialsپه مایع نایتروجن کې د حجرو ذخیره کول
د NHS او خصوصي لابراتوارونو لړۍ ، په بیله بیا د څیړنې ادارې چې د وینې د وینې بانکداري ، اپیتیلیل سیل بیولوژي ، معافیت او سټیم سیل بیولوژي کې تخصص لري د حجرو کریوپریزرو لپاره کریوویلز کاروي.
په دې ډول ساتل شوي حجرې د B او T حجرې، CHO حجرې، Hematopoietic Stem او Progenitor Cells، Hybridomas، Intestinal Cells، Macrophages، Mesenchymal Stem او Progenitor Cells، Monocytes، Myeloma، NK Cells او Pluripotent Stem Cells شامل دي.
په مایع نایټروجن کې د کریوویال ذخیره کولو څرنګوالي عمومي کتنه
Cryopreservation یوه پروسه ده چې حجرې او نور بیولوژیکي جوړښتونه د خورا ټیټ تودوخې په یخولو سره ساتي. حجرې په مایع نایتروجن کې د کلونو لپاره زیرمه کیدی شي پرته لدې چې د حجرو وړتیا له لاسه ورکړي. دا د ګمارل شوي پروسیجرونو یوه خاکه ده.
د حجرو چمتو کول
د نمونو چمتو کولو سمه طریقه به د حجرو ډول پورې اړه ولري، مګر په عموم کې، حجرې راټولیږي او سینټرفیوج کیږي ترڅو د حجرو بډایه ګولۍ رامینځته کړي. دا ګولۍ بیا په سپرناټینټ کې د کریوپروټیکټینټ یا کریوپریزریشن میډیم سره مخلوط کیږي.
د Cryopreservation منځنی
دا وسیله د ټیټ تودوخې چاپیریال کې د حجرو ساتلو لپاره کارول کیږي چې دوی به د داخلي او خارجي حجرو کرسټالونو رامینځته کولو مخه ونیسي او له همدې امله د حجرو مړینه. د دوی رول د حجرو او نسجونو لپاره د یخولو، ذخیره کولو، او غوړولو پروسو په جریان کې خوندي، محافظتي چاپیریال چمتو کول دي.
یو متوسط لکه تازه منجمد پلازما (FFP)، د هیپرینیز شوي پلازمالایټ محلول یا سیرم څخه پاک، د حیواني اجزاو څخه پاک محلولونه د کریوپروټیکټینټونو لکه ډیمیتیل سلفوکسایډ (DMSO) یا ګلیسرول سره مخلوط شوي.
د بیا مایع شوي نمونې ګولۍ په پولی پروپیلین کریوویالونو کې جلا کیږي لکهد سوژو ایس بایو میډیکل شرکت کریوجینک ذخیره ویالونه.
دا مهمه ده چې کریوویالونه له اندازې ډک نه کړئ ځکه چې دا به د درزیدو خطر او د مینځپانګو احتمالي خوشې کیدو ته وده ورکړي (1).
د کنټرول شوي کنګل نرخ
په عموم کې، د حجرو د بریالي کریوپریزیزیشن لپاره یو ورو کنټرول شوی منجمد نرخ کارول کیږي.
وروسته له دې چې نمونې په کریوجنیک ویالونو کې جلا شي، دوی په لوند یخ کې یا د 4 ℃ په یخچال کې کیښودل کیږي او د یخولو پروسه په 5 دقیقو کې پیل کیږي. د عمومي لارښود په توګه، حجرې په یوه دقیقه کې -1 څخه تر -3 پورې یخ کیږي (2). دا د پروګرام وړ کولر په کارولو سره ترلاسه کیږي یا په یو موصل شوي بکس کې د شیشې په ایښودلو سره ترلاسه کیږي چې د -70 ° C څخه - 90 ° C کنټرول شوي نرخ فریزر کې ځای په ځای شوي.
مایع نایتروجن ته لیږدول
کنګل شوي کریوجنیک وایلونه بیا د نایتروجن مایع ټانک ته د نامعلومې مودې لپاره لیږدول کیږي په دې شرط چې د حرارت درجه د -135 ℃ څخه کم وساتل شي.
دا خورا ټیټ حرارت د مایع یا بخار مرحله نایټروجن کې ډوبولو سره ترلاسه کیدی شي.
د مایع یا بخار مرحله؟
په مایع پړاو کې د نایتروجن ذخیره کول د مطلق ثبات سره د سړې تودوخې ساتلو لپاره پیژندل کیږي، مګر ډیری وختونه د لاندې دلیلونو لپاره سپارښتنه نه کیږي:
- د مایع نایتروجن لوی مقدار (ژورتیا) ته اړتیا چې احتمالي خطر دی. د دې له امله سوځیدنه یا ساه اخیستل یو ریښتینی خطر دی.
- د انتاني اجنټانو لخوا د کراس ککړتیا مستند شوي قضیې لکه اسپرګیلس، هیپ B او ویروس د مایع نایتروجن میډیم له لارې خپریږي (2,3)
- د ډوبیدو پرمهال د شیشې ته د مایع نایټروجن لیک کیدو احتمال. کله چې د ذخیرې څخه لیرې شي او د خونې تودوخې ته تودوخه شي، نایټروجن په چټکۍ سره پراخیږي. په پایله کې، شیشې د مایع نایتروجن ذخیره کولو په وخت کې ټوټه ټوټه کیدی شي، د الوتنې کثافاتو او مینځپانګو ته د افشا کیدو څخه خطر رامینځته کوي (1, 4).
د دې دلیلونو لپاره، د ټیټ تودوخې ذخیره کول په عمومي ډول د بخار مرحله نایتروجن کې وي. کله چې نمونې باید د مایع په مرحله کې زیرمه شي، ځانګړي کریوفیکس ټیوب باید وکارول شي.
د بخار مرحلې ته منفي اړخ دا دی چې د تودوخې عمودی تدریجي رامینځته کیدی شي چې د -135 ℃ او -190 ℃ ترمینځ د تودوخې د بدلون لامل کیږي. دا د مایع نایتروجن کچې او د تودوخې بدلونونو محتاط او محتاط څارنې ته اړتیا لري (5).
ډیری جوړونکي وړاندیز کوي چې کریوویالونه تر -135 ℃ پورې د ذخیره کولو لپاره یا یوازې د بخار مرحله کې د کارولو لپاره مناسب دي.
ستاسو د Cryopreserved حجرو تودوخه
د غوړولو کړنلاره د منجمد کلتور لپاره فشار راوړونکی دی، او د حجرو د غوره وړتیا، بیا رغونې او فعالیت ډاډمن کولو لپاره مناسبه اداره کول او تخنیک ته اړتیا ده. د پخولو دقیق پروتوکولونه به د ځانګړو حجرو ډولونو پورې اړه ولري. په هرصورت، ګړندي پړسوب معیاري ګڼل کیږي:
- د حجرو په بیا رغونه کې کوم اغیز کم کړئ
- په منجمد رسنیو کې موجود محلولونو ته د افشا کولو وخت کمولو کې مرسته وکړئ
- د یخ بیا کریسټالیزیشن لخوا هر ډول زیان کم کړئ
د اوبو حمامونه، د مالګې حمامونه، یا ځانګړي اتوماتیک وسایل معمولا د نمونو د غوړولو لپاره کارول کیږي.
ډیری وختونه د 1 حجرو لاین د 1-2 دقیقو لپاره په یو وخت کې د 37 درجې د اوبو حمام کې په نرمۍ سره تیریږي تر هغه چې په شیشې کې یوازې یو کوچنی یخ پاتې وي مخکې لدې چې د ودې په مینځ کې مینځل کیږي.
د ځینو حجرو لپاره لکه د تی لرونکو جنینونو لپاره، ورو تودوخه د دوی د بقا لپاره اړینه ده.
حجرې اوس د حجرو کلتور، د حجرو جلا کولو، یا د هیماټوپوایټیک سټیم حجرو په حالت کې چمتو شوي دي - د مایلوابلیټیو درملنې دمخه د ډونر سټیم حجرو بشپړتیا تضمین کولو لپاره د وړتیا مطالعات.
دا یو عادي عمل دی چې د مخکې مینځل شوي نمونې کوچني الکوټس واخلئ چې د حجرو شمیره ترسره کولو لپاره کارول کیږي ترڅو په کلتور کې د پلی کولو لپاره د حجرو غلظت معلوم کړي. بیا تاسو کولی شئ د حجرو جلا کولو پروسیجرونو پایلې ارزونه وکړئ او د حجرو وړتیا وټاکئ.
د کریوویالونو ذخیره کولو لپاره غوره تمرینونه
په کریوویالونو کې زیرمه شوي نمونو بریالۍ کریوپریریزیشن په پروتوکول کې په ډیری عناصرو پورې اړه لري پشمول د مناسب ذخیره کولو او ریکارډ ساتل.
- حجرې د ذخیره کولو ځایونو ترمنځ ویشئ- که حجم اجازه ورکړي، حجرې د ویالونو ترمنځ ویشئ او په جلا ځایونو کې یې ذخیره کړئ ترڅو د تجهیزاتو د ناکامۍ له امله د نمونې د ضایع کیدو خطر کم کړي.
- د کراس ککړتیا مخه ونیسئ- د راتلونکي استعمال دمخه د واحد کارونې جراثیمي کریوجینک وایل یا آټوکلیو غوره کړئ
- د خپلو حجرو لپاره د مناسب اندازې شیشې وکاروئ- شیشې د 1 او 5mls تر مینځ په حجمونو کې راځي. د شیشې د ډکولو څخه ډډه وکړئ ترڅو د ټوټې کیدو خطر کم کړي.
- داخلي یا خارجي تار شوي کریوجینک شیشې غوره کړئ- داخلي تار شوي ویالونه د ځینې پوهنتونونو لخوا د خوندیتوب اقداماتو لپاره وړاندیز کیږي - دوی کولی شي د ډکولو پرمهال یا کله چې په مایع نایټروجن کې زیرمه شي د ککړتیا مخه ونیسي.
- د لیکیدو مخه ونیسئ- دوه انجکشن شوي مهرونه وکاروئ چې د سکرو کیپ یا O- حلقو کې جوړ شوي ترڅو د لیکیدو او ککړتیا مخه ونیسي.
- د 2D بارکوډونه او لیبل ویالونه وکاروئ- د موندلو وړتیا ډاډمن کولو لپاره، د لوی لیکلو ساحو سره ویالونه د دې وړتیا ورکوي چې هر شیش په کافي اندازه لیبل شي. د 2D بارکوډونه کولی شي د ذخیره کولو مدیریت او ریکارډ ساتلو کې مرسته وکړي. د رنګ کوډ شوي کیپونه د اسانه پیژندلو لپاره ګټور دي.
- د ذخیره کولو مناسب ساتنه- د دې لپاره چې ډاډ ترلاسه شي چې حجرې له لاسه نه ورکوي، د ذخیره کولو رګونه باید په دوامداره توګه د تودوخې او د مایع نایتروجن کچه وڅاري. الارمونه باید نصب شي ترڅو کاروونکو ته د غلطیو خبرتیا ورکړي.
د خوندیتوب احتیاطونه
مایع نایتروجن په عصري څیړنو کې یو عام عمل ګرځیدلی مګر که چیرې په غلط ډول وکارول شي د جدي زیان خطر لري.
مناسب شخصي محافظتي تجهیزات (PPE) باید اغوستل شي ترڅو د مایع نایټروجن اداره کولو پرمهال د یخ وهلو ، سوځیدنې او نورو ناوړه پیښو خطر کم کړي. اغوستلو
- کریوجنیک دستکشې
- لابراتوار کوټ
- د اغیزې مقاومت لرونکي بشپړ مخ پوښ چې غاړه هم پوښي
- د پښو تړل شوي بوټان
- سپلاش پروف پلاستيکي اپون
د مایع نایټروجن یخچالونه باید په ښه هوا لرونکي سیمو کې کیښودل شي ترڅو د ساه لنډۍ خطر کم کړي - د نایټروجن څخه تښتیدلي اکسیجن بخاریږي او د اتموسفیر اکسیجن بې ځایه کوي. لوی حجم پلورنځي باید د کم اکسیجن الارم سیسټمونه ولري.
په جوړه کې کار کول کله چې د مایع نایتروجن اداره کول غوره دي او د عادي کاري ساعتونو څخه بهر کارول باید منع شي.
Cryovials ستاسو د کاري فلو ملاتړ لپاره
د سوزو آیس بایو میډیکل شرکت د محصولاتو پراخه انتخاب وړاندیز کوي چې ستاسو د مختلف ډولونو حجرو لپاره د کریوپریزریشن اړتیاوې پوره کوي. په پورټ فولیو کې یو لړ ټیوبونه او همدارنګه یو لړ جراثیمي کریوویالونه شامل دي.
زموږ کریوویالونه دا دي:
-
د لابراتوار سکرو کیپ 0.5mL 1.5mL 2.0mL کریوویال کریوجینک وایل مخروط لاندې کریوټیوب د ګاسکټ سره
● 0.5ml، 1.5ml، 2.0ml مشخصات، له سکرټ سره یا پرته له سکرټ
● مخروطي یا ځان ولاړ ډیزاین، جراثیم یا غیر جراثیم دواړه شتون لري
● د سکرو کیپ ټیوبونه د طبي درجې پولی پروپیلین څخه جوړ شوي
● د پی پی کریوټیوب وایلونه په مکرر ډول منجمد او غوړیدل کیدی شي
● د بهرنۍ کیپ ډیزاین کولی شي د نمونې درملنې په جریان کې د ککړتیا احتمال کم کړي.
● سکرو کیپ کریوجینک ټیوبونه د کارونې لپاره یونیورسل سکرو تارونه
● ټیوبونه په ډیری عام روټرونو کې مناسب دي
● د کریوجینک ټیوب o-ring ټیوبونه د معیاري 1 انچ او 2 انچو ، 48 څاه، 81 څاه، 96 څاه او 100 څاه فریزر بکسونو سره مناسب دي
● د 121 درجې سانتي ګراد ته د اوتوکلو وړ او تر -86 درجو پورې د یخولو وړبرخه نمبر
مواد
حجم
CAPرنګ
PCS/بیګ
کڅوړې/کیس
ACT05-BL-N
PP
0.5ML
تور، ژیړ، نیلي، سور، ارغواني، سپین
۵۰۰
10
ACT15-BL-N
PP
1.5ML
تور، ژیړ، نیلي، سور، ارغواني، سپین
۵۰۰
10
ACT15-BL-NW
PP
1.5ML
تور، ژیړ، نیلي، سور، ارغواني، سپین
۵۰۰
10
ACT20-BL-N
PP
2.0ML
تور، ژیړ، نیلي، سور، ارغواني، سپین
۵۰۰
10
د پوسټ وخت: دسمبر-27-2022