پیژندنه
د نیوکلیک اسید استخراج څه شی دی؟
په خورا ساده شرایطو کې، د نیوکلیک اسید استخراج د نمونې څخه د RNA او/یا DNA لرې کول او ټول هغه اضافي دي چې اړین ندي. د استخراج پروسه د نمونې څخه نیوکلیک اسیدونه جلا کوي او د متمرکز الیویټ په شکل کې تولیدوي، له ککړتیاو او ککړونکو موادو څخه پاک دي چې کولی شي د لاندې زیرمو غوښتنلیکونه اغیزمن کړي.
د نیوکلیک اسید استخراج غوښتنلیکونه
پاک شوي نیوکلیک اسیدونه په ډیری بیلابیلو صنعتونو کې د مختلف غوښتنلیکونو په ډیریدو کې کارول کیږي. روغتیا پاملرنې شاید هغه ساحه وي چیرې چې دا خورا کارول کیږي ، د پاک شوي RNA او DNA سره د مختلف ازموینې اهدافو کوربه توب لپاره اړین دي.
په روغتیایی پاملرنې کې د نیوکلیک اسید استخراج غوښتنلیکونه پدې کې شامل دي:
- د راتلونکي نسل ترتیب (NGS)
- د امپلیفیکیشن پراساس SNP جینټایپینګ
- د سرې پر بنسټ جینټایپینګ
- د انزایم هضم محدودیت
- د تعدیل انزایمونو په کارولو سره تحلیلونه (د بیلګې په توګه لیګیشن او کلونینګ)
د روغتیا پاملرنې هاخوا نورې ساحې هم شتون لري چیرې چې د نیوکلیک اسید استخراج کارول کیږي ، پشمول مګر د زیږون ازموینې ، فارنزیک او جینومکس پورې محدود ندي.
د نیوکلیک اسید استخراج لنډ تاریخ
د DNA استخراجد اوږدې مودې تاریخ لري، لومړی پیژندل شوی جلا کول په 1869 کې د فریدریش مییشر په نوم د سویس ډاکټر لخوا ترسره شوی و. مییشر هیله درلوده چې د حجرو کیمیاوي جوړښت په ټاکلو سره د ژوند بنسټیز اصول حل کړي. د لیمفوسایټونو سره د ناکامۍ وروسته، هغه وتوانید چې د لیوکوسایټونو څخه د DNA خام پریپیټیټ ترلاسه کړي چې په رد شوي بنداژونو کې په pus کې موندل شوي. هغه دا کار په حجره کې د اسید او بیا الکلي په اضافه کولو سره وکړ ترڅو د حجرې سایټوپلازم پریږدي، او بیا یې یو پروتوکول رامینځته کړ چې DNA له نورو پروټینونو جلا کړي.
د Miescher د ځمکې ماتونکي څیړنې وروسته، ډیری نورو ساینس پوهانو د DNA جلا کولو او پاکولو تخنیکونو ته وده ورکړه. د پروټین ساینس پوه اډون جوزف کوهن د دوهم نړیوال جنګ په جریان کې د پروټین پاکولو لپاره ډیری تخنیکونه رامینځته کړل. هغه د وینې پلازما د سیروم البومین برخې جلا کولو مسؤل و ، کوم چې د وینې رګونو کې د اوسموټیک فشار ساتلو کې مهم دی. دا د سرتیرو د ژوندي ساتلو لپاره خورا مهم و.
په 1953 کې فرانسیس کریک، د روزالینډ فرانکلین او جیمز واټسن سره یوځای، د DNA جوړښت وټاکه، دا وښودله چې دا د نیوکلیک اسید نیوکلیوټایډونو د اوږدو زنځیرونو څخه جوړه شوې ده. دې بریا موندنې د میسلسن او سټاهل لپاره لاره هواره کړه، څوک چې د E. کولی باکتریا څخه DNA جلا کولو لپاره د کثافت تدریجي سنټرفیوګیشن پروتوکول رامینځته کولو توان درلود ځکه چې دوی د 1958 تجربې په جریان کې د DNA نیمه محافظه کار عکس العمل ښودلی و.
د نیوکلیک اسید استخراج تخنیکونه
د DNA استخراج 4 مرحلې څه دي؟
د استخراج ټولې میتودونه ورته بنسټیزو ګامونو ته راښکته کیږي.
د حجرو ګډوډي. دا مرحله چې د سیل لیسز په نوم هم پیژندل کیږي، د حجرو دیوال او/یا د حجرو غشا ماتول شامل دي، ترڅو د انټرا سیلولر مایع خوشې کړي چې د ګټو نیوکلیک اسیدونه لري.
د ناغوښتل شوي کثافاتو لرې کول. پدې کې د جھلی لیپیډونه، پروټینونه او نور ناغوښتل نیوکلیک اسیدونه شامل دي کوم چې کولی شي د لاندې جریان غوښتنلیکونو کې مداخله وکړي.
انزوا. ستاسو د جوړ شوي پاک شوي لیسټیټ څخه د ګټو نیوکلیک اسیدونو جلا کولو لپاره ډیری مختلفې لارې شتون لري، کوم چې د دوو اصلي کټګوریو ترمنځ راځي: د حل پر بنسټ یا جامد حالت (بل برخه وګورئ).
تمرکز. وروسته له دې چې نیوکلیک اسیدونه له نورو ټولو ککړونکو او مایعاتو څخه جلا شوي وي، دوی په خورا متمرکز الیویټ کې وړاندې کیږي.
د استخراج دوه ډوله
د نیوکلیک اسید استخراج دوه ډوله دي - د حل پر بنسټ میتودونه او د جامد حالت میتودونه. د حل پر بنسټ میتود د کیمیاوي استخراج میتود په نوم هم پیژندل کیږي، ځکه چې دا د کیمیاوي موادو کارول شامل دي ترڅو حجرې مات کړي او نیوکلیک موادو ته لاسرسی ومومي. دا کیدای شي د عضوي مرکباتو لکه فینول او کلوروفورم څخه کار واخلي، یا لږ زیانمنونکي او له همدې امله ډیر وړاندیز شوي غیر عضوي مرکبات لکه پروټینز K یا سیلیکا جیل.
د حجرې ماتولو لپاره د کیمیاوي استخراج مختلف میتودونو مثالونه پدې کې شامل دي:
- د غشا osmotic ټوټه ټوټه
- د حجرو دیوال انزیماتیک هضم
- د غشا محلول
- د صابون سره
- د الکولي درملنې سره
د جامد حالت تخنیکونه، چې د میخانیکي میتودونو په نوم هم پیژندل کیږي، استخراج کول شامل دي چې څنګه DNA د جامد سبسټریټ سره تعامل کوي. د مالګې یا مالیکول په ټاکلو سره چې DNA به یې وتړي مګر تحلیل کونکي به یې نه وي، دا ممکنه ده چې دواړه جلا کړئ. د جامد پړاو استخراج تخنیکونو بیلګې په شمول د سیلیکا او مقناطیسي موتی کارول.
د مقناطیسي مالګې استخراج تشریح شوی
د مقناطیسي مالا استخراج طریقه
د مقناطیسي مچیو په کارولو سره د استخراج احتمال لومړی د متحده ایالاتو په پیټینټ کې پیژندل شوی و چې د ټریور هاکنز لخوا د ویټ هیډ انسټیټیوټ څیړنې ادارې لپاره ثبت شوی و. دې پیټینټ ومنله چې دا ممکنه وه چې جینیاتي مواد د یو قوي مالتړ وړونکي سره په تړلو سره استخراج شي، کوم چې مقناطیسي مالا کیدی شي. اصل دا دی چې تاسو یو ډیر فعال مقناطیسي مالا وکاروئ چې په هغې باندې جینیاتي مواد تړل کیږي، کوم چې بیا د نمونې په ساتلو کې د رګ څخه بهر ته د مقناطیسي ځواک په پلي کولو سره د سپرناټینټ څخه جلا کیدی شي.
ولې د مقناطیسي مالګې استخراج وکاروئ؟
د مقناطیسي مالا استخراج ټیکنالوژي په زیاتیدونکي توګه پراخه کیږي، د احتمال له امله چې دا د چټک او اغیزمن استخراج پروسیجرونه لري. په دې وروستیو وختونو کې د مناسب بفر سیسټمونو سره د خورا فعال مقناطیسي موتی پرمختګونه شتون لري، کوم چې د نیوکلیک اسید استخراج او د کار فلو ممکن اتوماتیک کړی چې د سرچینې رڼا او ارزانه وي. همدارنګه، د مقناطیسي مالا استخراج میتودونه د سینټرفیوګریشن مرحلې شاملې نه کوي کوم چې کولی شي د شین ځواک لامل شي چې د DNA اوږدې ټوټې ماتوي. دا پدې مانا ده چې د DNA اوږد تارونه پاتې دي، کوم چې د جینومیک ازموینې کې مهم دی.
د پوسټ وخت: نومبر-25-2022