Jak uszczelnić płytkę do PCR

Wstęp

Płytki do PCR, będące od wielu lat podstawą pracy laboratorium, stają się jeszcze bardziej powszechne we współczesnym środowisku, w miarę jak laboratoria zwiększają swoją wydajność i coraz częściej stosują automatyzację w swoich przepływach pracy. Osiągnięcie tych celów przy jednoczesnym zachowaniu dokładności i integralności eksperymentów może być trudne. Jednym z typowych obszarów, w których mogą wkraść się błędy, jest uszczelnianiePłytki do PCR, przy złej technice umożliwiającej odparowanie próbek, zmianę pH, a tym samym zakłócanie funkcji enzymatycznych i zachęcanie do zanieczyszczenia. Nauka uszczelniania aPłytka do PCRprawidłowo eliminuje te zagrożenia i zapewnia powtarzalność wyników.

Znajdź odpowiednią uszczelkę do swojej płytki PCR

Zakrętki do płytek vs. uszczelki foliowe vs. pokrywki
Czapkito dobry sposób na szczelne zamknięcie talerza, a jednocześnie zapewnia elastyczność łatwego otwierania i ponownego zamykania talerza, według potrzeb, bez żadnych odpadów. Czapki mają jednak kilka kluczowych wad.

Po pierwsze, będziesz musiał kupić konkretną, kompatybilną czapkę, co sprawia, że ​​nie są one uniwersalne. Będziesz musiał upewnić się, że wybrana nasadka pasuje do płytki, co zależy od jej producenta, i wybrać wypukłą lub płaską w zależności od używanego termocyklera.

Po drugie, nakładanie nakrętek na płytkę może być bardzo powtarzalne i żmudne, co wiąże się z ryzykiem zakażenia krzyżowego, jeśli nałożysz niewłaściwą nakrętkę na niewłaściwą studzienkę.

Chociaż folie uszczelniające są mniej elastyczne pod względem usuwania i wymiany, są one bardzo wszechstronne, ponieważ pasują do każdego rodzaju płytki do PCR, niezależnie od producenta. Można je po prostu przyciąć na wymiar, co czyni je bardzo skutecznymi.

Inną opcją jest pokrywka do talerza. Zapewniają one mniejszą ochronę niż kołpaki i uszczelki i są używane głównie do krótkotrwałego przykrycia, aby zapobiec zanieczyszczeniu.

Uszczelki optyczne i foliowe

Niezależnie od tego, czy potrzebujesz optycznego, przezroczystego uszczelnienia, czy teżfolia aluminiowao uszczelnieniu talerza decyduje format eksperymentalny.Optyczne folie uszczelniającesą przezroczyste, co pozwala na obserwację próbek, jednocześnie je chroniąc i zapobiegając parowaniu. Są również szczególnie przydatne w eksperymentach qPCR, które wymagają wykonywania bardzo precyzyjnych pomiarów fluorescencji bezpośrednio z płytki. W takim przypadku potrzebna będzie folia uszczelniająca, która odfiltruje jak najmniej fluorescencji. Ważne jest, aby upewnić się, że używana uszczelka lub nasadka ma wystarczająco wysoki poziom przejrzystości optycznej, aby zapewnić dokładność odczytów.

Folie foliowe nadają się do wszelkich próbek wrażliwych na światło lub które mają być przechowywane w temperaturze poniżej 80°C. Z tego powodu większość próbek przeznaczonych do długotrwałego przechowywania będzie wymagać folii foliowej. Folie foliowe można również przekłuwać, co jest przydatne zarówno do badania pojedynczych dołków, jak i do przenoszenia próbek za pomocą igieł. Może to nastąpić ręcznie lub w ramach platformy zrobotyzowanej.

Weź również pod uwagę, że agresywne substancje zawierające kwasy, zasady lub rozpuszczalniki będą wymagały odpornego na nie uszczelnienia, w którym to przypadku bardziej odpowiednie będzie uszczelnienie foliowe.

Klej a folia zgrzewana
Uszczelki z folii samoprzylepnejsą bardzo proste i łatwe w zastosowaniu. Wystarczy, że użytkownik nałoży uszczelkę na płytkę i za pomocą prostego aplikatora dociśnie ją i utworzy szczelne uszczelnienie.

Zgrzewanie na gorąco jest bardziej zaawansowane i zapewnia trwalsze uszczelnienie, które charakteryzuje się zmniejszoną szybkością parowania w porównaniu z konwencjonalnym uszczelnieniem samoprzylepnym. Ta opcja jest odpowiednia, jeśli próbki mają być przechowywane przez dłuższy czas, chociaż wiąże się to z dodatkowym wymogiem dotyczącym sprzętu do uszczelniania płyt.

Jak uszczelnić płytkę do PCR

Metoda uszczelniania płyt

Samoprzylepny

1. Upewnij się, że pracujesz na płaskiej i stabilnej powierzchni roboczej

2. Wyjmij folię z opakowania i usuń warstwę ochronną

3. Ostrożnie umieść uszczelkę na płytce, upewniając się, że wszystkie dołki są zakryte

4. Użyj aplikatora, aby wywrzeć nacisk na płytkę. Zacznij od jednego końca i przejdź do drugiego, równomiernie naciskając

5. Powtórz to wiele razy

6. Przesuń aplikator wokół zewnętrznych dołków, aby upewnić się, że są one również prawidłowo uszczelnione.

Uszczelki termiczne

Zgrzewanie polega na stopieniu folii z brzegiem każdego dołka za pomocą zgrzewarki płytowej. Aby obsługiwać zgrzewarkę należy zapoznać się z instrukcją dostarczoną przez producenta urządzenia. Upewnij się, że producent, od którego pozyskujesz sprzęt, jest renomowany, ponieważ bardzo ważne jest, aby uszczelnienie było odpowiednie, skuteczne i wodoszczelne.

Najlepsze wskazówki dotyczące uszczelniania płyt

A. Naciskając uszczelkę, należy postępować zarówno w kierunku poziomym, jak i pionowym, aby zapewnić prawidłowe uszczelnienie

B. Zawsze dobrą praktyką jest uruchomienie próbne wszystkiego, co robisz, i nie inaczej jest w przypadku uszczelniania płyt. Przed użyciem płytki z próbkami należy przeprowadzić próbę na pustej płytce.

C. Podczas testowania zdejmij uszczelkę i sprawdź, czy klej dobrze przylgnął, bez szczelin. Wizualna reprezentacja tego znajduje się w pierwszym dokumencie referencyjnym. Jeśli płyta nie została prawidłowo uszczelniona, po usunięciu uszczelki pozostaną szczeliny, w których klej nie związał się całkowicie z płytą.

D. W przypadku wysyłki i transportu próbek pomocne może okazać się nałożenie plastikowej plomby na uszczelkę foliową w celu dodatkowej ochrony (zwłaszcza przed przekłuciem).

mi. Podczas nakładania folii należy zawsze zwracać uwagę, aby nie było żadnych nierówności ani zmarszczek – mogą one powodować wycieki i parowanie