Czym są kriofiolki?
Fiolki do przechowywania kriogenicznegoto małe, zakorkowane i cylindryczne pojemniki przeznaczone do przechowywania i konserwowania próbek w bardzo niskich temperaturach. Chociaż tradycyjnie fiolki te były wykonane ze szkła, obecnie znacznie częściej wykonuje się je z polipropylenu ze względu na wygodę i koszty. Cryovials zostały starannie zaprojektowane, aby wytrzymać temperatury tak niskie jak -196℃ i pomieścić szeroką gamę typów komórek. Różnią się one od diagnostycznych komórek macierzystych, mikroorganizmów, komórek pierwotnych po ustalone linie komórkowe. Poza tym mogą znajdować się w nich również małe organizmy wielokomórkowefiolki do przechowywania kriogenicznego, a także kwasy nukleinowe i białka, które należy przechowywać w temperaturze przechowywania kriogenicznego.
Fiolki do przechowywania kriogenicznego są dostępne w różnych postaciach, a znalezienie odpowiedniego typu, który spełni wszystkie Twoje potrzeby, zapewni zachowanie integralności próbki bez przepłacania. Przeczytaj nasz artykuł, aby dowiedzieć się więcej na temat kluczowych czynników branych pod uwagę przy zakupie odpowiedniej kriofiolki do Twojego zastosowania laboratoryjnego.
Właściwości fiolki kriogenicznej do rozważenia
Wątki zewnętrzne i wewnętrzne
Ludzie często dokonują tego wyboru w oparciu o osobiste preferencje, ale w rzeczywistości istnieją kluczowe różnice funkcjonalne, które należy wziąć pod uwagę pomiędzy tymi dwoma rodzajami nici.
Wiele laboratoriów często wybiera fiolki z gwintem wewnętrznym, aby zminimalizować przestrzeń do przechowywania probówek i umożliwić lepsze dopasowanie do pudełek zamrażarek. Mimo to możesz uznać, że opcja z gwintem zewnętrznym jest dla Ciebie lepszą opcją. Uważa się, że niosą one mniejsze ryzyko zanieczyszczenia ze względu na konstrukcję, która jeszcze bardziej utrudnia przedostanie się do fiolki czegokolwiek innego niż próbka.
Fiolki z gwintem zewnętrznym są ogólnie preferowane do zastosowań genomicznych, ale każda z opcji jest uważana za odpowiednią do biobankowania i innych zastosowań o dużej przepustowości.
Ostatnia rzecz do rozważenia w przypadku gwintowania – jeśli w Twoim laboratorium stosuje się automatyzację, być może będziesz musiał rozważyć, jakiego gwintu można użyć w chwytakach instrumentów.
Pojemność pamięci
Fiolki kriogeniczne są dostępne w różnych rozmiarach, aby zaspokoić większość potrzeb, ale przeważnie mają pojemność od 1 ml do 5 ml.
Najważniejsze jest, aby upewnić się, że kriofiolka nie jest przepełniona i że jest dostępne dodatkowe miejsce na wypadek, gdyby próbka pęczniała podczas zamrażania. W praktyce oznacza to, że laboratoria wybierają fiolki o pojemności 1 mL w przypadku przechowywania próbek komórek o objętości 0,5 mL zawieszonych w krioprotektantze oraz fiolki o pojemności 2,0 mL w przypadku próbki o pojemności 1,0 mL. Kolejną wskazówką, jak nie przepełniać fiolek, jest używanie kriofiolek ze stopniowanymi oznaczeniami, co zapobiegnie obrzękowi mogącemu spowodować pękanie lub wyciek.
Zakrętka vs Flip Top
Rodzaj wybranego blatu zależy głównie od tego, czy będziesz używać azotu w fazie ciekłej, czy nie. Jeśli tak, będziesz potrzebować zakręcanych fiolek kriogenicznych. Dzięki temu nie mogą się przypadkowo otworzyć w wyniku nieprawidłowej obsługi lub zmian temperatury. Dodatkowo zakrętki umożliwiają łatwiejsze wyjmowanie z pudełek kriogenicznych i efektywniejsze przechowywanie.
Jeśli jednak nie używasz ciekłego azotu i potrzebujesz wygodniejszego blatu, który jest łatwiejszy do otwarcia, lepszym rozwiązaniem będzie dach typu flip top. Dzięki temu zaoszczędzisz dużo czasu, ponieważ znacznie łatwiej jest je otworzyć, co jest szczególnie przydatne w operacjach o większej przepustowości i tych, które korzystają z procesów wsadowych.
Pieczęć bezpieczeństwa
Najlepszym sposobem zapewnienia bezpiecznego zamknięcia jest upewnienie się, że zakrętka fiolki kriowialnej i butelka są wykonane z tego samego materiału. Dzięki temu będą się kurczyć i rozszerzać jednocześnie. Jeśli są wykonane z różnych materiałów, będą się kurczyć i rozszerzać w różnym tempie wraz ze zmianami temperatury, powodując powstawanie szczelin i potencjalnych wycieków, a w konsekwencji zanieczyszczenia.
Niektóre firmy oferują podwójne podkładki i kołnierze, zapewniające najwyższy poziom bezpieczeństwa próbek w kriofiolkach z gwintem zewnętrznym. Kriofiolki z pierścieniem O-Ring są uważane za najbardziej niezawodne w przypadku kriofiolek z gwintem wewnętrznym.
Szkło kontra plastik
Ze względów bezpieczeństwa i wygody wiele laboratoriów używa obecnie plastikowych, zwykle polipropylenowych, zamiast zgrzewalnych ampułek szklanych. Ampułki szklane są obecnie uważane za przestarzały wybór, ponieważ podczas procesu uszczelniania mogą powstać niewidoczne wycieki po otworkach, które po rozmrożeniu po przechowywaniu w ciekłym azocie mogą spowodować ich eksplozję. Nie nadają się również do stosowania w nowoczesnych technikach etykietowania, co ma kluczowe znaczenie dla zapewnienia identyfikowalności próbek.
Samostojące vs zaokrąglone dna
Fiolki kriogeniczne są dostępne zarówno w wersji wolnostojącej z dnem w kształcie gwiazdy, jak i z dnem zaokrąglonym. Jeśli chcesz umieścić fiolki na powierzchni, wybierz opcję wolnostojącą
Identyfikowalność i śledzenie próbek
Ten obszar przechowywania kriogenicznego jest często pomijany, ale śledzenie i identyfikowalność próbek jest kluczowym aspektem do rozważenia. Próbki kriogeniczne można przechowywać przez wiele lat, w tym czasie personel może się zmieniać, a bez odpowiednio prowadzonej dokumentacji mogą stać się niemożliwe do zidentyfikowania.
Upewnij się, że wybierasz fiolki, które maksymalnie ułatwiają identyfikację próbki. Rzeczy, na które powinieneś zwrócić uwagę, obejmują:
Duże obszary do pisania umożliwiające zapisanie wystarczającej ilości szczegółów, aby można było znaleźć zapisy, jeśli fiolka znajduje się w niewłaściwym miejscu – zwykle wystarcza identyfikacja komórki, zamrożona data i inicjały osoby odpowiedzialnej.
Kody kreskowe ułatwiające zarządzanie próbkami i systemy śledzenia
Kolorowe czapki
Uwaga na przyszłość – opracowywane są ultraodporne na zimno chipy, które po umieszczeniu w poszczególnych kriofiolkach mogłyby potencjalnie przechowywać szczegółową historię termiczną, a także szczegółowe informacje o partii, wyniki testów i inną odpowiednią dokumentację jakościową.
Oprócz uwzględnienia różnych specyfikacji dostępnych fiolek należy również zwrócić uwagę na techniczny proces przechowywania kriofiolek w ciekłym azocie.
Temperatura przechowywania
Istnieje kilka metod przechowywania kriogenicznego próbek, każda działa w określonej temperaturze. Opcje i temperatura, w której działają, obejmują:
Faza ciekła LN2: utrzymuj temperaturę -196℃
Faza parowa LN2: mogą pracować w określonych zakresach temperatur od -135°C do -190°C, w zależności od modelu.
Zamrażarki z parą azotu: -20°C do -150°C
Rodzaj przechowywanych komórek i preferowana przez badacza metoda przechowywania określą, którą z trzech dostępnych opcji zastosuje Twoje laboratorium.
Jednak ze względu na stosowane wyjątkowo niskie temperatury nie wszystkie rury i konstrukcje będą odpowiednie i bezpieczne. Materiały mogą stać się wyjątkowo kruche w bardzo niskich temperaturach. Użycie fiolki nieodpowiedniej do użycia w wybranej temperaturze może spowodować rozbicie lub pęknięcie naczynia podczas przechowywania lub rozmrażania.
Dokładnie sprawdź zalecenia producenta dotyczące prawidłowego stosowania, ponieważ niektóre fiolki kriogeniczne nadają się do temperatur tak niskich jak -175°C, niektóre -150°C, inne tylko 80°C.
Warto również zaznaczyć, że wielu producentów twierdzi, że ich fiolki kriogeniczne nie nadają się do zanurzenia w fazie ciekłej. Jeśli fiolki te są przechowywane w fazie ciekłej po powrocie do temperatury pokojowej, fiolki lub ich nakrętki mogą pęknąć z powodu szybkiego wzrostu ciśnienia spowodowanego małymi wyciekami.
Jeśli komórki mają być przechowywane w fazie ciekłej ciekłego azotu, należy rozważyć przechowywanie komórek w odpowiednich fiolkach kriogenicznych zgrzanych w rurkach krioflexowych lub przechowywanie komórek w szklanych ampułkach, które są hermetycznie zamknięte.
Czas publikacji: 25 listopada 2022 r