Mikropipeta jest prawdopodobnie najczęściej używanym narzędziem w laboratorium. Są wykorzystywane przez naukowców z wielu różnych sektorów, w tym w środowisku akademickim, w szpitalach i laboratoriach kryminalistycznych, a także w opracowywaniu leków i szczepionek, do przenoszenia precyzyjnych, bardzo małych ilości cieczy
Chociaż zauważanie pęcherzyków powietrza w jednorazowej końcówce pipety może być denerwujące i frustrujące, jeśli nie zostaną one dostrzeżone lub zignorowane, może to mieć ogromny wpływ na wiarygodność i powtarzalność wyników.
Dobra wiadomość jest taka, że istnieje kilka prostych środków, które można podjąć, aby zapobiec powstawaniu pęcherzyków powietrza i poprawić wydajność laboratorium, satysfakcję operatora, a także dokładność i precyzję wyników.
Poniżej omawiamy konsekwencje pojawienia się pęcherzyka powietrza w końcówce pipety i opisujemy, co należy dalej zrobić.
Konsekwencje bąbelków wKońcówka do pipety
Nawet jeśli używasz najdokładniejszych, najwyższej jakości, dobrze utrzymanych, serwisowanych i skalibrowanych pipet, na wiarygodność wyników mogą mieć wpływ błędy laboratoryjne. Kiedy bąbelki dostaną się dowskazówkamoże mieć kilka wyników.
● Kiedy użytkownik zauważy pęcherzyk powietrza, musi poświęcić trochę czasu na odpowiednie dozowanie zasysanej cieczy, wysunąć końcówkę i rozpocząć proces od nowa.
● Niewykryte pęcherzyki powietrza mogą powodować transfer małej objętości, zmieniając w ten sposób stężenie mieszanin reakcyjnych, co prowadzi do nieudanych eksperymentów i wątpliwych lub niewiarygodnych wyników.
Wyniki te mogą mieć kilka konsekwencji (1).
● Zmniejszona wydajność laboratorium – testy i analizy będą musiały być powtarzane, co pociąga za sobą koszty pracy i materiałów, które mogą być dość znaczne.
● Wątpliwe lub nieprawidłowe wyniki badań – ujawnienie nieprawidłowych wyników może skutkować poważniejszymi konsekwencjami, w tym błędną diagnozą i złymi wynikami leczenia pacjenta.
● Wycofywanie manuskryptów z czasopism – jeśli współpracownicy nie powtórzą Twoich wyników z powodu pęcherzyków powietrza powodujących niedokładne wyniki, artykuły mogą zostać wycofane.
Najlepsze praktyki zapobiegania powstawaniu pęcherzyków powietrza
W większości przypadków pęcherzyki powietrza w końcówkach pipet są spowodowane błędem operatora. Podstawowym problemem jest zwykle zła technika wynikająca z niewystarczającego treningu lub zmęczenia.
Pipetowanie to wykwalifikowana operacja wymagająca 110% uwagi, odpowiedniego przeszkolenia i praktyki, aby uzyskać spójne i dokładne wyniki.
Chociaż jest kilka rzeczy, które możesz zrobić, aby zmniejszyć ogólne błędy podczas pipetowania, poniżej przedstawiliśmy kilka najlepszych praktyk, które można zastosować, aby uniknąć pęcherzyków powietrza wkońcówki do pipet.
Popraw technikę użytkownika
Pipetuj powoli
Jeśli tłok zostanie zwolniony zbyt szybko podczas zasysania, do końcówki mogą przedostać się pęcherzyki powietrza. Może to być szczególnie problematyczne podczas przenoszenia lepkich cieczy. Podobny efekt może wystąpić, jeśli tłok zostanie zwolniony zbyt szybko po dozowaniu.
Aby uniknąć pęcherzyków powietrza podczas aspiracji, należy uważać, aby tłok pipet ręcznych działał płynnie i regularnie, stosując stałą siłę.
Użyj właściwej głębokości zanurzenia
Jeśli końcówka pipety nie zostanie zanurzona wystarczająco głęboko poniżej menisku zbiornika cieczy, może to spowodować zassanie powietrza, a co za tym idzie utworzenie się pęcherzyków.
Jednakże zbyt głębokie zanurzenie końcówki może spowodować zasysanie większej ilości cieczy ze względu na zwiększone ciśnienie lub mogą pojawić się kropelki na zewnętrznej stronie końcówki, dlatego ważne jest, aby zanurzyć końcówkękońcówka pipetyna odpowiednią głębokość.
Zalecana głębokość różni się w zależności od rozmiaru, typu i marki pipety. Chociaż należy przestrzegać zaleceń producenta, poniżej znajduje się ogólny przewodnik dostarczony przez Krajowe Laboratorium Fizyczne.
Przewodnik po głębokości zanurzenia końcówki
Objętość pipety (µl) i głębokość zanurzenia (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Wstępnie zwilżonyWskazówki dotyczące pipet
Podczas pipetowania objętości większych niż 10 µlkońcówki do pipetsą zwykle wstępnie zwilżane poprzez kilkukrotne napełnienie ich dozowaną cieczą i wypuszczenie jej do odpadów w celu poprawy dokładności.
Brak ich wstępnego zwilżenia może spowodować powstawanie pęcherzyków powietrza, szczególnie w przypadku stosowania cieczy lepkich lub hydrofobowych. Aby uniknąć pęcherzyków powietrza, należy wstępnie zwilżyć końcówki podczas pipetowania objętości większej niż 10 µl.
Jeśli to konieczne, użyj technik odwrotnego pipetowania
Substancje lepkie: Częstym problemem podczas pipetowania substancji lepkich, takich jak roztwory białek lub kwasów nukleinowych, glicerol i Tween 20/40/60/80, jest częste tworzenie się pęcherzyków podczas stosowania techniki pipetowania w przód.
Powolne pipetowanie, stosując technikę pipetowania odwrotnego, zmniejsza ryzyko tworzenia się pęcherzyków podczas przenoszenia lepkich roztworów.
Technika ELISA
Pipetowanie odwrotne jest również zalecane w przypadku pipetowania małych objętości96-dołkowe mikropłytki testowedo technik ELISA. Wciągnięcie pęcherzyków powietrza do pipety lub dozowanie do dołków podczas dodawania odczynników może mieć wpływ na wartości gęstości optycznej i wyniki. Aby zminimalizować lub wyeliminować ten problem, zaleca się pipetowanie odwrotne.
Używaj ergonomicznych pipet
Pipety starego typu, które nie zostały zaprojektowane z myślą o ergonomii, wymagają większego wysiłku fizycznego, powoduje to zmęczenie, a technika pipetowania staje się niechlujna i kiepska. Błędy wymienione powyżej, takie jak szybkie zwolnienie tłoka, mogą występować częściej.
Inwestując w bardziej ergonomiczne rozwiązanie, będziesz w stanie zachować doskonałą technikę i zapobiec tworzeniu się pęcherzyków powietrza na skutek złej techniki.
Poświęć czas na przeszkolenie personelu
Regularne szkolenie i ocena personelu w zakresie technik pipetowania może zapewnić ograniczenie błędów operatora i powstawania pęcherzyków powietrza.
Rozważ bardziej zautomatyzowane rozwiązania
Jak wspomniano powyżej, większość pęcherzyków powietrza jest spowodowana przez operatora. Możliwe może być ograniczenie błędów operatora i zmniejszenie komfortu poprzez zastosowanie pipet elektronicznych lub elastycznej platformy do przenoszenia cieczy, takiej jakRobot do transportu cieczy Agilent Bravo.
Używaj dobrej jakościWskazówki dotyczące pipet
Mikropipety kupuje się zazwyczaj ostrożnie, jednak często niewiele uwagi poświęca się jakości jednorazowej końcówki pipety. Ze względu na wpływ końcówki na wyniki pipetowania, norma ISO 8655 wymaga dodatkowej kalibracji, jeśli używane są pipety i końcówki różnych producentów.
Może to wynikać z tego, że wiele tanich końcówek może początkowo wyglądać dobrze, ale po dokładnym przestudiowaniu mogą mieć przebłyski, wypukłości, zadrapania i pęcherzyki powietrza, być wygięte lub zawierać zanieczyszczenia.
Zakup dobrej jakości końcówek wykonanych z wysokiej jakości polipropylenu może ograniczyć powstawanie pęcherzyków powietrza.
Aby zakończyć
Pojawienie się pęcherzyków powietrza w końcówce pipety ma wpływ na wydajność laboratorium, a także na niedokładność i niedokładność wyników. Zauważyliśmy, że możesz zrobić kilka rzeczy, aby uniknąć przedostawania się pęcherzyków powietrza do wnętrzakońcówka pipety.
Jeśli jednak słaba jakośćkońcówki do pipetpowodują przedostawanie się pęcherzyków powietrza do końcówki pipety, z przyjemnością dowiesz się, że jest to uniwersalne rozwiązaniekońcówki do pipetsą wykonane według najwyższych standardów i wykonane z czystego polipropylenu najwyższej jakości.
Firma biomedyczna Suzhou Aceprodukują wysokiej jakości uniwersalne końcówki do pipet o pojemności 10,20,50,100,200,300,1000 i 1250 µL, 96 końcówek/rack. Wyjątkowa trwałość – wszystkie statywy na końcówki ACE spełniają wymagania związane z pipetami wielokanałowymi. Sterylne, filtrowane, wolne od RNaz/DNaz i niepirogenne.
Zapraszamy do zapytania nas o więcej szczegółów.
Czas publikacji: 29 grudnia 2022 r