5 prostych wskazówek, jak zapobiegać błędom podczas pracy z płytkami do PCR

Reakcje łańcuchowe polimerazy (PCR) są jedną z powszechnie znanych metod stosowanych w laboratoriach life science.

Płytki do PCR są produkowane z najwyższej jakości tworzyw sztucznych, co zapewnia doskonałe przetwarzanie i analizę zebranych próbek lub wyników.

Posiadają cienkie i jednorodne ścianki, które zapewniają precyzyjny transfer ciepła.

W ramach przygotowań do zastosowań w czasie rzeczywistym, maleńkie fragmenty DNA lub RNA oddziela się i przechowuje na płytkach PCR.

Płytki PCR są bardzo skuteczne w zgrzewaniu, a także ograniczają przepływ ciepła.

Jednakże, pomimo że płytki do PCR są skuteczne i niezawodne, błędy i niedokładności łatwo znikają podczas przetwarzania próbek.

Dlatego jeśli zależy Ci na dobrej i wysokiej jakościPłytki do PCR.Idealnym rozwiązaniem jest skontaktowanie się z niezawodnym producentem płytek do PCR. Dzięki temu masz pewność, że uzyskasz najlepszą ofertę.

Poniżej przedstawiono pewne środki ostrożności, których należy przestrzegać, aby uniknąć zanieczyszczenia odczynników lub próbek i zapobiec przedostawaniu się niedokładności do wyników.

Sterylizacja otoczenia
Nieprawidłowe wyniki dodatnie lub ujemne wynikają z obecności zanieczyszczeń, co powoduje, że wątpisz w wyniki.

Zanieczyszczenia i zanieczyszczenia występują w różnych postaciach, takich jak niepowiązany DNA lub dodatki chemiczne, które ostatecznie zmniejszają wydajność i skuteczność reakcji.

Istnieje wiele sposobów znacznego zmniejszenia stopnia zanieczyszczenia płytki PCR.

Stosowanie sterylizowanych końcówek z filtrem to kolejny przydatny sposób zapobiegania przedostawaniu się zanieczyszczeń do próbek przez pipety.

Przeznacz całkowicie czysty zestaw sprzętu, składający się z pipet i statywów, wyłącznie do stosowania PCR. Zagwarantuje to znikomy transfer zanieczyszczeń lub substancji zanieczyszczających po laboratorium.

Użyj wybielaczy, etanolu na pipetach, stojakach i ławach, aby wytrzeć zanieczyszczenia.

Przydziel zarezerwowaną przestrzeń dla wszystkich reakcji PCR, aby jeszcze bardziej zminimalizować zanieczyszczenie cząsteczkami.

Na każdym kroku używaj czystych rękawiczek i często je wymieniaj.

Płytki do PCR
Sprawdź stężenie i czystość szablonu.
Należy zachować czystość stanowiska i sprzętu używanego do analizy próbek metodą PCR. Istotne jest sprawdzenie stopnia czystości próbek przed analizą i przetwarzaniem.

Ogólnie rzecz biorąc, analizatory biorą pod uwagę stężenie i poziom czystości próbek DNA.

Staraj się, aby stosunek absorbancji dla 260 nm/280 nm nie mógł być mniejszy niż 1,8. Natomiast do identyfikacji zanieczyszczeń wykorzystywane są kolejne długości fal w zakresie od 230 nm do 320 nm.

Na przykład sole chaotropowe i inne związki organiczne wykrywa się przy współczynniku absorbancji 230 nm. Zmętnienie próbek DNA jest również wykrywane i weryfikowane przy współczynniku absorbancji 320 nm.

Unikać przeciążania płytek do PCR produktem
Chociaż pożądane jest jednoczesne wykorzystanie wielu produktów, skutkuje to krzyżowym zanieczyszczeniem płytek PCR.

Przeciążanie płytek do PCR różnymi produktami powoduje straty i niezwykle utrudnia identyfikację próbek.

Prowadź dokumentację dotyczącą podwielokrotnych odczynników PCR
Ciągłe cykle zamrażania/rozmrażania i częste użycie porcji mogą spowodować uszkodzenie odczynników PCR, enzymów i DNTP poprzez rekrystalizację.

Zawsze staraj się monitorować ilość użytej porcji podczas przygotowywania próbek do analizy.

Preferowany LIMS jest bardziej odpowiedni do kontrolowania zapasów i ilości odczynników i próbek zamrożonych lub rozmrożonych.

Wybierz najlepszą temperaturę wyżarzania.
Wybór i użycie niewłaściwej temperatury hybrydyzacji to kolejna metoda, w której wyniki PCR obarczone są błędami.

Czasami reakcja nie przebiega zgodnie z planem. Pożądane jest obniżenie temperatury wyżarzania, aby ułatwić pomyślny przebieg reakcji.

Jednakże obniżenie temperatury zwiększa ryzyko wystąpienia fałszywie dodatnich wyników i pojawienia się dimerów startera.

Ważne jest, aby potwierdzić analizę krzywej topnienia przy użyciu płytek do PCR, ponieważ jest to dobry wskaźnik wyboru właściwej temperatury przyłączania.

Oprogramowanie do projektowania starterów pomaga w projektowaniu, zapewnia odpowiednią temperaturę hybrydyzacji i bezpośrednio zmniejsza błędy w płytkach PCR.

Potrzebujesz wysokiej jakości płytki do PCR?
Jeśli zastanawiałeś się, gdzie znaleźć wiarygodnego producentaPłytki do PCR. Nie szukaj więcej, bo jesteś we właściwym miejscu.

Uprzejmiekliknij tutaj, aby się z nami skontaktowaćza wysokiej jakości produkty i usługi za cenę, która nie zrujnuje banku.


Czas publikacji: 30 października 2021 r