ଟେମ୍ପଲେଟ୍ କେତେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍, ଆମେ ମୋର PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଯୋଗ କରିବା ଉଚିତ୍?

ଯଦିଓ ସିଦ୍ଧାନ୍ତରେ, ଟେମ୍ପଲେଟର ଏକ ଅଣୁ ଯଥେଷ୍ଟ ହେବ, ଯଥେଷ୍ଟ DNA - ଯଥେଷ୍ଟ ପରିମାଣିକ PCR ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଲେସୋମିକ୍ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ DNA ଏବଂ 1 pg ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ | ସର୍ବୋଚ୍ଚ ପରିମାଣ ମୁଖ୍ୟତ the ଟାର୍ଗେଟ କ୍ରମର କପି ସଂଖ୍ୟାରେ, ଏବଂ ଏହା ଜଟିଳତା ଉପରେ |

ଯଦି ବହୁତ ଛୋଟ ଟାକ୍ଟ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଅମ୍ପ୍ଲାଇଜେସନ୍ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟାରେ ଏକ ଅନୁରୂପ ବୃକ୍ଷଙ୍କର ଯଥେଷ୍ଟ ପରିମାଣର ଉତ୍ପାଦ ପାଇବା ଆବଶ୍ୟକ | ଅଧିକାଂଶ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହେଉଛି ଏକ ଟ୍ୟାକ୍ ପଲିମ୍ରେଜ୍ ଏକ ସଂଶୋଧନ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ବ feature ଶିଷ୍ଟ୍ୟ କରେ ନାହିଁ (3'-5 'Exoneucle କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ); ଏହିପରି, AMPLLIG ସମୟରେ ମିଳିତ ତ୍ରୁଟି ସଂଶୋଧ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ | ବାରମ୍ବାର ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା, ତ୍ରୁଟିଯୁକ୍ତ ଉତ୍ପାଦର ଅଧିକ ପ୍ରଚଳିତ ସଂସ୍ଥା ହେବ | ଯଦି, ଅନ୍ୟ ପଟେ, ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପରିମାଣ ବହୁତ ଅଧିକ, ତେବେ ତୀକ୍ଷ୍ଣର ସମ୍ଭାବନା (ଶହେ ଥର ବିସ୍ତୃତ କ୍ଷୟ) ବୃଦ୍ଧି ପାଇବ, ଯାହା ଆଟ୍ରାଇଗଲିରେ ପରିଣତ ହେବ | ଉତ୍ପାଦିତ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ | ଅନେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ, DNA କକ୍ଷ ଚାପର କିମ୍ବା ଅଣୁଜୀବରୁ ପୃଥକ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ଏକ PCR ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | ଶୁଦ୍ଧତା ଅନୁସରଣ କରିବା, PCR ସେଟଅପ୍ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ ହେବାକୁ DNA ର ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ | ଆଗେରୋସ୍ ଗେଲ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରସାଇସ୍ ଏକ ଆକଳନ ପ୍ରଦାନ କରିବାକୁ ସେବା କରିପାରନ୍ତି, ତେବେ ଏହି ପଦ୍ଧତି ସଠିକ୍ ଠାରୁ ବହୁତ ଦୂରରେ | ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ପରିମାଣ ପାଇଁ UV-ଭି ଭି ଭି ଭି ଭି ଭି ଭିସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋଫୋଟୋମେଟ୍ରି ପ୍ରତିଷ୍ଠା କରାଯାଇଛି; ଏହି ନିର୍ଦ୍ଦେଶନା ଏବଂ ତେଣୁ ସହଜ ଏବଂ ଡିସ୍କୋ ପଦ୍ଧତି 260 NM ରେ ନମୁନା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ, ଏବଂ ଏକ ରୂପାନ୍ତର ସାହାଯ୍ୟରେ ଏକାଗ୍ରତା ଗଣନା କରାଯାଏ |

ଯଦି DNA ଏକାଗ୍ରତା ଅତି ନିମ୍ନ ଅଟେ, ତେବେ (<1 μ / ml dsdna), କିମ୍ବା ଯଦି ଏହା ପଦାର୍ଥ ସହିତ ଦୂଷିତ ହୋଇଛି ଯାହା 260 NM ରେଞ୍ଜରେ ମଧ୍ୟ ଅବଶୋଷିତ ହୁଏ (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ପ୍ରୋଟିନ୍, ସାଲ୍ସ) ରେ ଅବଶୋଷିତ ହୁଏ | ବହୁତ କମ୍ କାର୍ଯ୍ୟାନୋଜ୍ନ ଉତ୍ସାହ କ୍ଷେତ୍ରରେ, ପଠନଗୁଡ଼ିକ ଶୀଘ୍ର ବ୍ୟବହାର ହେବା ପାଇଁ ଅଧିକ ଭୁଲ ହୋଇଯିବ, ଏବଂ ଅନୁତାପର ପ୍ରକୃତ ମୂଲ୍ୟର ଅତ୍ୟଧିକ ନିର୍ଗମନ ଘଟିବ | ଏହି କ୍ଷେତ୍ରରେ, ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ପରି, ଏକ ବିକଳ୍ପ ଉପସ୍ଥାପନ କରିପାରିବ | ଏହି କ que ଶଳଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଫ୍ଲୋରୋଷ୍ଟ୍ରାକେଣ୍ଟ ଡାଏର ବ୍ୟବହାର ଉପରେ ଆଧାରିତ, ଯାହା ବିଶେଷ ଭାବରେ ବାଜିଙ୍କୁ ଆଲୋକ ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ସାହିତ କରିଥାଏ, ଏବଂ ଏହା ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ଏକ ସାମାନ୍ୟ ଉଚ୍ଚ ତରଙ୍ଗଦ endows ର୍ଘ୍ୟର ଆଲୋକକୁ ଆଲୋକିତ କରିବ | ଏଠାରେ, ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ ସିଗନାଲର ତୀବ୍ରତା DNA ର ପରିମାଣ, ଏବଂ ଏକାଗ୍ର ବକ୍ରତା ସହିତ ଏହାକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ପାଇଁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଏ | ଏହି ପଦ୍ଧତିର ସୁବିଧା ବଣ୍ଡର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଉପରେ ରହିବ, ଯାହାକି ପ୍ରଦନ୍ ଦ୍ୱାରା ଉପସ୍ଥାପିତ ବାହ୍ୟରେ ପରିଣତ ହୋଇଥିବା ବାହ୍ୟ ପ୍ରଭାବକୁ ବାଦ ଦେଇଥାଏ, ଏବଂ DNA ର ଅତି ନିକଟତରତାକୁ ଚିହ୍ନିବା ପାଇଁ ଫଳାଫଳ ବିଭାଗରେ | ଉଭୟ ପଦ୍ଧତିର ଉପଯୁକ୍ତତା ମୁଖ୍ୟତ sumple ନମୁନା ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ; ଅନେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ସମାନ୍ତରାଳ ଭାବରେ ଉଭୟ ପଦ୍ଧତି ପ୍ରୟୋଗ କରିବା ମଧ୍ୟ ପରାମର୍ଶଦାୟକ ହୋଇପାରେ |


ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ନଭେମ୍ବର -30-2022 |