ଯଦିଓ ସିଦ୍ଧାନ୍ତରେ, ଟେମ୍ପଲେଟର ଗୋଟିଏ ଅଣୁ ଯଥେଷ୍ଟ ହେବ, ବହୁ ପରିମାଣର DNA ସାଧାରଣତ a ଏକ କ୍ଲାସିକ୍ PCR ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 1 µg ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଜେନୋମିକ୍ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ DNA ଏବଂ 1 pg ପ୍ଲାସିମ DNA | ସର୍ବୋଚ୍ଚ ପରିମାଣ ମୁଖ୍ୟତ the ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମର ନକଲ ସଂଖ୍ୟା, ଏବଂ ଏହାର ଜଟିଳତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ |
ଯଦି ବହୁତ କମ୍ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ପରିମାଣର ଉତ୍ପାଦ ପାଇବା ପାଇଁ ବର୍ଦ୍ଧନ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟାରେ ଅନୁରୂପ ବୃଦ୍ଧି ଆବଶ୍ୟକ | ଅଧିକାଂଶ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ଏକ ଟ୍ୟାକ୍ ପଲିମେରେଜ୍ ଏକ ସଂଶୋଧନ କାର୍ଯ୍ୟ (3′-5 ′ ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ) ବ feature ଶିଷ୍ଟ୍ୟ କରେ ନାହିଁ | ଏହିପରି, ବୃଦ୍ଧି ସମୟରେ ଘଟୁଥିବା ତ୍ରୁଟିଗୁଡିକ ସଂଶୋଧନ କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ | ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ଯେତେ ଅଧିକ, ତ୍ରୁଟିଯୁକ୍ତ ଦ୍ରବ୍ୟର ବିସ୍ତାର ଅଧିକ ହେବ | ଯଦି, ଅନ୍ୟପକ୍ଷରେ, ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣ ଅତ୍ୟଧିକ ଅଧିକ, ଅନ୍ୟ (ଶତ ପ୍ରତିଶତ ପ୍ରଶଂସାକାରୀ ନୁହେଁ) କ୍ରମରେ ପ୍ରାଇମର୍ ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ହେବାର ସମ୍ଭାବନା, ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଡାଇମର୍ ଗଠନ ମଧ୍ୟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇବ, ଯାହା ଫଳସ୍ୱରୂପ ବୃଦ୍ଧି ପାଇବ | ଉପ-ଦ୍ରବ୍ୟ | ଅନେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ, DNA କୋଷ ସଂସ୍କୃତିରୁ କିମ୍ବା ଅଣୁଜୀବରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ PCR ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | ଶୁଦ୍ଧକରଣ ପରେ, PCR ସେଟଅପ୍ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ପରିମାଣକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ ହେବା ପାଇଁ DNA ର ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ | ଆଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଏକ ଆକଳନ ପ୍ରଦାନ କରିବାରେ ସେବା କରିପାରେ, ଏହି ପଦ୍ଧତି ସଠିକ୍ ଠାରୁ ବହୁ ଦୂରରେ | UV-Vis ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟ୍ରି ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପରିମାଣ ପାଇଁ ସୁନା ମାନକ ଭାବରେ ପ୍ରତିଷ୍ଠିତ ହୋଇଛି; ଏହି ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ ଏବଂ ତେଣୁ ସହଜ ଏବଂ ଶୀଘ୍ର ପଦ୍ଧତି 260 nm ରେ ନମୁନାର ଅବଶୋଷଣକୁ ମାପ କରିଥାଏ, ଏବଂ ଏକ ରୂପାନ୍ତର କାରକ ସାହାଯ୍ୟରେ ଏକାଗ୍ରତା ଗଣନା କରାଯାଏ |
ଯଦି ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତା ବହୁତ କମ୍, ତଥାପି (<1 µg / mL dsDNA), କିମ୍ବା ଯଦି ଏହା ପଦାର୍ଥ ସହିତ ଦୂଷିତ ହୁଏ ଯାହାକି 260 nm ପରିସର (ଯେପରିକି RNA, ପ୍ରୋଟିନ୍, ଲୁଣ) ରେ ଅବଶୋଷିତ ହୁଏ, ତେବେ ଏହି ପଦ୍ଧତି ଏହାର ସୀମାବଦ୍ଧତାରେ ପହଞ୍ଚିବ | ଅତ୍ୟଧିକ କମ୍ ଏକାଗ୍ରତା କ୍ଷେତ୍ରରେ, ପଠନ ଶୀଘ୍ର ବ୍ୟବହାରରେ ଅତ୍ୟଧିକ ଭୁଲ୍ ହୋଇଯିବ ଏବଂ ପ୍ରଦୂଷଣ ପ୍ରକୃତ ମୂଲ୍ୟର (ବେଳେବେଳେ ବିପୁଳ) ଅତ୍ୟଧିକ ମୂଲ୍ୟବୋଧର କାରଣ ହେବ | ଏହି କ୍ଷେତ୍ରରେ, ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରି ପରିମାଣ ଏକ ବିକଳ୍ପ ଉପସ୍ଥାପନ କରିପାରେ | ଏହି କ que ଶଳଟି ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ରଙ୍ଗର ବ୍ୟବହାର ଉପରେ ଆଧାରିତ ଯାହା dsDNA ସହିତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ବାନ୍ଧିଥାଏ କେବଳ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ରଙ୍ଗକୁ ନେଇ ଗଠିତ ଜଟିଳତା ଆଲୋକ ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ସାହିତ ହୋଇଥାଏ ଏବଂ ଏହା ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ଟିକିଏ ଅଧିକ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟର ଆଲୋକ ନିର୍ଗତ କରେ | ଏଠାରେ, ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ସଙ୍କେତର ତୀବ୍ରତା DNA ପରିମାଣ ସହିତ ଆନୁପାତିକ, ଏବଂ ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ଏହାକୁ ଏକ ମାନକ ବକ୍ର ସହିତ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଏ | ଏହି ପଦ୍ଧତିର ସୁବିଧା ବଣ୍ଡର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଯାହା ପ୍ରଦୂଷଣ ଦ୍ introduced ାରା ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ବାହ୍ୟ ପ୍ରଭାବକୁ ବାଦ ଦେଇଥାଏ, ଏବଂ DNA ର ଅତି ନିମ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା ଚିହ୍ନଟ କରିବାର କ୍ଷମତା ଉପରେ ମଧ୍ୟ ନିର୍ଭର କରେ | ଉଭୟ ପଦ୍ଧତିର ଉପଯୁକ୍ତତା ମୁଖ୍ୟତ sample ନମୁନା ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ; ଅନେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ସମାନ୍ତରାଳ ଭାବରେ ଉଭୟ ପଦ୍ଧତି ପ୍ରୟୋଗ କରିବା ମଧ୍ୟ ପରାମର୍ଶଦାୟକ ହୋଇପାରେ |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ନଭେମ୍ବର -30-2022 |