Kutter du avpipettespissennår du pipetterer glyserol? Det gjorde jeg under doktorgraden min, men jeg måtte lære at dette øker unøyaktigheten og unøyaktigheten i pipettering. Og for å være ærlig da jeg kuttet tuppen, kunne jeg også ha helt glyserolen fra flasken direkte i røret. Så jeg endret teknikken min for å forbedre pipetteringsresultatene og få mer pålitelige og reproduserbare resultater når jeg arbeider med viskøse væsker.
En væskekategori som trenger spesiell oppmerksomhet ved pipettering er viskøse væsker. Disse brukes ofte i laboratoriet, enten i ren form eller som bufferkomponenter. Kjente representanter for tyktflytende væsker i forskningslaboratorier er glyserol, Triton X-100 og Tween® 20. Men også laboratorier som utfører kvalitetskontroll av matvarer, kosmetikk, farmasøytiske produkter og andre forbrukerprodukter håndterer tyktflytende løsninger på daglig basis.
Viskositet angis enten som dynamisk eller kinematisk viskositet. I denne artikkelen konsentrerer jeg meg om den dynamiske viskositeten til væsker siden den beskriver bevegelsen til væsken. Graden av viskositet er spesifisert i millipascal per sekund (mPa*s). Snarere væskeprøver rundt 200 mPa*s som 85 % glyserol kan fortsatt overføres med en klassisk luftputepipette. Ved bruk av en spesiell teknikk reduseres omvendt pipettering, aspirasjon av luftbobler eller rester i spissen sterkt og fører til mer nøyaktige pipeteringsresultater. Men det er likevel ikke det beste vi kan gjøre for å forbedre pipettering av viskøse væsker (se fig. 1).
Når viskositeten øker, øker vanskelighetene. Middels viskøse løsninger opp til 1000 mPa*s er vanskeligere å overføre ved bruk av klassiske luftputepipetter. På grunn av den høye indre friksjonen til molekyler har viskøse væsker en svært langsom strømningsadferd og pipettering må gjøres veldig sakte og forsiktig. Omvendt pipetteringsteknikk er ofte ikke nok for nøyaktig væskeoverføring, og mange mennesker veier prøvene sine. Denne strategien innebærer også å ta hensyn til væskens tetthet samt laboratorieforholdene som fuktighet og temperatur for nøyaktig å beregne nødvendig væskevolum i vekt. Derfor anbefales andre pipetteverktøy, såkalte positive forskyvningsverktøy. Disse har en spiss med integrert stempel, akkurat som en sprøyte. Derfor kan væske lettere aspireres og dispenseres mens nøyaktig væskeoverføring er gitt. En spesiell teknikk er ikke nødvendig.
Likevel når også positive forskyvningsverktøy en grense med svært viskøse løsninger som flytende honning, hudkrem eller visse mekaniske oljer. Disse svært krevende væskene trenger et annet spesialverktøy som også bruker det positive forskyvningsprinsippet, men som i tillegg har en optimalisert design for å håndtere svært viskøse løsninger. Dette spesialverktøyet har blitt sammenlignet med eksisterende positive forskyvningsspisser for å oppnå en terskel der det er viktig å bytte fra en vanlig dispenseringsspiss til en spesialspiss for svært viskøse løsninger. Det ble vist at nøyaktigheten øker og kreftene som trengs for aspirasjon og dispensering reduseres ved bruk av en spesiell spiss for svært viskøse væsker. For ytterligere detaljert informasjon og væskeeksempler, last ned Applicaton Note 376 om optimalisert ytelse for svært viskøse væsker.
Innleggstid: 23-jan-2023