Mikropipetten er trolig det mest brukte verktøyet i laboratoriet. De brukes av forskere i et bredt spekter av sektorer, inkludert akademia, sykehus og rettsmedisinske laboratorier, samt utvikling av medikamenter og vaksine for å overføre nøyaktige, svært små mengder væske
Selv om det kan være irriterende og frustrerende å oppdage luftbobler i engangspipettespissen hvis de ikke blir oppdaget eller ignorert, kan det ha stor innvirkning på påliteligheten og reproduserbarheten til resultatene.
Den gode nyheten er at det er noen enkle tiltak du kan ta for å forhindre luftbobler, og forbedre laboratorieeffektiviteten, operatørtilfredsheten samt nøyaktigheten og presisjonen til resultatene.
Nedenfor ser vi på konsekvensen av å få en luftboble i pipettespissen og hva du bør gjøre videre.
Konsekvensen av bobler iPipettespiss
Selv om du bruker de mest nøyaktige, førsteklasses, godt vedlikeholdte, betjente og kalibrerte pipettene, kan påliteligheten til resultatene påvirkes av laboratoriefeil. Når bobler kommer inn ituppdet kan ha flere utfall.
● Når brukeren oppdager luftboblen, må de bruke tid på å dispensere den aspirerte væsken på riktig måte, ta ut spissen og starte prosessen på nytt.
● Uoppdagede luftbobler kan føre til lav volumoverføring, og dermed endre konsentrasjonen av reaksjonsblandinger som fører til mislykkede eksperimenter og tvilsomme eller upålitelige resultater.
Disse utfallene kan ha flere konsekvenser (1).
● Redusert laboratorieeffektivitet – Tester og analyser må gjentas, noe som medfører arbeids- og materialkostnader, som kan være ganske betydelige.
● Tvilsomme eller feilaktige testresultater – Hvis feil resultater publiseres, kan det få mer alvorlige konsekvenser, inkludert feildiagnostisering og dårlige pasientresultater.
● Tilbaketrekking av manuskripter fra journaler – Hvis jevnaldrende ikke klarer å gjenskape resultatene dine på grunn av luftbobler som forårsaker unøyaktige resultater, kan papirer trekkes tilbake.
Beste praksis for å forhindre luftbobler
I de fleste tilfeller er luftbobler i pipettespissene forårsaket av operatørfeil. Dårlig teknikk på grunn av utilstrekkelig trening eller tretthet er vanligvis det underliggende problemet.
Pipettering er en dyktig operasjon som krever 110 % oppmerksomhet, riktig trening og øvelse for å oppnå konsistente og nøyaktige resultater.
Selv om det er flere ting du kan gjøre for å redusere generelle pipetteringsfeil, har vi nedenfor fremhevet noen beste fremgangsmåter som kan brukes for å unngå luftbobler ipipettespisser.
Forbedre brukerteknikken
Pipetter sakte
Hvis stempelet slippes for raskt ved aspirasjon, kan luftbobler føres inn i spissen. Dette kan være spesielt problematisk ved overføring av viskøse væsker. En lignende effekt kan oppstå hvis stempelet slippes for raskt etter dispensering.
For å unngå luftbobler når du aspirerer, må du passe på å betjene stempelet på manuelle pipetter på en jevn og regelmessig måte, med jevn kraft.
Bruk den riktige fordypningsdybden
Unnlatelse av å senke pipettespissen dypt nok under menisken til væskereservoaret kan føre til aspirasjon av luft og dermed bobledannelse.
Men å senke spissen for dypt kan suge opp mer væske på grunn av økt trykk, eller det kan oppstå dråper på utsiden av spissen, så det er viktig å senkepipettespissentil riktig dybde.
Den anbefalte dybden varierer mellom pipettestørrelse, type og fabrikat. Selv om produsentens anbefalinger bør følges, er her en generell veiledning levert av National Physical Laboratory.
Guide til dybden på spissen
Pipettevolum (µl) og nedsenkingsdybde (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
ForvåtPipettetips
Ved pipettering av volumer større enn 10 µlpipettespisserblir vanligvis forhåndsfuktet ved å fylle dem flere ganger med væsken som dispenseres og kaste den ut til avfall for å forbedre nøyaktigheten.
Unnlatelse av å forhåndsfukte dem kan føre til luftbobler, spesielt når du bruker viskøse eller hydrofobe væsker. For å unngå luftbobler, sørg for å forhåndsfukte spissene når du pipetterer volum større enn 10 µl.
Bruk omvendt pipetteringsteknikk hvis det er hensiktsmessig
Viskøse stoffer: Et vanlig problem ved pipettering av tyktflytende stoffer som protein- eller nukleinsyreløsninger, glyserol og Tween 20/40/60/80 er den hyppige dannelsen av bobler når den fremre pipetteteknikken brukes.
Pipettering sakte, bruk av omvendt pipetteringsteknikk reduserer risikoen for bobledannelse ved overføring av viskøse løsninger.
ELISA-teknikk
Omvendt pipettering anbefales også når små volumer pipetteres inn96 brønners mikrotestplaterfor ELISA-teknikker. Når luftbobler trekkes inn i pipetten eller dispenseres i brønner når reagenser tilsettes, kan det påvirke de optiske tetthetsverdiene og resultatene. Omvendt pipettering anbefales for å minimere eller eliminere dette problemet.
Bruk ergonomiske pipetter
Pipetter i gammel stil som ikke er designet med tanke på ergonomi krever mer fysisk anstrengelse, du blir sliten og pipetteringsteknikken din blir slurvete og dårlig. Feil nevnt ovenfor, for eksempel hurtig stempelfrigjøring, kan forekomme oftere.
Ved å investere i en mer ergonomisk løsning vil du kunne opprettholde utmerket teknikk og forhindre dannelse av luftbobler på grunn av dårlig teknikk.
Ta deg tid til å lære opp personalet
Regelmessig opplæring og vurdering av personalet i pipetteringsteknikker kan sikre at operatørfeil og luftbobledannelse reduseres.
Vurder flere automatiserte løsninger
Som nevnt ovenfor er de fleste luftbobler forårsaket av operatøren. Det kan være mulig å redusere operatørfeil og komfort ved å bruke elektroniske pipetter eller en fleksibel væskehåndteringsplattform som f.eksAgilent Bravo væskehåndteringsrobot.
Bruk god kvalitetPipettetips
Mikropipetter kjøpes vanligvis med forsiktighet, men ofte tenkes det lite på kvaliteten på engangspipettespissen. På grunn av innflytelsen som en spiss har på pipeteringsresultatene, krever standard ISO 8655 en ekstra kalibrering hvis pipettene og spissene fra forskjellige produsenter brukes.
Dette kan være fordi mange billige tips kan se fine ut i utgangspunktet, men når du studerer dem nøye, kan de ha blink, fremspring, riper og luftbobler, eller være bøyd eller inneholde urenheter.
Å kjøpe spisser av god kvalitet laget av høykvalitets polypropylen kan redusere forekomsten av luftbobler.
Å konkludere
Å få luftbobler i pipettespissen har innvirkning på laboratoriets effektivitet samt unøyaktighet og unøyaktighet i resultatene. Vi har lagt merke til flere ting du kan gjøre for å unngå at luftbobler kommer inn ipipettespissen.
Men hvis dårlig kvalitetpipettespisserforårsaker at luftbobler kommer inn i pipettespissen, vil du bli glad for å vite at vår universalpassformpipettespisserer laget etter de høyeste standarder og er laget med førsteklasses ren polypropylen.
Suzhou Ace Biomedisinsk selskapprodusere høykvalitets 10,20,50,100,200,300,1000 og 1250 µL volumer universelle pipettespisser, 96 spisser/stativ. Eksepsjonell holdbarhet – alle ACE tip racks tåler kravene til bruk med flerkanals pipetter. Steril, filter, RNase-/DNase-fri og ikke-pyrogen.
Velkommen til å spørre oss for mer informasjon.
Innleggstid: 29. desember 2022