Invoering
PCR -platen, een nietje van het laboratorium gedurende vele jaren, komt nog vaker voor in de moderne setting naarmate laboratoria hun doorvoer opschalen en in toenemende mate automatisering in hun workflows gebruiken. Het bereiken van deze doelstellingen, terwijl het behoud van de nauwkeurigheid en integriteit van experimenten moeilijk kan zijn. Een van de gemeenschappelijke ruimtes waar fouten kunnen binnendringen, is bij het afdichten vanPCR -platen, met een slechte techniek die verdamping van monsters mogelijk maakt, de pH verandert en dus enzymatische functies verstoort en verontreiniging uitnodigen. Leren hoe u eenPCR -plaatElimineert correct deze risico's en zorgt voor reproduceerbare resultaten.
Vind de juiste afdichting voor uw PCR -plaat
Plaatdoppen versus filmafdichtingen versus deksels
Dopzijn een goede manier om uw bord af te sluiten met een strakke afdichting, terwijl u nog steeds de flexibiliteit geeft om de plaat heel gemakkelijk te ontdoen en door te keren zoals u nodig hebt zonder afval. Caps hebben echter een paar belangrijke nadelen.
Ten eerste moet u de specifieke cap kopen die compatibel is, waardoor ze niet veelzijdig zijn. U moet ervoor zorgen dat de dop die u kiest, in de plaat past, die afhankelijk is van de fabrikant, en kiest voor koepelvorm of plat op basis van de thermocycler die u gebruikt.
Ten tweede kan het aanbrengen van de doppen op de plaat erg repetitief en vervelend zijn, met het risico van kruisbesmetting als u de verkeerde dop op de verkeerde put plaatst.
Hoewel filmafdichtingen minder flexibel zijn in termen van het verwijderen en vervangen, zijn ze zeer veelzijdig omdat ze op elk type PCR -plaat passen, zonder rekening te houden met wie de fabrikant is. Ze kunnen eenvoudig op maat worden gesneden, waardoor ze zeer effectief zijn.
Een andere optie is een plaatdeksel. Deze bieden minder bescherming dan doppen en afdichtingen, en worden voornamelijk alleen gebruikt voor dekking op korte termijn om besmetting te voorkomen.
Optische versus foliefilmafdichtingen
Of u een optische, heldere afdichting nodig heeft of eenaluminiumfoliefilmOm je bord af te dichten wordt bepaald door je experimentele indeling.Optische afdichtingsfilmszijn transparant om u in staat te stellen monsters te observeren, terwijl u ze nog steeds beschermt en verdamping wordt voorkomen. Ze zijn ook bijzonder nuttig in qPCR -experimenten die inhoudt dat ze zeer precieze fluorescentiemetingen rechtstreeks van de plaat hebben, in welk geval u een afdichtingsfilm nodig hebt die zo weinig mogelijk fluorescentie filtert. Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat de afdichting of dop die u gebruikt een voldoende hoog niveau van optische helderheid heeft om ervoor te zorgen dat de metingen nauwkeurig zijn.
Foliefilms zijn geschikt voor monsters die lichtgevoelig zijn of moeten worden opgeslagen bij onder 80 ° C. Om deze reden vereisen de meeste monsters die bestemd zijn voor langdurige opslag een foliefilm. Foliefilms zijn ook pierceerbaar, wat handig is voor het onderzoeken van individuele putten, of voor de overdracht van monsters door naalden. Dit kan handmatig of als onderdeel van een robotplatform optreden.
Overweeg ook dat agressieve stoffen die zuren, basen of oplosmiddelen omvatten, een afdichting vereisen die hen kan weerstaan, in welk geval een folieafdichting waarschijnlijk geschikter is.
Lijm versus warmteafdichtingsfilm
Lijmfilmafdichtingenzijn heel eenvoudig en gemakkelijk van toepassing. Het enige dat u nodig hebt, is dat een gebruiker de afdichting op de plaat aanbrengt en een eenvoudig applicatorgereedschap gebruikt om naar beneden te drukken en een strakke afdichting te vormen.
Warmteafdichtingen zijn geavanceerder en bieden een langere afdichting met verminderde verdampingssnelheden in vergelijking met een conventionele lijmafdichting. Deze optie is geschikt als u op de lange termijn monsters wilt opslaan, hoewel dit wel een extra vereiste voor plaatafdichtingsapparatuur heeft.
Hoe u een PCR -plaat afdicht
Plaatafdichtingsmethode
Zelfklevend
1. Zorg ervoor dat u aan een platte en stabiele werkoppervlak werkt
2. Verwijder de film uit de verpakking en verwijder de achterkant
3. Plaats de afdichting voorzichtig op de plaat, terwijl u ervoor zorgt dat alle putten bedekt zijn
4. Gebruik een applicatorgereedschap om druk uit te oefenen over de plaat. Begin van het ene uiteinde en werk je een weg naar het andere, gelijkmatig drukken
5. Herhaal dit vele keren
6. Ren uw applicator rond de buitenputten, om ervoor te zorgen dat deze ook correct zijn verzegeld.
Warmteafdichtingen
Warmteafdichtingen werken door de film te smelten tot de rand van elke put, met behulp van een plaatafdichter. Raadpleeg de instructies van de fabrikant van de apparatuur om een warmtekaarder te bedienen. Zorg ervoor dat de fabrikant waar u uw apparatuur vandaan verzorgt, gerenommeerd is, omdat het erg belangrijk is dat de afdichting correct, effectief en waterdicht is.
Plaatafdichtingstips
A. Ga bij het uitoefenen van druk op de afdichting in zowel horizontale als verticale richtingen om een goede afdichting te garanderen
B. Het is altijd een goede gewoonte om een testrun te doen van wat je ook doet, en dit is niet anders met plaatafdichting. Test met een lege plaat voordat u er een met monsters gebruikt.
C. Tijdens het testen, haal de afdichting uit en kijk om te zien dat de lijm goed vasthield, zonder hiaten. Er is een visuele weergave hiervan in het eerste referentiedocument. Als u de plaat niet goed hebt verzegeld, zijn er wanneer u de afdichting verwijdert, openingen waarbij de lijm niet volledig aan de plaat is gebonden.
D. Voor verzending en transport van monsters kan het nuttig vinden om een plastic afdichting op de foliedichting aan te brengen voor extra bescherming (vooral tegen piercing).
e. Zorg er altijd voor dat er geen hobbels of rimpels zijn bij het aanbrengen van de film - deze zullen lekken en verdamping veroorzaken
Posttijd: nov-23-2022