Net als een chef-kok die een mes gebruikt, heeft een wetenschapper pipetteervaardigheden nodig. Een doorgewinterde chef-kok kan schijnbaar zonder nadenken een wortel in linten snijden, maar het kan nooit kwaad om enkele richtlijnen voor het pipetteren in gedachten te houden, hoe ervaren de wetenschapper ook is. Hier bieden drie experts hun beste tips.
“Je moet voorzichtig zijn met de juiste techniek bij het handmatig doseren van vloeistof”, zegt Magali Gaillard, senior manager portfolio management, MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-bel, Frankrijk). “Enkele van de meest voorkomende pipetteerfouten houden verband met onzorgvuldig gebruik van pipetpunten, inconsistent ritme of timing, en onjuiste omgang met de pipet.”
Soms kiest een wetenschapper zelfs de verkeerde pipet. Zoals Rishi Porecha, wereldwijd productmanager bijRegenInstruments (Oakland, CA), zegt: "Enkele veel voorkomende fouten bij het pipetteren zijn onder meer het niet gebruiken van de juiste volumepipet voor een specifieke taak en het gebruik van een luchtverplaatsingspipet om niet-waterige vloeistof te verwerken." Bij viskeuze vloeistoffen moet altijd een verdringerpipet worden gebruikt.
Voordat we overgaan tot specifieke pipetteerprocedures, moeten enkele algemene concepten in overweging worden genomen. "Elke keer dat pipetgebruikers aan het werk gaan, moeten ze overwegen welk experiment ze doen, met welke vloeistoffen ze werken en welke doorvoer ze wensen voordat ze een pipet kiezen", zegt Porecha. “Realistisch gezien heeft geen enkel laboratorium alle pipetten die een gebruiker nodig heeft, maar als een gebruiker kijkt welke hulpmiddelen beschikbaar zijn in het laboratorium en op de afdeling, krijgt hij misschien een beter idee van welke bestaande pipetten in een test moeten worden geïmplementeerd of van welke pipetten ze misschien willen kopen.”
De functies die beschikbaar zijn in de hedendaagse pipetten reiken verder dan het apparaat zelf. Vooruitgang op het gebied van vloeistofverwerking heeft het voor gebruikers nu mogelijk gemaakt om hun pipet met de cloud te verbinden. Met deze connectiviteit kan een gebruiker protocollen downloaden of aangepaste protocollen maken. Pipetteergegevens kunnen zelfs in de cloud worden vastgelegd, wat een manier is om eventuele misstappen te identificeren en het pipetteerproces te verbeteren, vooral door de aanhoudende nauwkeurigheid, of het gebrek daaraan, te volgen.
Met de juiste apparatuur in de hand is de volgende uitdaging het zetten van de juiste stappen.
Sleutel tot succes
Met een luchtverplaatsingspipet vergroten de volgende stappen de kans op het nauwkeurig en herhaaldelijk meten van een specifiek volume:
- Stel het volume op de pipet in.
- Druk de zuiger in.
- Dompel de tip onder tot de juiste diepte, die kan variëren per pipet en tip, en laat de plunjer soepel naar zijn rustpositie gaan.
- Wacht ongeveer een seconde totdat de vloeistof in de vloeistof stroomttip.
- Plaats de pipet – op een hoek van 10–45 graden gehouden – tegen de wand van de opvangkamer en druk de zuiger soepel in tot de eerste aanslag.
- Wacht één seconde en druk vervolgens de zuiger tot de tweede stop in.
- Schuif de punt langs de vaatwand om de pipet te verwijderen.
- Laat de plunjer terugkeren naar zijn rustpositie.
Posttijd: 12 december 2022