De micropipet is waarschijnlijk het meest gebruikte hulpmiddel in het laboratorium. Ze worden gebruikt door wetenschappers in een breed scala aan sectoren, waaronder de academische wereld, ziekenhuizen en forensische laboratoria, en in de ontwikkeling van medicijnen en vaccins, om nauwkeurige, zeer kleine hoeveelheden vloeistof over te brengen.
Hoewel het vervelend en frustrerend kan zijn om luchtbelletjes in de punt van een wegwerppipet te zien als je ze niet opmerkt of negeert, kan dit een grote impact hebben op de betrouwbaarheid en reproduceerbaarheid van de resultaten.
Het goede nieuws is dat u een aantal eenvoudige maatregelen kunt nemen om luchtbellen te voorkomen en de efficiëntie in het lab, de tevredenheid van de operator en de nauwkeurigheid en precisie van de resultaten te verbeteren.
Hieronder bespreken we wat de gevolgen zijn als er een luchtbel in de pipetpunt komt en wat u vervolgens moet doen.
De gevolgen van bubbels in dePipetpunt
Zelfs als u de meest nauwkeurige, hoogwaardige, goed onderhouden en gekalibreerde pipetten gebruikt, kan de betrouwbaarheid van uw resultaten worden beïnvloed door laboratoriumfouten. Wanneer er bellen in detipHet kan verschillende uitkomsten hebben.
● Wanneer de gebruiker de luchtbel opmerkt, moet hij/zij de tijd nemen om de opgezogen vloeistof op de juiste manier af te geven, de punt eruit te werpen en het proces opnieuw te beginnen.
● Onopgemerkte luchtbellen kunnen leiden tot een overdracht van een laag volume, waardoor de concentratie van de reactiemengsels verandert. Dit kan leiden tot mislukte experimenten en twijfelachtige of onbetrouwbare resultaten.
Deze uitkomsten kunnen verschillende gevolgen hebben (1).
● Verminderde efficiëntie in het laboratorium – Tests en analyses moeten worden herhaald, wat leidt tot aanzienlijke arbeids- en materiaalkosten.
● Twijfelachtige of onjuiste testresultaten – Als er onjuiste resultaten worden vrijgegeven, kan dit ernstigere gevolgen hebben, waaronder een verkeerde diagnose en slechte patiëntresultaten.
● Intrekking van manuscripten uit tijdschriften – Als collega's er niet in slagen uw resultaten te reproduceren vanwege luchtbellen die onnauwkeurige resultaten opleveren, kunnen artikelen worden ingetrokken.
Beste praktijken om luchtbellen te voorkomen
In de meeste gevallen worden luchtbellen in pipetpunten veroorzaakt door fouten van de gebruiker. Slechte techniek, bijvoorbeeld door onvoldoende training of vermoeidheid, is meestal het onderliggende probleem.
Pipetteren is een ambachtelijke handeling die 110% aandacht, de juiste training en oefening vereist om consistente en nauwkeurige resultaten te behalen.
Hoewel er verschillende dingen zijn die u kunt doen om algemene pipetteerfouten te verminderen, hebben we hieronder enkele best practices uitgelicht die u kunt gebruiken om luchtbellen in uw pipet te voorkomen.pipetpunten.
Verbeter de gebruikerstechniek
Pipetteer langzaam
Als de zuiger te snel wordt losgelaten tijdens het aspireren, kunnen er luchtbellen in de punt terechtkomen. Dit kan vooral problematisch zijn bij het overbrengen van viskeuze vloeistoffen. Een vergelijkbaar effect kan optreden als de zuiger te snel wordt losgelaten na het doseren.
Om luchtbellen bij het opzuigen te voorkomen, moet u ervoor zorgen dat u de zuiger van handpipetten soepel en regelmatig beweegt en daarbij een constante kracht uitoefent.
Gebruik de juiste onderdompelingsdiepte
Als de pipetpunt niet diep genoeg onder de meniscus van het vloeistofreservoir wordt gedompeld, kan er lucht worden aangezogen en kunnen er bellen ontstaan.
Als u de punt echter te diep onderdompelt, kan er meer vloeistof worden opgezogen vanwege de verhoogde druk, of kunnen er druppels aan de buitenkant van de punt ontstaan. Daarom is het belangrijk om de punt te diep onder te dompelen.pipetpunttot de juiste diepte.
De aanbevolen diepte varieert afhankelijk van de grootte, het type en het merk van de pipet. Hoewel de aanbevelingen van de fabrikant gevolgd moeten worden, volgt hier een algemene richtlijn van het National Physical Laboratory.
Gids voor diepte van tip-immersie
Pipetvolume (µl) en immersiediepte (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
VoorbevochtigenPipetpunten
Bij het pipetteren van volumes groter dan 10µlpipetpuntenworden meestal vooraf bevochtigd door ze meerdere malen te vullen met de te doseren vloeistof en deze vervolgens af te voeren om de nauwkeurigheid te verbeteren.
Als u de tips niet voorbevochtigt, kunnen er luchtbellen ontstaan, vooral bij gebruik van viskeuze of hydrofobe vloeistoffen. Om luchtbellen te voorkomen, moet u de tips voorbevochtigen bij pipetteervolumes groter dan 10 µl.
Gebruik indien nodig omgekeerde pipetteertechnieken
Viskeuze stoffen: Een veelvoorkomend probleem bij het pipetteren van viskeuze stoffen, zoals oplossingen van eiwitten of nucleïnezuren, glycerol en Tween 20/40/60/80, is de frequente vorming van bellen bij gebruik van de voorwaartse pipetteertechniek.
Door langzaam te pipetteren met behulp van de omgekeerde pipetteertechniek, wordt het risico op bellenvorming bij het overbrengen van viskeuze oplossingen verminderd.
ELISA-techniek
Omgekeerd pipetteren wordt ook aanbevolen bij het pipetteren van kleine volumes in96-wells microtestplatenVoor ELISA-technieken. Wanneer er luchtbellen in de pipet worden gezogen of in de wells terechtkomen tijdens het toevoegen van reagentia, kan dit de optische dichtheid en de resultaten beïnvloeden. Omgekeerd pipetteren wordt aanbevolen om dit probleem te minimaliseren of te elimineren.
Gebruik ergonomische pipetten
Ouderwetse pipetten die niet ergonomisch zijn ontworpen, vereisen meer fysieke inspanning, je raakt vermoeid en je pipetteertechniek wordt slordig en slecht. De bovengenoemde fouten, zoals het snel loslaten van de zuiger, kunnen vaker voorkomen.
Door te investeren in een meer ergonomische oplossing kunt u een uitstekende techniek behouden en voorkomt u de vorming van luchtbellen door slechte techniek.
Neem de tijd om personeel te trainen
Door uw personeel regelmatig te trainen en te beoordelen op pipetteertechnieken, kunt u ervoor zorgen dat bedieningsfouten en de vorming van luchtbellen worden beperkt.
Overweeg meer geautomatiseerde oplossingen
Zoals hierboven vermeld, worden de meeste luchtbellen veroorzaakt door de operator. Het is mogelijk om operatorfouten en comfort te verminderen door elektronische pipetten of een flexibel vloeistofverwerkingsplatform te gebruiken, zoals deAgilent Bravo vloeistofverwerkingsrobot.
Gebruik goede kwaliteitPipetpunten
Micropipetten worden doorgaans met zorg aangeschaft, maar er wordt vaak weinig aandacht besteed aan de kwaliteit van de wegwerppipetpunt. Vanwege de invloed die een punt heeft op de pipetteerresultaten, vereist de norm ISO 8655 een extra kalibratie bij gebruik van pipetten en punten van verschillende fabrikanten.
Dat kan komen doordat veel goedkope tips er in eerste instantie prima uitzien, maar als je ze goed bekijkt, kunnen er vlekjes, uitsteeksels, krassen en luchtbelletjes in zitten. Ook kunnen ze verbogen zijn of onzuiverheden bevatten.
Door goede tips te kopen die gemaakt zijn van hoogwaardig polypropyleen, kunt u de kans op luchtbellen verkleinen.
Tot slot
Luchtbellen in uw pipetpunt hebben invloed op de efficiëntie van het laboratorium en kunnen leiden tot onnauwkeurigheden en onnauwkeurigheden in de resultaten. We hebben een aantal dingen op een rijtje gezet die u kunt doen om te voorkomen dat er luchtbellen in de pipetpunt komen.pipetpunt.
Als de kwaliteit echter slecht is,pipetpuntenAls er luchtbellen in uw pipetpunt terechtkomen, zult u blij zijn te horen dat onze universele pasvormpipetpuntenworden vervaardigd volgens de hoogste normen en zijn gemaakt van hoogwaardig, zuiver polypropyleen.
Suzhou Ace Biomedisch bedrijfProduceert hoogwaardige universele pipetpunten met volumes van 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 en 1250 µL, 96 punten per rek. Uitzonderlijke duurzaamheid – alle ACE-tiprekken voldoen aan de eisen van gebruik met multikanaalspipetten. Steriel, filter, RNase-/DNase-vrij en pyrogeenvrij.
Neem gerust contact met ons op voor meer informatie.
Plaatsingstijd: 29-12-2022