5 eenvoudige tips om fouten te voorkomen bij het werken met PCR-platen

Polymerasekettingreacties (PCR) zijn een van de algemeen bekende methoden die in biowetenschappelijke laboratoria worden gebruikt.

De PCR-platen zijn vervaardigd uit eersteklas kunststoffen voor een uitstekende verwerking en analyse van de verzamelde monsters of resultaten.

Ze hebben dunne en homogene wanden voor een nauwkeurige thermische overdracht.

Ter voorbereiding op real-time toepassingen worden kleine stukjes DNA of RNA afgezonderd en opgeslagen in PCR-platen.

De PCR-platen zijn zeer efficiënt in het smeltlassen en beperken ook de warmtestroom.

Hoe effectief en betrouwbaar de PCR-platen ook zijn, fouten en onnauwkeurigheden treden gemakkelijk op tijdens het verwerken van monsters.

Daarom, als u geïnteresseerd bent in het verkrijgen van een goede en hoge kwaliteitPCR-platen.Het is ideaal om contact op te nemen met een betrouwbare fabrikant van PCR-platen. Hiermee bent u verzekerd van de beste deal.

Hier volgen enkele voorzorgsmaatregelen die u moet volgen om besmetting van reagentia of monsters te voorkomen en om te voorkomen dat er onnauwkeurigheden in de resultaten terechtkomen.

Steriliseren van de omgeving
Onjuiste positieve of negatieve resultaten treden op vanwege de aanwezigheid van onzuiverheden, waardoor u aan de resultaten twijfelt.

Onzuiverheden en verontreinigingen komen in verschillende vormen voor, zoals niet-verwant DNA of chemische additieven die uiteindelijk de efficiëntie en effectiviteit van de reactie verminderen.

Er zijn talloze manieren om de mate van vervuiling van de PCR-plaat aanzienlijk te verminderen.

Het gebruik van gesteriliseerde filtertips is een andere handige manier om te voorkomen dat onzuiverheden via de pipetten in uw monsters terechtkomen.

Zorg voor een volledig schone set apparatuur, bestaande uit pipetten en rekken, uitsluitend voor het gebruik van PCR. Dit garandeert een verwaarloosbare overdracht van onzuiverheden of verontreinigingen door het laboratorium.

Gebruik bleekmiddelen en ethanol op de pipetten, rekken en banken om verontreinigingen weg te vegen.

Wijs een gereserveerde ruimte toe voor al uw PCR-reacties om deeltjesverontreiniging verder te minimaliseren.

Gebruik bij elke stap schone handschoenen en vervang ze regelmatig.

PCR-platen
Inspecteer de concentratie en zuiverheid van de sjabloon.
De reinheid van de bank en de apparatuur die wordt gebruikt bij het analyseren van monsters met de PCR moet worden gehandhaafd. Het is essentieel om de zuiverheidsgraad van de monsters te valideren vóór analyse en verwerking.

Over het algemeen houden analysatoren rekening met de concentratie en het zuiverheidsniveau van de DNA-monsters.

Streef ernaar dat de absorptieverhouding voor 260 nm/280 nm niet minder dan 1,8 bedraagt. Terwijl daaropvolgende golflengten tussen 230 nm en 320 nm worden gebruikt om onzuiverheden te identificeren.

Soms worden chaotrope zouten en andere organische verbindingen gedetecteerd bij een absorptiesnelheid van 230 nm. Terwijl troebelheid in DNA-monsters ook wordt gedetecteerd en geverifieerd bij een absorptiesnelheid van 320 nm.

Vermijd het overladen van PCR-platen met product
Hoe graag het ook gewenst is om meerdere producten tegelijkertijd te laten werken, het resulteert in kruisbesmetting van de PCR-platen.

Het overladen van de PCR-platen met verschillende producten leidt tot verspilling en maakt het uiterst moeilijk om de monsters te verifiëren.

Houd gegevens bij van de hoeveelheid PCR-reagentia
Voortdurende vries-/dooicycli en frequent gebruik van aliquots kunnen de PCR-reagentia, enzymen en DNTP's beschadigen door herkristallisatie.

Probeer altijd de gebruikte hoeveelheid aliquot te controleren tijdens het voorbereiden van de te analyseren monsters.

Bij voorkeur is LIMS geschikter voor het controleren van de inventaris en de hoeveelheid reagentia en monsters die bevroren of ontdooid zijn.

Kies de beste gloeitemperatuur.
Het kiezen en gebruiken van de verkeerde gloeitemperatuur is nog een andere methode. PCR-resultaten bevatten fouten.

Soms verloopt de reactie niet zoals gepland. Het is gewenst om de gloeitemperatuur te verlagen om een ​​succesvolle reactie te vergemakkelijken.

Het verlagen van de temperatuur vergroot echter de kans op valse positieven en het verschijnen van primerdimeren.

Het is belangrijk om de analyse van de smeltcurve te bevestigen bij gebruik van de PCR-platen, omdat dit een goede indicator is voor het selecteren van de juiste gloeitemperatuur.

Primerontwerpsoftware helpt bij het ontwerpen, het bieden van de juiste gloeitemperatuur en vermindert direct de fouten in de PCR-platen.

Heeft u een PCR-plaat van hoge kwaliteit nodig?
Als u erover nadenkt waar u een betrouwbare fabrikant van kunt vindenPCR-platen. Zoek niet langer, want u bent op de juiste plaats.

Vriendelijkklik hier om contact met ons op te nemenvoor producten en service van hoge kwaliteit tegen een prijs die de bank niet kapot maakt.


Posttijd: 30 oktober 2021