०.२ देखि ५ μL सम्मको भोल्युम पाइपिङ गर्दा, पाइपिङको शुद्धता र परिशुद्धता अत्यन्त महत्त्वपूर्ण हुन्छ, राम्रो पाइपिङ प्रविधि आवश्यक हुन्छ किनभने ह्यान्डलिङ गल्तीहरू सानो मात्रामा बढी स्पष्ट हुन्छन्।
अभिकर्मकहरू र लागतहरू घटाउनमा थप ध्यान केन्द्रित गरिएको हुनाले, साना मात्राहरू उच्च मागमा छन्, जस्तै, PCR मास्टरमिक्स वा इन्जाइम प्रतिक्रियाहरूको तयारीको लागि। तर 0.2 - 5 μL बाट सानो भोल्युम पाइपिङले पाइपिङ शुद्धता र सटीकताका लागि नयाँ चुनौतीहरू सेट गर्दछ। निम्न बुँदाहरू आवश्यक छन्:
- पिपेट र टिप साइज: सधैं सम्भव भएसम्म सबैभन्दा कम नाममात्र भोल्युमको साथ पिपेट छनौट गर्नुहोस् र हावा कुशनलाई सकेसम्म सानो राख्न सबैभन्दा सानो टिप। 1 μL जस्तै पाइपिङ गर्दा, 0.25 - 2.5 μL पिपेट र 1 - 10 μL पिपेटको सट्टा मिल्दो टिप छान्नुहोस्।
- क्यालिब्रेसन र मर्मतसम्भार: यो आवश्यक छ कि तपाईंको पाइपेटहरू ठीकसँग क्यालिब्रेट र मर्मत गरिएको छ। पिपेटमा सानो समायोजन र टुटेका भागहरूले व्यवस्थित र अनियमित त्रुटि मानहरूमा ठूलो वृद्धिको नेतृत्व गर्दछ। ISO 8655 अनुसार एक क्यालिब्रेसन वर्षमा एक पटक प्रदर्शन गर्नुपर्छ।
- सकारात्मक विस्थापन पिपेटहरू: यदि तपाइँसँग तपाइँको प्रयोगशालामा कम भोल्युम दायराको साथ सकारात्मक विस्थापन पिपेट छ भने जाँच गर्नुहोस्। सामान्यतया, यस प्रकारको पिपेटको प्रयोगले क्लासिक एयर कुशन पिपेटको तुलनामा शुद्धता र परिशुद्धताको सर्तमा राम्रो पाइपिङ परिणाम निम्त्याउँछ।
- ठूला भोल्युमहरू प्रयोग गर्ने प्रयास गर्नुहोस्: तपाईंले अन्तिम प्रतिक्रियामा समान मात्रामा ठूलो मात्रामा पिपेट गर्न आफ्नो नमूनालाई पातलो गर्ने विचार गर्न सक्नुहुन्छ। यसले धेरै सानो नमूना भोल्युमहरूसँग पाइपिङ त्रुटिहरू कम गर्न सक्छ।
राम्रो उपकरणको अतिरिक्त, शोधकर्तासँग धेरै राम्रो पाइपिङ प्रविधि हुनुपर्छ। निम्न चरणहरूमा विशेष ध्यान दिनुहोस्:
- टिप एट्याचमेन्ट: पिपेटलाई टिपमा जाम नगर्नुहोस् किनकि यसले राम्रो टिपको टुप्पोलाई हानि पुर्याउन सक्छ र तरल किरण रिडिरेक्ट हुन सक्छ वा छिद्रलाई क्षति पुर्याउँछ। टिप जोड्दा मात्र हल्का दबाब लागू गर्नुहोस् र वसन्त-लोड टिप कोनको साथ पिपेट प्रयोग गर्नुहोस्।
- पिपेट समात्दै: सेन्ट्रीफ्यूज, साइकल, इत्यादिको पर्खाइमा आफ्नो हातमा पिपेट नराख्नुहोस्। पिपेटको भित्री भाग तातो हुन्छ र हावा कुशनलाई विस्तार गर्न लैजान्छ जसले गर्दा पाइपिङ गर्दा सेट भोल्युमबाट विचलन हुन्छ।
- पूर्व-भिजाउने: टिप र पिपेट भित्रको हावाको आर्द्रीकरणले नमूनाको लागि टिप तयार गर्दछ र स्थानान्तरण भोल्युमको आकांक्षा गर्दा वाष्पीकरणलाई जोगाउँछ।
- ठाडो आकांक्षा: पिपेट कोणमा राखिएको बेला हुने केशिका प्रभावबाट बच्न सानो मात्राहरू ह्यान्डल गर्दा यो धेरै महत्त्वपूर्ण हुन्छ।
- विसर्जन गहिराइ: केशिका प्रभावको कारणले तरललाई टिपमा प्रवेश गर्नबाट रोक्नको लागि टिपलाई सकेसम्म थोरै डुबाउनुहोस्। थम्बको नियम: टिप र भोल्युम जति सानो हुन्छ, विसर्जनको गहिराइ कम हुन्छ। सानो भोल्युम पाइपिङ गर्दा हामी अधिकतम 2 मिमी सिफारिस गर्छौं।
- ४५° कोणमा वितरण: पिपेटलाई ४५° कोणमा राख्दा तरल पदार्थको इष्टतम प्रवाहको ग्यारेन्टी गरिन्छ।
- भाँडाको पर्खाल वा तरल सतहमा सम्पर्क गर्नुहोस्: सानो भोल्युमहरू तब मात्र ठीकसँग वितरण गर्न सकिन्छ जब टिपलाई भाँडाको भित्तामा राखिएको हुन्छ, वा तरल पदार्थमा डुबाइन्छ। टिपबाट अन्तिम ड्रप पनि सही रूपमा वितरण गर्न सकिन्छ।
- ब्लो-आउट: टिपमा रहेको तरल पदार्थको अन्तिम थोपा पनि वितरण गर्न कम मात्रामा वितरण गरेपछि ब्लो-आउट अनिवार्य हुन्छ। ब्लो-आउट पनि भाँडाको पर्खालको बिरूद्ध गरिनु पर्छ। तरल सतहमा ब्लो-आउट प्रदर्शन गर्दा नमूनामा हावाका बुलबुलेहरू नआउन सावधान हुनुहोस्।
पोस्ट समय: फेब्रुअरी-18-2021