လုပ်ငန်းစဉ်များ၏ စံချိန်စံညွှန်းသတ်မှတ်ခြင်းတွင် ၎င်းတို့၏ ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းနှင့် နောက်ဆက်တွဲဖွဲ့စည်းမှုနှင့် သဟဇာတဖြစ်မှုတို့ပါဝင်ပြီး သုံးစွဲသူမှ ကင်းလွတ်သော ရေရှည်အကောင်းဆုံးစွမ်းဆောင်ရည်ကို ခွင့်ပြုပေးပါသည်။ စံချိန်စံညွှန်းသတ်မှတ်ခြင်းသည် အရည်အသွေးမြင့် ရလဒ်များအပြင် ၎င်းတို့၏ မျိုးပွားနိုင်မှုနှင့် နှိုင်းယှဉ်မှုကို အာမခံပါသည်။
(ဂန္ထဝင်) PCR ၏ပန်းတိုင်သည် ယုံကြည်စိတ်ချရပြီး မျိုးပွားနိုင်သောရလဒ်၏မျိုးဆက်ဖြစ်သည်။ အချို့သော applications များအတွက်, ၏အထွက်နှုန်းPCR ထုတ်ကုန်သက်ဆိုင်ပါသည်။ ဤတုံ့ပြန်မှုများအတွက်၊ နမူနာများကို အပေးအယူမခံရစေရန်နှင့် PCR အလုပ်အသွားအလာတည်ငြိမ်ကြောင်း သေချာစေရန် ဂရုပြုရပါမည်။ အထူးသဖြင့်၊ ၎င်းသည် မှားယွင်းသော အပြုသဘောဆောင်သော သို့မဟုတ် မှားယွင်းသောအနုတ်လက္ခဏာရလဒ်များဆီသို့ ဦးတည်သွားစေနိုင်သည့် သို့မဟုတ် PCR တုံ့ပြန်မှုကိုပင် ဟန့်တားနိုင်သည့် ညစ်ညမ်းမှုနိဒါန်းကို လျှော့ချခြင်းသို့ ဆိုလိုသည်။ ထို့အပြင်၊ တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများသည် လည်ပတ်မှုတစ်ခုအတွင်း နမူနာတစ်ခုစီအတွက် ဖြစ်နိုင်သမျှတူညီသင့်ပြီး နောက်ဆက်တွဲတုံ့ပြန်မှုများ (တူညီသောနည်းလမ်း၏) ကိုလည်း လွှဲပြောင်းနိုင်သည်။ ၎င်းသည် တုံ့ပြန်မှုများ၏ဖွဲ့စည်းမှုအပြင် စက်ဘီးစီးသူရှိ အပူချိန်ထိန်းချုပ်မှုအမျိုးအစားကို ရည်ညွှန်းသည်။ User error များကို တတ်နိုင်သမျှ ရှောင်ရှားသင့်ပါသည်။
အောက်တွင် ကျွန်ုပ်တို့သည် ပြင်ဆင်မှုအတွင်းနှင့် PCR လည်ပတ်မှုတစ်လျှောက်တွင် ကြုံတွေ့နေရသည့် စိန်ခေါ်မှုများနှင့် PCR အလုပ်အသွားအလာများကို စံသတ်မှတ်ခြင်းအတွက် အသုံးပြုသည့် တူရိယာများနှင့် စားသုံးနိုင်သောပစ္စည်းများနှင့်စပ်လျဉ်း၍ တည်ရှိနေသည့် ဖြေရှင်းနည်းများအတွက် ချဉ်းကပ်မှုများကို သရုပ်ပြပါမည်။
တုံ့ပြန်မှုပြင်ဆင်ခြင်း။
တုံ့ပြန်မှုအစိတ်အပိုင်းများကို PCR-ရေယာဉ်များ သို့မဟုတ် ပန်းကန်ပြားများအတွင်းသို့ ဖြန့်ဝေရာတွင် ကျော်လွှားရမည့် စိန်ခေါ်မှုများစွာ ပါဝင်သည်-
တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများ
တူညီသော တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများကို ရည်မှန်းသည့်အခါ တစ်ဦးချင်းစီ၏ အတိအကျနှင့် တိကျသောဆေးပမာဏသည် မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါသည်။ ကောင်းမွန်သော pipetting နည်းပညာအပြင်၊ မှန်ကန်သော tool ကိုရွေးချယ်ခြင်းသည် အရေးကြီးပါသည်။ PCR master-mix များတွင် viscosity တိုးစေသော သို့မဟုတ် အမြှုပ်များကို ထုတ်ပေးသည့် အရာများ မကြာခဏ ပါဝင်ပါသည်။ ပိုက်သွယ်တန်းခြင်း လုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း၊ ၎င်းတို့သည် သိသိသာသာ စိုစွတ်လာစေသည်။pipette အကြံပြုချက်များထို့ကြောင့် pipetting တိကျမှုကိုလျှော့ချသည်။ စိုစွတ်မှုနည်းသော တိုက်ရိုက်ဖြန့်ဝေမှုစနစ်များ သို့မဟုတ် ပိုက်ဆက်ခြင်းဆိုင်ရာ အကြံပြုချက်များကို အသုံးပြုခြင်းသည် pipetting လုပ်ငန်းစဉ်၏ တိကျမှုနှင့် တိကျမှုကို တိုးတက်စေနိုင်သည်။
ညစ်ညမ်းမှု
ဖြန့်ဝေသည့်လုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း၊ ပိုက်ပိုက်အတွင်းပိုင်းသို့ရောက်ရှိရန်ခွင့်ပြုပါက နောက်တစ်ဆင့်တွင် နောက်ထပ်နမူနာကို ညစ်ညမ်းစေနိုင်သည့် aerosols များကို ထုတ်ပေးပါသည်။ စစ်ထုတ်အကြံပြုချက်များ သို့မဟုတ် တိုက်ရိုက်နေရာချထားမှုစနစ်များကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် ၎င်းကို တားဆီးနိုင်သည်။
အစရှိတဲ့ အသုံးအဆောင်ပစ္စည်းများအကြံပေးချက်များPCR လုပ်ငန်းအသွားအလာတွင် အသုံးပြုသည့် သင်္ဘောများနှင့် ပန်းကန်ပြားများသည် နမူနာကို ထိခိုက်စေသော သို့မဟုတ် ရလဒ်ကို အတုအယောင်ဖြစ်စေသော အရာများ မပါဝင်ရပါ။ ၎င်းတို့တွင် DNA၊ DNases၊ RNases နှင့် PCR inhibitors များအပြင် တုံ့ပြန်မှုအတွင်း ပစ္စည်းမှ စွန့်ထုတ်နိုင်ချေရှိသော အစိတ်အပိုင်းများ - လျှော်ဖွပ်နိုင်သော အရာများဟု သိကြသည့် အရာများ ပါဝင်သည်။
အသုံးပြုသူ အမှား
နမူနာများကို များများလုပ်ဆောင်လေ၊ အမှားအယွင်းဖြစ်နိုင်ချေ ပိုများလေဖြစ်သည်။ နမူနာတစ်ခုသည် မှားယွင်းသော အိုးထဲသို့ ပိုက်ထည့်ခြင်း သို့မဟုတ် မှားယွင်းသောရေတွင်းထဲသို့ အလွယ်တကူ ရောက်သွားနိုင်သည်။ ရေတွင်းများကို အလွယ်တကူ ခွဲခြားသိမြင်နိုင်စေခြင်းဖြင့် ဤအန္တရာယ်ကို သိသိသာသာ လျှော့ချနိုင်သည်။ ဖြန့်ဝေခြင်းအဆင့်များ၏ အလိုအလျောက်စနစ်ဖြင့်၊ ဆိုလိုသည်မှာ အမှားအယွင်းများနှင့် အသုံးပြုသူနှင့်သက်ဆိုင်သော ကွဲပြားမှုများ၊ "လူ့အချက်" ကို လျှော့ချခြင်းဖြင့် အထူးသဖြင့် သေးငယ်သောတုံ့ပြန်မှုပမာဏများတွင် မျိုးပွားနိုင်စွမ်းကို တိုးမြင့်စေသည်။ ၎င်းသည် အလုပ်ရုံတစ်ခုတွင် အသုံးပြုရန် လုံလောက်သော အတိုင်းအတာတည်ငြိမ်မှုရှိသောပြားများ လိုအပ်သည်။ ပူးတွဲပါဘားကုဒ်များသည် လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုလုံးတွင် နမူနာခြေရာခံခြင်းကို ရိုးရှင်းလွယ်ကူစေသည့် အပိုစက်-ဖတ်ရှုနိုင်မှုကို ပေးစွမ်းသည်။
Thermocycler ပရိုဂရမ်ရေးဆွဲခြင်း။
တူရိယာတစ်ခုကို ပရိုဂရမ်ရေးဆွဲခြင်းသည် အချိန်ကုန်စေသည့်အပြင် အမှားအယွင်းများတတ်ပါသည်။ မတူညီသော PCR အပူစက်ဘီးစီးခြင်းအင်္ဂါရပ်များသည် ဤလုပ်ငန်းစဉ်အဆင့်ကို ရိုးရှင်းစေရန် အတူတကွလုပ်ဆောင်ကြပြီး အရေးကြီးဆုံးမှာ ဘေးကင်းစေရန်အတွက်ဖြစ်သည်-
လွယ်ကူသောလုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ကောင်းမွန်သောအသုံးပြုသူလမ်းညွှန်မှုတို့သည် ထိရောက်သောပရိုဂရမ်ရေးဆွဲခြင်း၏အခြေခံဖြစ်သည်။ ဤအခြေခံအုတ်မြစ်ကို တည်ဆောက်ခြင်းဖြင့် စကားဝှက်ဖြင့် ကာကွယ်ထားသော အသုံးပြုသူ စီမံအုပ်ချုပ်မှုသည် အခြားအသုံးပြုသူများ၏ ကိုယ်ပိုင်ပရိုဂရမ်များကို ပြောင်းလဲခြင်းမှ တားဆီးနိုင်မည်ဖြစ်သည်။ အကယ်၍ စက်ဘီးစီးသူအများအပြား (အမျိုးအစားတူ) ကို အသုံးပြုနေပါက ပရိုဂရမ်တစ်ခုကို တူရိယာတစ်ခုမှ အခြားတစ်ခုကို USB သို့မဟုတ် ချိတ်ဆက်မှုမှတစ်ဆင့် တိုက်ရိုက်လွှဲပြောင်းနိုင်လျှင် အကျိုးရှိသည်။ ကွန်ပျူတာဆော့ဖ်ဝဲသည် ကွန်ပျူတာရှိ ပရိုဂရမ်များ၊ အသုံးပြုသူအခွင့်အရေးနှင့် စာရွက်စာတမ်းများကို ဗဟိုနှင့် လုံခြုံစွာ စီမံခန့်ခွဲနိုင်စေပါသည်။
PCR ပြေး
ပြေးနေစဉ်အတွင်း၊ နမူနာတစ်ခုစီသည် တူညီသော၊ တသမတ်တည်းရှိသော တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများကို ထားရှိသင့်သည့် တုံ့ပြန်မှုအိုးထဲတွင် DNA ကို ချဲ့ထွင်ထားသည်။ လုပ်ငန်းစဉ်အတွက် အောက်ပါအချက်များသည် သက်ဆိုင်ပါသည်။
အပူချိန်ထိန်း
အပူချိန်ထိန်းချုပ်မှုနှင့် စက်ဘီးစီးဘလောက်၏ တစ်သားတည်းဖြစ်တည်မှုတွင် အထူးကောင်းမွန်သောတိကျမှုသည် နမူနာအားလုံး၏အပူချိန်အေးစက်မှုအတွက် အခြေခံဖြစ်သည်။ အပူနှင့် အအေးခံဒြပ်စင်များ (peltier ဒြပ်စင်များ) ၏ အရည်အသွေးမြင့်မားမှုနှင့် ၎င်းတို့ကို ဘလောက်နှင့် ချိတ်ဆက်သည့်နည်းလမ်းသည် "အစွန်းအကျိုးသက်ရောက်မှု" ဟုခေါ်သော အပူချိန်ကွာဟမှုအန္တရာယ်ကို ဆုံးဖြတ်ပေးမည့် အဆုံးအဖြတ်အချက်များဖြစ်သည်။
အငွေ့ပျံခြင်း။
ရေငွေ့ပျံခြင်းကြောင့် တုံ့ပြန်မှုတစ်ခုချင်းစီ၏ ပြင်းအားသည် တုံ့ပြန်မှုဖြစ်စဉ်တစ်လျှောက် မပြောင်းလဲသင့်ပါ။ ဒီလိုမှမဟုတ်ရင် အလွန်နည်းပါတယ်။PCR ထုတ်ကုန်ထုတ်လုပ်နိုင်သည်၊ သို့မဟုတ် လုံးဝမရှိပါ။ ထို့ကြောင့် လုံခြုံသောတံဆိပ်ကို သေချာစေခြင်းဖြင့် အငွေ့ပျံခြင်းကို လျှော့ချရန် အရေးကြီးပါသည်။ ဤကိစ္စတွင်၊ သာမိုစက်ဘီးသမား၏အပူအဖုံးနှင့် သင်္ဘောတံဆိပ်သည် တွဲလျက်အလုပ်လုပ်သည်။ တံဆိပ်ခတ်ခြင်းအတွက် အမျိုးမျိုးသော ရွေးချယ်စရာများကို ရရှိနိုင်ပါသည်။PCR ပြားများ (လင့်ခ်- တံဆိပ်ခတ်ခြင်း ဆောင်းပါး)ယင်းမှာ အကောင်းဆုံး တံဆိပ်ကို အပူဖြင့် တံဆိပ်ခတ်ခြင်း ဖြစ်သည်။ စက်ဘီးစီးသူအဖုံး၏ ထိတွေ့မှုဖိအားကို ရွေးချယ်ထားသော တံဆိပ်သို့ ချိန်ညှိနိုင်သရွေ့ အခြားပိတ်ပိတ်များသည်လည်း သင့်လျော်နိုင်ပါသည်။
ရေရှည်တွင် တိကျပြီး မျိုးပွားနိုင်သော ရလဒ်များကို အကာအကွယ်ပေးရန်အတွက် လုပ်ငန်းစဉ် စံချိန်စံညွှန်းသတ်မှတ်ခြင်းကို ချမှတ်ထားသည်။ ၎င်းတွင် အမြဲကောင်းမွန်သော လုပ်ငန်းခွင်အခြေအနေရှိစေရန်အတွက် စက်ကိရိယာများကို ပုံမှန်ထိန်းသိမ်းခြင်း ပါဝင်သည်။ ကုန်ပစ္စည်းအားလုံးသည် ထုတ်လုပ်သည့် အမျိုးအစားအားလုံးတွင် တသမတ်တည်း အရည်အသွေးမြင့်မားသင့်ပြီး ၎င်းတို့၏ ယုံကြည်စိတ်ချရသော ရရှိနိုင်မှုကို အာမခံရပါမည်။
စာတိုက်အချိန်- နိုဝင်ဘာ-၂၉-၂၀၂၂