Kif Pipetta Volumi Żgħar B'Pipetti Manwali li jinżammu fl-idejn

Hekk kif qed titpoġġa aktar enfasi fuq it-tnaqqis tar-reaġenti u l-ispejjeż, volumi iżgħar huma ta 'domanda għolja, eż. Għall-preparazzjoni ta' reazzjonijiet ta 'mastermix PCR jew enzimi. Iżda l-pipetting volumi żgħar minn 0.2 - 5 µL jistabbilixxi sfidi ġodda għall-eżattezza tal-pipetting u l-preċiżjoni. Il-punti li ġejjin huma essenzjali:

1. Pipetta u daqs tal-ponta: Dejjem agħżel il-pipetta bl-inqas volum nominali possibbli u l-iżgħar ponta biex iżżomm il-kuxxin tal-arja kemm jista 'jkun. Meta tpoġġi 1 µl eż., Agħżel pipetta ta '0.25 - 2.5 µL u ponta ta' tqabbil aktar milli pipetta ta '1 - 10 µL.
2. Kalibrazzjoni u Manutenzjoni: Huwa essenzjali li l-pipetti tiegħek jiġu kkalibrati u miżmuma sewwa. Aġġustamenti żgħar u partijiet miksura fuq pipetta jwasslu għal żieda massiva fil-valuri ta 'żball sistematiċi u każwali. Kalibrazzjoni skond l-ISO 8655 għandha titwettaq darba fis-sena.
3. Pipetti ta 'spostament pożittiv: Iċċekkja jekk għandekx pipetta ta' spostament pożittiv b'firxa ta 'volum baxx fil-laboratorju tiegħek. B'mod ġenerali, l-użu ta 'dan it-tip ta' pipetta jwassal għal riżultat ta 'pipetting aħjar f'termini ta' eżattezza u preċiżjoni milli ma 'pipetti klassiċi ta' l-arja.
4. Ipprova tuża volumi ikbar: Tista 'tikkunsidra li tħallat il-kampjun tiegħek biex tpoġġi volumi akbar bl-istess kwantità fir-reazzjoni finali. Dan jista 'jnaqqas l-iżbalji tal-pipetting b'volumi żgħar ħafna ta' kampjuni.

Minbarra għodda tajba, ir-riċerkatur għandu jkollu teknika ta 'pipetting tajba ħafna. Oqgħod attent speċjali għall-passi li ġejjin:

1. Twaħħil tat-Tip: Timġax il-pipetta fuq il-ponta għax dan jista 'jagħmel ħsara lit-tarf tal-ponta fina jikkawża li r-raġġ likwidu jiġi dirett jew jagħmel ħsara lill-orifiċju. Applika biss pressjoni ħafifa meta twaħħal ponta u uża pipetta ma 'kon tal-ponta mgħobbi bir-rebbiegħa.
2. Li żżomm il-pipetta: Żommx il-pipetta f'idejk waqt li tistenna ċ-ċentrifuga, iċ-ċikler, eċċ. In-naħa ta 'ġewwa tal-pipetta se tisħon u twassal il-kuxxin tal-arja biex tespandi li tirriżulta f'devjazzjonijiet mill-volum stabbilit meta tkun pipetting.
3. Pre-WETTING: L-umidifikazzjoni ta 'l-arja ġewwa l-ponta u l-pipetta tħejji l-ponta għall-kampjun u tevita l-evaporazzjoni meta taspira l-volum ta' trasferiment.
4. Aspirazzjoni vertikali: Dan huwa importanti ħafna meta timmaniġġa volumi żgħar biex tevita l-effett kapillari li jseħħ meta l-pipetta tinżamm f'angolu.
5. Fond ta 'Immersjoni: Għadds il-ponta mill-inqas possibbli biex tevita li l-likwidu jidħol fil-ponta minħabba l-effett kapillari. Regola ġenerali: Iktar ma jkun iżgħar il-ponta u l-volum, inqas ikun il-fond tal-immersjoni. Nirrakkomandaw massimu ta '2 mm meta tpoġġi volumi żgħar.
6. Tqassim f'angolu ta '45 °: Fluss ottimali tal-likwidu huwa garantit meta l-pipetta tinżamm f'angolu ta '45 °.
7. Kuntatt mal-ħajt tal-bastiment jew il-wiċċ tal-likwidu: volumi żgħar jistgħu jiġu mqassma biss meta l-ponta tinżamm kontra l-ħajt tal-bastiment, jew mgħaddsa fil-likwidu. Anki l-aħħar qatra mill-ponta tista 'titqassam b'mod preċiż.
8. Blow-out: Blow-out huwa obbligatorju wara li jqassam volumi baxxi biex iwarrab anke l-aħħar qatra ta 'likwidu preżenti fil-ponta. Il-blow-out għandu jitwettaq ukoll kontra l-ħajt tal-bastiment. Oqgħod attent li ma ġġibx bżieżaq tal-arja fil-kampjun meta twettaq blow-out fil-wiċċ tal-likwidu.