Ir-reazzjonijiet fil-katina tal-polimerażi (PCR) huma wieħed mill-metodi magħrufa ħafna fil-Laboratorji tax-Xjenza tal-Ħajja.
Il-pjanċi PCR huma prodotti minn plastik tal-ewwel klassi għal proċessar eċċellenti u analiżi ta 'kampjuni jew riżultati miġbura.
Huma għandhom ħitan irqaq u omoġenji biex jipprovdu trasferiment termali preċiż.
Bi tħejjija għal applikazzjonijiet f'ħin reali, is-sezzjoni minuta tad-DNA jew l-RNA huma maqtugħin u maħżuna fil-pjanċi tal-PCR.
Il-pjanċi tal-PCR huma effiċjenti ħafna fis-siġillar tas-sħana u jirrestrinġu wkoll il-fluss tas-sħana.
Madankollu, bħala effettivi u affidabbli l-pjanċi tal-PCR huma, l-iżball u l-ineżattezzi jinżlu faċilment waqt li jkunu qed jipproċessaw kampjuni.
Għalhekk, jekk inti interessat li jkollok kwalità tajba u għoljaPjanċi tal-PCR.Huwa ideali li tikkuntattja manifattur affidabbli tal-pjanċa tal-PCR. B'dan int tassigura li jkollok l-aħjar offerta.
Hawn huma xi prekawzjonijiet li jsegwu biex jiġu evitati kontaminazzjonijiet ta 'reaġenti jew kampjuni u jipprevjenu ineżattezzi milli jidħlu fir-riżultati.
Sterilizzazzjoni tal-inħawi
Posittivi jew negattivi mhux korretti jseħħu minħabba l-preżenza ta 'impuritajiet, u dan jagħmlek dubju dwar ir-riżultati.
L-impuritajiet u l-kontaminanti jseħħu f'diversi forom bħal DNA mhux relatati jew addittivi kimiċi li eventwalment inaqqsu l-effiċjenza u l-effettività tar-reazzjoni.
Hemm bosta modi kif tnaqqas ħafna r-rata ta 'kontaminazzjoni tal-pjanċa tal-PCR.
L-użu ta 'ponot tal-filtru sterilizzat huwa mod ieħor utli biex tevita li l-impuritajiet jitkaxkru fil-kampjuni tiegħek permezz tal-pipetti.
Iddedika sett ta 'tagħmir kompletament nadif, li jinkludi pipetti u xtillieri, esklussivament għall-użu ta' PCR. Dan jiggarantixxi trasferiment negliġibbli ta 'impuritajiet jew kontaminanti madwar il-laboratorju.
Uża bliċ, etanol fuq il-pipetti, xtillieri u bankijiet biex tħassar il-kontaminanti.
Alloka spazju riservat għar-reazzjonijiet kollha tal-PCR tiegħek biex tkompli timminimizza l-kontaminazzjoni tal-partikuli.
Uża ingwanti nodfa f'kull pass u ibdilhom ta 'spiss.
Pjanċi tal-PCR
Spezzjona l-konċentrazzjoni u l-purità tal-mudell.
Għandha tinżamm l-indafa tal-bank u t-tagħmir użat meta jiġu analizzati kampjuni mal-PCR. Huwa essenzjali li tivvalida l-grad ta 'purità tal-kampjuni qabel l-analiżi u l-ipproċessar.
Ġeneralment, l-analizzaturi jqisu l-konċentrazzjoni u l-livell ta 'purità tal-kampjuni tad-DNA.
Tħalli l-proporzjon ta 'assorbenza għal 260nm / 280nm m'għandux ikun inqas minn1.8. Filwaqt li t-tul ta 'mewġa sussegwenti bejn 230nm u 320nm jintużaw biex jidentifikaw impuritajiet.
F'każ, melħ kaotropiku u komposti organiċi oħra huma skoperti b'rata ta 'assorbenza ta' 230nm. Filwaqt li t-turbidità fil-kampjuni tad-DNA hija wkoll skoperta u vverifikata b'rata ta 'assorbenza ta' 320nm.
Evita li tagħbija żejda pjanċi tal-PCR bil-prodott
Kemm hu mixtieq li tmexxi prodotti multipli fl-istess ħin, tirriżulta f'kontaminazzjoni inkroċjata tal-pjanċi tal-PCR.
It-tagħbija żejda tal-pjanċi tal-PCR bi prodotti ta 'prodotti differenti u tagħmilha diffiċli ħafna biex jiġi aċċertat il-kampjuni.
Żomm rekords ta 'reaġenti tal-PCR alikwota
Iċ-ċikli kontinwi tal-iffriżar / jinħall u l-użu frekwenti ta 'alikwott jistgħu jagħmlu ħsara lir-reaġenti tal-PCR, enzimi u DNTP's permezz ta' rikristallizzazzjoni.
Dejjem tagħmel ħilitha biex tissorvelja r-rata ta 'alikwot użata waqt il-preparazzjoni ta' kampjuni li għandhom jiġu analizzati.
Lims preferibbli huwa aktar adattat biex jikkontrolla l-inventarju u l-ammont ta 'reaġenti u kampjuni ffriżati jew imdewwba.
Agħżel l-aħjar temperatura ta 'ttremprar.
Il-ġbir u l-użu tat-temperatura ħażina tal-ittemprar huwa metodu ieħor li r-riżultati tal-PCR fihom żball.
Kultant, ir-reazzjoni ma tmurx kif ippjanat. Huwa mixtieq li titnaqqas it-temperatura ta 'l-ittemprar sabiex tiffaċilita reazzjoni ta' suċċess.
Madankollu, it-tnaqqis tat-temperatura jżid iċ-ċansijiet ta 'pożittivi foloz u dehra ta' dimers tal-primer.
Huwa sinifikanti li tiġi kkonfermata l-analiżi tal-kurva tat-tidwib meta tuża l-pjanċi PCR peress li huwa indikatur tajjeb tal-għażla tat-temperatura korretta tal-ittemprar.
Is-softwer tad-disinn tal-primer jgħin bit-tfassil, il-provvista ta 'temperatura tal-ittemprar tal-lemin tnaqqas direttament l-iżball fil-pjanċi tal-PCR.
Fil-bżonn ta 'pjanċa PCR ta' kwalità għolja?
Fil-każ li kont qed tikkunsidra fejn issib manifattur affidabbli ta 'Pjanċi tal-PCR- Fittex aktar għax int qiegħed fil-post it-tajjeb.
ĠentilmentIkklikkja hawn biex tikkuntattjanaGħal prodotti u servizz ta 'kwalità għolja bi prezz li ma jkissirx il-bank.
Ħin ta 'wara: Ottubru-30-2021