5 Suġġerimenti Sempliċi Biex Tipprevjeni Żbalji Meta Taħdem Bi Pjanċi PCR

Reazzjonijiet tal-katina tal-polimerażi (PCR) huma wieħed mill-metodi magħrufa ħafna li jintużaw fil-laboratorji tax-xjenza tal-ħajja.

Il-pjanċi PCR huma prodotti minn plastiks tal-ewwel klassi għall-ipproċessar u l-analiżi eċċellenti ta 'kampjuni jew riżultati miġbura.

Għandhom ħitan irqaq u omoġenji biex jipprovdu trasferiment termali preċiż.

Bi tħejjija għal applikazzjonijiet f'ħin reali, sezzjoni minuta ta 'DNA jew RNA huma magħluqa u maħżuna fi pjanċi PCR.

Il-pjanċi PCR huma effiċjenti ħafna fis-siġillar bis-sħana u jirrestrinġu l-fluss tas-sħana wkoll.

Madankollu, bħala effettivi u affidabbli l-pjanċi PCR huma, żball u ineżattezzi sidle faċilment waqt l-ipproċessar tal-kampjuni.

Għalhekk, jekk inti interessat li tikseb kwalità tajba u għoljaPjanċi PCR.Huwa ideali li tikkuntattja manifattur affidabbli tal-pjanċa PCR. Ma 'dan inti żgur li tikseb l-aħjar.

Hawn huma xi prekawzjonijiet li għandek issegwi biex tevita kontaminazzjonijiet ta 'reaġenti jew kampjuni u tevita li l-ineżattezzi jidħlu fir-riżultati.

L-isterilizzazzjoni tal-inħawi
Pożittivi jew negattivi żbaljati jseħħu minħabba l-preżenza ta 'impuritajiet, li jġiegħlek tiddubita mir-riżultati.

L-impuritajiet u l-kontaminanti jseħħu f'diversi forom bħal DNA mhux relatati jew addittivi kimiċi li eventwalment inaqqsu l-effiċjenza u l-effettività tar-reazzjoni.

Hemm bosta modi biex titnaqqas ħafna r-rata ta 'kontaminazzjoni tal-pjanċa tal-PCR.

L-użu ta 'ponot tal-filtri sterilizzati huwa mod ieħor utli biex tevita li l-impuritajiet jidħlu fil-kampjuni tiegħek permezz tal-pipetti.

Iddedika sett ta 'tagħmir kompletament nadif, magħmul minn pipetti u xtillieri, esklussivament għall-użu tal-PCR. Dan jiggarantixxi trasferiment negliġibbli ta 'impuritajiet jew kontaminanti madwar il-laboratorju.

Uża bliċ, etanol fuq il-pipetti, xtillieri u bankijiet biex timsaħ il-kontaminanti.

Alloka spazju riżervat għar-reazzjonijiet PCR kollha tiegħek biex timminimizza aktar il-kontaminazzjoni tal-partikuli.

Uża ingwanti nodfa f'kull pass u ibdelhom spiss.

Pjanċi PCR
Spezzjona l-Konċentrazzjoni u l-Purità tal-Mudell.
L-indafa tal-bank u t-tagħmir użat meta jiġu analizzati l-kampjuni bil-PCR għandha tinżamm. Huwa essenzjali li jiġi vvalidat il-grad ta 'purità tal-kampjuni qabel l-analiżi u l-ipproċessar.

Ġeneralment, l-analizzaturi jqisu l-konċentrazzjoni u l-livell ta’ purità tal-kampjuni tad-DNA.

Ipprova l-proporzjon ta 'assorbiment għal 260nm/280nm m'għandux ikun inqas minn 1.8. Filwaqt li tul ta 'mewġ sussegwenti bejn 230nm u 320nm jintużaw biex jidentifikaw l-impuritajiet.

F'każ, melħ kaotropiku u komposti organiċi oħra huma skoperti b'rata ta 'assorbiment ta' 230nm. Filwaqt li t-turbidità fil-kampjuni tad-DNA huma wkoll skoperti u vverifikati b'rata ta 'assorbiment ta' 320nm.

Evita li tgħabbi żżejjed il-Pjanċi PCR bil-prodott
Kemm huwa mixtieq li jitħaddmu prodotti multipli simultanjament, jirriżulta f'kontaminazzjoni inkroċjata tal-pjanċi PCR.

It-tagħbija żejda tal-pjanċi PCR bi skart ta 'prodotti differenti u tagħmilha estremament diffiċli biex jiġu aċċertati l-kampjuni.

Żomm Reġistri tar-Reaġenti Aliquot PCR
Ċikli kontinwi ta' ffriżar/tidwib u użu frekwenti tal-alikwot jistgħu jagħmlu ħsara lir-reaġenti tal-PCR, l-enżimi u d-DNTP permezz tar-rikristallizzazzjoni.

Dejjem tipprova tissorvelja r-rata ta' alikwott użata waqt li tipprepara l-kampjuni biex jiġu analizzati.

LIMS preferibbli huwa aktar adattat biex jikkontrolla l-inventarju u l-ammont ta 'reaġenti u kampjuni ffriżati jew imdewweb.

Agħżel L-Aqwa Temperatura tat-Ttemprar.
Il-ġbir u l-użu tat-temperatura tal-ittemprar ħażina huwa metodu ieħor li r-riżultati tal-PCR fihom żball.

Xi drabi, ir-reazzjoni ma tmurx kif ippjanat. Huwa mixtieq li titnaqqas it-temperatura ta 'l-ittemprar sabiex tiġi ffaċilitata reazzjoni ta' suċċess.

Madankollu, it-tnaqqis tat-temperatura jżid iċ-ċansijiet ta 'pożittivi foloz u dehra ta' primer dimers.

Huwa sinifikanti li tikkonferma l-analiżi tal-kurva tat-tidwib meta tuża l-pjanċi tal-PCR peress li huwa indikatur tajjeb tal-għażla tat-temperatura tal-ittemprar korretta.

Softwer tad-disinn tal-Primer jgħin fit-tfassil, il-provvista ta 'temperatura ta' ttemprar dritt b'mod dirett inaqqas l-iżball fil-pjanċi PCR.

Fil-bżonn ta 'pjanċa PCR ta' kwalità għolja?
Fil-każ li kont qed tikkunsidra fejn issib manifattur affidabbli taPjanċi PCR. Fittexx aktar għax inti fil-post it-tajjeb.

Ġentilmentikklikkja hawn biex tikkuntattjanagħal prodotti u servizz ta’ kwalità għolja bi prezz li ma jkisserx il-bank.


Ħin tal-post: Ottubru-30-2021