0.2 ते 5 μL पर्यंत पाइपिंग व्हॉल्यूम असताना, पाइपिंगची अचूकता आणि अचूकता अत्यंत महत्त्वाची आहे एक चांगले पाइपिंग तंत्र आवश्यक आहे कारण लहान व्हॉल्यूमसह हाताळणीच्या चुका अधिक स्पष्ट असतात.
अभिकर्मक आणि खर्च कमी करण्यावर अधिक लक्ष केंद्रित केले जात असल्याने, लहान खंडांना जास्त मागणी आहे, उदा., पीसीआर मास्टरमिक्स किंवा एन्झाइम प्रतिक्रिया तयार करण्यासाठी. परंतु 0.2 - 5 μL पासून लहान व्हॉल्यूम पाइपिंग केल्याने अचूकता आणि अचूकतेसाठी नवीन आव्हाने निर्माण होतात. खालील मुद्दे आवश्यक आहेत:
- पिपेट आणि टीपचा आकार: नेहमी शक्य तितक्या कमी नाममात्र व्हॉल्यूमसह पिपेट निवडा आणि एअर कुशन शक्य तितक्या लहान ठेवण्यासाठी सर्वात लहान टीप निवडा. उदा. 1 µL पाइपेट करताना, 1 - 10 µL पिपेट ऐवजी 0.25 – 2.5 µL विंदुक आणि जुळणारी टीप निवडा.
- कॅलिब्रेशन आणि देखभाल: हे आवश्यक आहे की तुमची पिपेट्स योग्यरित्या कॅलिब्रेट केली गेली आहेत आणि त्यांची देखभाल केली गेली आहे. पिपेटवरील लहान समायोजन आणि तुटलेल्या भागांमुळे पद्धतशीर आणि यादृच्छिक त्रुटी मूल्यांमध्ये मोठ्या प्रमाणात वाढ होते. ISO 8655 नुसार कॅलिब्रेशन वर्षातून एकदा करणे आवश्यक आहे.
- पॉझिटिव्ह डिस्प्लेसमेंट पिपेट्स: तुमच्या लॅबमध्ये कमी व्हॉल्यूम रेंजसह पॉझिटिव्ह डिस्प्लेसमेंट पिपेट आहे का ते तपासा. सर्वसाधारणपणे, या प्रकारच्या पिपेटचा वापर केल्यास क्लासिक एअर-कुशन पिपेट्सच्या तुलनेत अचूकता आणि अचूकतेच्या दृष्टीने चांगले पिपेटिंग परिणाम मिळतात.
- मोठे व्हॉल्यूम वापरण्याचा प्रयत्न करा: अंतिम प्रतिक्रियेमध्ये समान प्रमाणात मोठ्या प्रमाणात पिपेट करण्यासाठी तुमचा नमुना पातळ करण्याचा विचार करा. हे अगदी लहान नमुना खंडांसह पाइपिंग त्रुटी कमी करू शकते.
चांगल्या साधनाव्यतिरिक्त, संशोधकाकडे खूप चांगले पाइपिंग तंत्र असणे आवश्यक आहे. खालील चरणांवर विशेष लक्ष द्या:
- टीप संलग्नक: विंदुक टोकावर जाम करू नका कारण यामुळे लिक्विड बीम पुनर्निर्देशित होऊ शकतो किंवा छिद्र खराब होऊ शकतो. टिप जोडताना फक्त हलका दाब लागू करा आणि स्प्रिंग-लोड केलेल्या टिप शंकूसह विंदुक वापरा.
- विंदुक धरून ठेवणे: सेंट्रीफ्यूज, सायकलर इ.ची वाट पाहत असताना विंदुक हातात धरू नका. विंदुकाचा आतील भाग गरम होईल आणि हवा उशीचा विस्तार होईल ज्यामुळे पाईपिंग करताना सेट व्हॉल्यूममधून विचलन होईल.
- प्री-ओलेटिंग: टीप आणि विंदुकाच्या आतील हवेचे आर्द्रीकरण नमुन्यासाठी टीप तयार करते आणि हस्तांतरण व्हॉल्यूमची आकांक्षा घेत असताना बाष्पीभवन टाळते.
- अनुलंब आकांक्षा: विंदुक कोनात धरल्यावर होणारा केशिका प्रभाव टाळण्यासाठी लहान आकारमान हाताळताना हे खूप महत्वाचे आहे.
- विसर्जनाची खोली: केशिका प्रभावामुळे टिपमध्ये द्रव प्रवेश करू नये म्हणून टीप शक्य तितक्या कमी बुडवा. अंगठ्याचा नियम: टीप आणि आवाज जितका लहान असेल तितकी विसर्जन खोली कमी होईल. लहान व्हॉल्यूम पाइपिंग करताना आम्ही जास्तीत जास्त 2 मिमीची शिफारस करतो.
- 45° कोनात वितरीत करणे: जेव्हा विंदुक 45° कोनात धरले जाते तेव्हा द्रव बाहेर जाण्यासाठी इष्टतम प्रवाहाची हमी दिली जाते.
- जहाजाच्या भिंतीशी किंवा द्रव पृष्ठभागाशी संपर्क: जेव्हा टीप जहाजाच्या भिंतीवर धरली जाते किंवा द्रव मध्ये बुडविली जाते तेव्हाच लहान आकारमान योग्यरित्या वितरीत केले जाऊ शकतात. अगदी टोकाचा शेवटचा थेंब देखील अचूकपणे वितरीत केला जाऊ शकतो.
- ब्लो-आउट: टीपमध्ये असलेल्या द्रवाचा शेवटचा थेंब देखील वितरीत करण्यासाठी कमी प्रमाणात वितरीत केल्यानंतर ब्लो-आउट अनिवार्य आहे. जहाजाच्या भिंतीच्या विरूद्ध देखील ब्लो-आउट केले पाहिजे. द्रव पृष्ठभागावर ब्लो-आउट करताना नमुन्यात हवेचे फुगे न आणण्याची काळजी घ्या.
पोस्ट वेळ: फेब्रुवारी-18-2021