CryovialsШингэн азотоор дүүргэсэн деварт эсийн шугам болон бусад чухал биологийн материалыг криоген хадгалахад ихэвчлэн ашигладаг.

Шингэн азот дахь эсийг амжилттай хадгалахад хэд хэдэн үе шат байдаг. Үндсэн зарчим нь удаан хөлдөөх боловч яг хэрэглэх арга нь эсийн төрөл, ашигласан криопротектороос хамаарна. Ийм бага температурт эсийг хадгалахдаа хэд хэдэн аюулгүй байдлын асуудал, шилдэг туршлагуудыг анхаарч үзэх хэрэгтэй.

Энэхүү нийтлэл нь криовиалууд шингэн азотод хэрхэн хадгалагддаг талаар тоймлон харуулах зорилготой юм.

Cryovials гэж юу вэ

Криовиал нь шингэн дээжийг маш бага температурт хадгалах зориулалттай жижиг таглаатай шил юм. Эдгээр нь криопротекторт хадгалагдсан эсүүд нь шингэн азоттой шууд харьцдаггүй бөгөөд шингэн азотын хэт хөргөлтийн нөлөөгөөр эд эсийн хугарал үүсэх эрсдлийг бууруулдаг.

Лонхнууд нь ихэвчлэн янз бүрийн хэмжээ, загвартай байдаг - хавтгай эсвэл бөөрөнхий ёроолтой дотор болон гадна талын урсгалтай байж болно. Ариутгасан болон ариутгагдаагүй хэлбэрүүд бас байдаг.

Хэн ашигладагКировиалуудшингэн азот дахь эсийг хадгалах

Төрөл бүрийн NHS болон хувийн лабораториуд, түүнчлэн хүйн ​​цусны банк, эпител эсийн биологи, дархлаа судлал, үүдэл эсийн биологийн чиглэлээр мэргэшсэн судалгааны байгууллагууд эсийг крио хадгалах зорилгоор криовиалуудыг ашигладаг.

Ийм байдлаар хадгалагдсан эсүүд нь В ба Т эсүүд, CHO эсүүд, Цус үүсгэгч үүдэл ба удамшлын эсүүд, эрлийзүүд, гэдэсний эсүүд, макрофагууд, мезенхимийн үүдэл болон удам эсүүд, моноцитууд, миелома, NK эсүүд, плюрипотент үүдэл эсүүд юм.

Шингэн азот дахь криовиалуудыг хэрхэн хадгалах талаархи тойм

Крио хадгалах нь эс болон бусад биологийн бүтцийг маш бага температурт хөргөх замаар хадгалах процесс юм. Эсийг шингэн азотод олон жилийн турш хадгалж, эсийн амьдрах чадварыг алдагдуулдаг. Энэ бол ашигласан журмын тойм юм.

Эсийн бэлтгэл

Дээж бэлтгэх арга нь эсийн төрлөөс хамаарч өөр өөр байх боловч ерөнхийдөө эсийг цуглуулж, центрифуг хийж, эсээр баялаг үрэл үүсгэдэг. Дараа нь энэ үрэлийг криопротектор эсвэл крио хадгалах орчинтой хольсон супернатантад дахин түдгэлзүүлнэ.

Крио хадгалах орчин

Энэ орчин нь эсийн доторх болон гаднах талст үүсэх, улмаар эсийн үхэлд саад болох бага температурт эсийг хадгалахад ашиглагддаг. Тэдний үүрэг бол хөлдөөх, хадгалах, гэсгээх явцад эс, эд эсэд аюулгүй, хамгаалалтын орчинг бүрдүүлэх явдал юм.

Шинэ хөлдөөсөн сийвэн (FFP), гепаринжуулсан плазмолитын уусмал эсвэл ийлдэсгүй, амьтны бүрэлдэхүүн хэсэггүй уусмал зэрэг орчинг диметил сульфоксид (DMSO) эсвэл глицерин зэрэг криопротекторуудтай холино.

Дахин шингэрүүлсэн дээж үрэл зэрэг полипропилен криовиал болгон хуваасанSuzhou Ace Biomedical компани Cryogenic Storage Vials.

Криовиалуудыг хэт дүүргэхгүй байх нь чухал бөгөөд энэ нь хагарал үүсэх эрсдэлийг нэмэгдүүлж, агуулгыг гадагшлуулах магадлалтай (1).

Хяналттай хөлдөх хурд

Ерөнхийдөө эсийг амжилттай крио хадгалахын тулд удаан хянагддаг хөлдөх хурдыг ашигладаг.

Дээжийг криоген хуруу шилэнд хуваасны дараа тэдгээрийг нойтон мөсөн дээр эсвэл 4 хэмийн хөргөгчинд хийж, 5 минутын дотор хөлдөөх ажиллагааг эхлүүлнэ. Ерөнхий удирдамж болгон эсийг минутанд -1-ээс -3 хүртэл хөргөнө (2). Үүнийг програмчлах боломжтой хөргөгч эсвэл хуруу шилийг -70 ° C-аас -90 ° C хэмтэй хөлдөөгчид байрлуулсан тусгаарлагдсан хайрцагт хийх замаар хийдэг.

Шингэн азот руу шилжүүлнэ

Дараа нь хөлдөөсөн криоген хуруу шилийг шингэн азотын саванд -135 хэмээс бага температурт тодорхойгүй хугацаагаар шилжүүлнэ.

Эдгээр хэт бага температурыг шингэн эсвэл уурын фазын азот руу дүрэх замаар олж авч болно.

Шингэн эсвэл уурын үе шат уу?

Шингэн фазын азотыг хадгалах нь хүйтэн температурыг үнэмлэхүй тогтвортой байлгахад тусалдаг боловч дараахь шалтгааны улмаас ихэвчлэн хэрэглэхийг зөвлөдөггүй.

• Болзошгүй аюул болох шингэн азотын их хэмжээний (гүн) хэрэгцээ. Үүний улмаас түлэгдэх эсвэл амьсгал боогдох нь бодит эрсдэл юм.
• Шингэн азотын орчинд аспергиллус, геп В, вирусын тархалт зэрэг халдварт бодисоор дамжсан тохиолдлууд (2,3)
• Шингэн азотыг усанд дүрэх үед хуруу шилэнд нэвчих боломж. Хадгалалтаас гаргаж, тасалгааны температурт дулаацуулахад азот хурдан өргөжиж байна. Иймээс шингэн азотын агуулахаас салгахад хуруу шил нь хагарч, нисч буй хог хаягдал болон түүний доторх бодист өртөх аюулыг үүсгэдэг (1, 4).

Эдгээр шалтгааны улмаас хэт бага температурт хадгалалт нь ихэвчлэн уурын фазын азотт байдаг. Шингэн үе шатанд дээжийг хадгалах шаардлагатай бол тусгай криофлекс хоолойг ашиглах шаардлагатай.

Уурын фазын сул тал нь босоо температурын градиент үүсч, температурын хэлбэлзэл -135 ° C-аас -190 ° C хооронд хэлбэлздэг явдал юм. Энэ нь шингэн азотын түвшин, температурын өөрчлөлтийг анхааралтай, хичээнгүйлэн хянах шаардлагатай (5).

Олон үйлдвэрлэгчид криовиалыг -135 хэм хүртэл хадгалах эсвэл зөвхөн уурын үе шатанд ашиглахыг зөвлөж байна.

Крио хадгалсан эсээ гэсгээх

Гэсгээх процедур нь хөлдөөсөн өсгөвөрт стресстэй байдаг бөгөөд эсийн оновчтой амьдрах чадвар, нөхөн сэргэлт, үйл ажиллагааг хангахын тулд зохих эмчилгээ, техник шаардлагатай. Гэсгээх протокол нь тодорхой эсийн төрлөөс хамаарна. Гэсэн хэдий ч хурдан гэсгээх нь дараахь стандартад тооцогддог.

• Эсийг нөхөн сэргээхэд үзүүлэх нөлөөллийг бууруулна
• Хөлдөөх орчинд агуулагдах ууссан бодисуудад өртөх хугацааг багасгахад тусална уу
• Мөс дахин талсжих замаар аливаа эвдрэлийг багасгах

Дээжийг гэсгээхэд ихэвчлэн усан банн, ирмэгийн банн эсвэл тусгай автомат багажийг ашигладаг.

Ихэнхдээ 1 эсийн шугамыг нэг удаад 1-2 минутын турш гэсгээх ба 37 хэмийн усан ваннд зөөлөн эргэлдэж, шилэнд бага зэрэг мөс үлдэх хүртэл урьдчилан халаасан ургалтын орчинд угаана.

Хөхтөн амьтдын үр хөврөл зэрэг зарим эсийн хувьд удаан дулаарах нь тэдний оршин тогтноход зайлшгүй шаардлагатай.

Одоо эсүүд эсийн өсгөвөрлөх, эсийг тусгаарлах эсвэл гематопоэтик үүдэл эсийн хувьд - миелоаблатив эмчилгээний өмнө донорын үүдэл эсийн бүрэн бүтэн байдлыг баталгаажуулах амьдрах чадварыг судлахад бэлэн болсон.

Өсгөвөрт бүрэх эсийн концентрацийг тодорхойлохын тулд эсийн тоолоход ашигладаг урьдчилан угаасан дээжээс жижиг хэсгүүдийг авах нь ердийн практик юм. Дараа нь та эсийг тусгаарлах процедурын үр дүнг үнэлж, эсийн амьдрах чадварыг тодорхойлж болно.

Cryovials хадгалах шилдэг туршлага

Криовиалуудад хадгалсан дээжийг амжилттай крио хадгалах нь протоколын зөв хадгалалт, бүртгэл хөтлөлт зэрэг олон зүйлээс хамаарна.

• Хадгалах байршлуудын хооронд нүдийг хуваах– Тоног төхөөрөмжийн эвдрэлээс болж дээж алдагдах эрсдэлийг бууруулахын тулд хэмжээ зөвшөөрвөл эсийг хуруу шилэнд хувааж, тусад нь байрлуулна.
• Хөндлөн бохирдлоос урьдчилан сэргийлэх– Дараа нь хэрэглэхээсээ өмнө нэг удаагийн ариутгасан криоген шил эсвэл автоклавыг сонгоорой
• Өөрийн эсүүдэд тохирох хэмжээтэй шилийг хэрэглээрэй- хуруу шилэнд 1-ээс 5 мл-ийн хэмжээтэй байдаг. Хагарах эрсдэлийг бууруулахын тулд шилийг хэт дүүргэхээс зайлсхий.
• Дотор эсвэл гадна талын урсгалтай криоген шилийг сонгоно уу– Зарим их дээд сургуулиуд аюулгүй байдлын үүднээс дотоод урсгалтай хуруу шилэнд хэрэглэхийг зөвлөдөг – дүүргэх явцад эсвэл шингэн азотод хадгалах үед бохирдохоос сэргийлдэг.
• Нэвчилтээс урьдчилан сэргийлэх- Нэвчилт, бохирдлоос урьдчилан сэргийлэхийн тулд шураг таг эсвэл O-цагирагт цутгасан хоёр шахмал лацыг ашиглана.
• 2D зураасан код болон шошгоны шилийг ашигла– ул мөрийг баталгаажуулахын тулд том бичих талбай бүхий хуруу шилнүүд нь шил бүрийг зохих шошготой болгох боломжийг олгодог. 2D зураасан код нь хадгалалтын менежмент болон бүртгэл хөтлөлтөд тусалж чадна. Өнгөний кодтой таг нь танихад хялбар байдаг.
• Хангалттай хадгалах засвар үйлчилгээ- Эсийг алдагдуулахгүйн тулд хадгалах савнууд температур, шингэн азотын түвшинг байнга хянаж байх ёстой. Хэрэглэгчдэд алдааны талаар мэдэгдэхийн тулд дохиолол суурилуулсан байх ёстой.

Аюулгүй байдлын урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээ

Шингэн азот нь орчин үеийн судалгаанд түгээмэл болсон боловч буруу хэрэглэвэл ноцтой гэмтэл авах эрсдэлтэй.

Шингэн азоттой харьцахдаа хөлдөх, түлэгдэх болон бусад сөрөг үр дагаврыг багасгахын тулд зохих хувийн хамгаалалтын хэрэгсэл (ХХХ) өмсөх ёстой. Өмсөх

• Криоген бээлий
• Лабораторийн цув
• Хүзүүг хамарсан цохилтод тэсвэртэй бүтэн нүүр бамбай
• Хаалттай гутал
• Ус цацдаггүй хуванцар хормогч

Шингэн азотын хөргөгчийг агааржуулалт сайтай газар байрлуулах нь амьсгал боогдох эрсдэлийг багасгах хэрэгтэй - гадагш гарсан азот нь ууршиж, агаар мандлын хүчилтөрөгчийг зайлуулдаг. Их хэмжээний дэлгүүрүүд хүчилтөрөгч багатай дохиоллын системтэй байх ёстой.

Шингэн азоттой харьцахдаа хосоороо ажиллах нь хамгийн тохиромжтой бөгөөд ердийн ажлын цагаас гадуур ашиглахыг хориглоно.

Таны ажлын урсгалыг дэмжих Cryovials

Suzhou Ace Biomedical компани нь янз бүрийн төрлийн эсийг крио хадгалах хэрэгцээг хангах өргөн сонголттой бүтээгдэхүүнийг санал болгож байна. Энэхүү багцад олон төрлийн гуурсан хоолойноос гадна олон төрлийн ариутгасан криовиалууд багтсан болно.

Манай криовиалууд нь:

• Лабораторийн шураг таг 0.5 мл 1.5 мл 2.0 мл криовиал криоген хуруу шилэнд жийргэвчтэй конус ёроолтой крио хоолой

  ● 0.5мл,1.5мл,2.0мл тодорхойлолт, банзалтай эсвэл банзалгүй
  ● Конус хэлбэртэй эсвэл бие даасан загвар, ариутгасан эсвэл ариутгагдаагүй загвар хоёулаа байдаг
  ● Шураг таглаатай хоолой нь эмнэлгийн чанартай полипропиленээр хийгдсэн
  ● PP Cryotube шилийг дахин дахин хөлдөөж, гэсгээх боломжтой
  ●Гадны тагны загвар нь дээж боловсруулах явцад бохирдох магадлалыг бууруулж чадна.
  ● Шураг таг криоген хоолой Ашиглах бүх нийтийн шураг утас
  ● Хоолойнууд нь хамгийн түгээмэл роторуудад таардаг
  ● Криоген хоолойн o-цагираг хоолой нь стандарт 1 инч ба 2 инч, 48 худаг, 81 худаг, 96 худаг, 100 худагтай хөлдөөгчийн хайрцагт тохирно.
  ● 121°С хүртэл автоклавт, -86°С хүртэл хөлдөх боломжтой

  ХЭСЭГ ДУГААР	МАТЕРИАЛ	ЭЗЭМШИГ	CAPӨНГӨ	PCS/БАГ	Цүнх/КЕЙС
  ACT05-BL-N	PP	0.5 мл	Хар, Шар, Цэнхэр, Улаан, Нил ягаан, Цагаан	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 мл	Хар, Шар, Цэнхэр, Улаан, Нил ягаан, Цагаан	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5 мл	Хар, Шар, Цэнхэр, Улаан, Нил ягаан, Цагаан	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0 мл	Хар, Шар, Цэнхэр, Улаан, Нил ягаан, Цагаан	500	10