ഹാൻഡ്‌ഹെൽഡ് മാനുവൽ പൈപ്പറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചെറിയ വോള്യങ്ങൾ പൈപ്പ് ചെയ്യുന്നത് എങ്ങനെ

റിയാക്ടറുകളും ചെലവുകളും കുറയ്ക്കുന്നതിൽ കൂടുതൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നതിനാൽ, ചെറിയ വോള്യങ്ങൾക്ക് ഉയർന്ന ഡിമാൻഡുണ്ട്, ഉദാ, PCR മാസ്റ്റർമിക്സ് അല്ലെങ്കിൽ എൻസൈം പ്രതികരണങ്ങൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിന്. എന്നാൽ 0.2 - 5 µL മുതൽ ചെറിയ വോള്യങ്ങൾ പൈപ്പ് ചെയ്യുന്നത് പൈപ്പറ്റിംഗ് കൃത്യതയ്ക്കും കൃത്യതയ്ക്കും പുതിയ വെല്ലുവിളികൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. ഇനിപ്പറയുന്ന പോയിൻ്റുകൾ അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ്:

1. പൈപ്പറ്റും ടിപ്പ് വലുപ്പവും: എയർ കുഷ്യൻ കഴിയുന്നത്ര ചെറുതായി നിലനിർത്താൻ സാധ്യമായ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ നാമമാത്ര വോള്യവും ഏറ്റവും ചെറിയ ടിപ്പും ഉള്ള പൈപ്പറ്റ് എപ്പോഴും തിരഞ്ഞെടുക്കുക. 1 µL പൈപ്പ് ചെയ്യുമ്പോൾ, ഉദാഹരണത്തിന്, 1 - 10 µL പൈപ്പറ്റിനേക്കാൾ 0.25 - 2.5 µL പൈപ്പറ്റും പൊരുത്തപ്പെടുന്ന ടിപ്പും തിരഞ്ഞെടുക്കുക.
2. കാലിബ്രേഷനും പരിപാലനവും: നിങ്ങളുടെ പൈപ്പറ്റുകൾ ശരിയായി കാലിബ്രേറ്റ് ചെയ്യുകയും പരിപാലിക്കുകയും ചെയ്യേണ്ടത് അത്യാവശ്യമാണ്. ഒരു പൈപ്പറ്റിലെ ചെറിയ ക്രമീകരണങ്ങളും തകർന്ന ഭാഗങ്ങളും വ്യവസ്ഥാപിതവും ക്രമരഹിതവുമായ പിശക് മൂല്യങ്ങളിൽ വൻ വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു. ISO 8655 അനുസരിച്ച് ഒരു കാലിബ്രേഷൻ വർഷത്തിലൊരിക്കൽ നടത്തണം.
3. പോസിറ്റീവ് ഡിസ്‌പ്ലേസ്‌മെൻ്റ് പൈപ്പറ്റുകൾ: നിങ്ങളുടെ ലാബിൽ കുറഞ്ഞ വോളിയം ശ്രേണിയിലുള്ള പോസിറ്റീവ് ഡിസ്‌പ്ലേസ്‌മെൻ്റ് പൈപ്പറ്റ് ഉണ്ടോയെന്ന് പരിശോധിക്കുക. പൊതുവേ, ഇത്തരത്തിലുള്ള പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നത് ക്ലാസിക് എയർ-കുഷ്യൻ പൈപ്പറ്റുകളേക്കാൾ കൃത്യതയിലും കൃത്യതയിലും മികച്ച പൈപ്പറ്റിംഗ് ഫലത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.
4. വലിയ വോള്യങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുക: അന്തിമ പ്രതികരണത്തിൽ അതേ അളവിൽ വലിയ വോള്യങ്ങൾ പൈപ്പ് ചെയ്യുന്നതിനായി നിങ്ങളുടെ സാമ്പിൾ നേർപ്പിക്കുന്നത് പരിഗണിക്കാം. ഇത് വളരെ ചെറിയ സാമ്പിൾ വോള്യങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് പൈപ്പറ്റിംഗ് പിശകുകൾ കുറയ്ക്കും.

ഒരു നല്ല ഉപകരണത്തിന് പുറമേ, ഗവേഷകന് വളരെ നല്ല പൈപ്പറ്റിംഗ് ടെക്നിക് ഉണ്ടായിരിക്കണം. ഇനിപ്പറയുന്ന ഘട്ടങ്ങളിൽ പ്രത്യേക ശ്രദ്ധ നൽകുക:

1. നുറുങ്ങ് അറ്റാച്ച്‌മെൻ്റ്: അഗ്രഭാഗത്തേക്ക് പൈപ്പറ്റ് ഘടിപ്പിക്കരുത്, കാരണം ഇത് ഫൈൻ ടിപ്പ് എൻഡിന് കേടുപാടുകൾ വരുത്തിയേക്കാം, ലിക്വിഡ് ബീം റീഡയറക്‌ട് ചെയ്യപ്പെടുകയോ ഓറിഫൈസിന് കേടുവരുത്തുകയോ ചെയ്യും. ഒരു ടിപ്പ് ഘടിപ്പിക്കുമ്പോൾ നേരിയ മർദ്ദം മാത്രം പ്രയോഗിക്കുക, സ്പ്രിംഗ്-ലോഡഡ് ടിപ്പ് കോൺ ഉള്ള ഒരു പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിക്കുക.
2. പൈപ്പറ്റ് പിടിക്കുക: സെൻട്രിഫ്യൂജ്, സൈക്ലർ മുതലായവയ്ക്കായി കാത്തിരിക്കുമ്പോൾ പൈപ്പറ്റ് നിങ്ങളുടെ കൈയ്യിൽ പിടിക്കരുത്. പൈപ്പറ്റിൻ്റെ ഉൾഭാഗം ചൂടാകുകയും എയർ കുഷ്യനെ വികസിക്കുകയും ചെയ്യും, ഇത് പൈപ്പ് ചെയ്യുമ്പോൾ സെറ്റ് വോളിയത്തിൽ നിന്ന് വ്യതിചലനത്തിന് കാരണമാകും.
3. പ്രീ-വെറ്റിംഗ്: ടിപ്പിൻ്റെയും പൈപ്പറ്റിൻ്റെയും ഉള്ളിലെ വായുവിൻ്റെ ഈർപ്പം സാമ്പിളിനായി ടിപ്പ് തയ്യാറാക്കുകയും ട്രാൻസ്ഫർ വോളിയം വർദ്ധിപ്പിക്കുമ്പോൾ ബാഷ്പീകരണം ഒഴിവാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
4. ലംബമായ അഭിലാഷം: പൈപ്പറ്റ് ഒരു കോണിൽ പിടിക്കുമ്പോൾ ഉണ്ടാകുന്ന കാപ്പിലറി പ്രഭാവം ഒഴിവാക്കാൻ ചെറിയ വോള്യങ്ങൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുമ്പോൾ ഇത് വളരെ പ്രധാനമാണ്.
5. ഇമ്മേഴ്‌ഷൻ ഡെപ്‌ത്ത്: കാപ്പിലറി ഇഫക്‌റ്റ് കാരണം ടിപ്പിലേക്ക് ദ്രാവകം പ്രവേശിക്കുന്നത് തടയാൻ ടിപ്പ് കഴിയുന്നത്ര ചെറുതായി മുക്കുക. റൂൾ ഓഫ് തമ്പ്: ടിപ്പും വോളിയവും ചെറുതാണെങ്കിൽ, ഇമ്മർഷൻ ഡെപ്ത് കുറയും. ചെറിയ വോള്യങ്ങൾ പൈപ്പ് ചെയ്യുമ്പോൾ ഞങ്ങൾ പരമാവധി 2 മില്ലീമീറ്റർ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
6. 45° കോണിൽ വിതരണം ചെയ്യുന്നു: പൈപ്പറ്റ് 45° കോണിൽ പിടിക്കുമ്പോൾ ദ്രാവകത്തിൻ്റെ ഒപ്റ്റിമൽ ഫ്ലോ-ഔട്ട് ഉറപ്പ്.
7. പാത്രത്തിൻ്റെ ഭിത്തിയിലോ ദ്രാവക പ്രതലത്തിലോ ബന്ധപ്പെടുക: ടിപ്പ് പാത്രത്തിൻ്റെ ഭിത്തിയിൽ പിടിക്കുകയോ ദ്രാവകത്തിൽ മുക്കിവയ്ക്കുകയോ ചെയ്യുമ്പോൾ മാത്രമേ ചെറിയ അളവുകൾ ശരിയായി വിതരണം ചെയ്യാൻ കഴിയൂ. നുറുങ്ങിൽ നിന്നുള്ള അവസാന തുള്ളി പോലും കൃത്യമായി വിതരണം ചെയ്യാൻ കഴിയും.
8. ബ്ലോ-ഔട്ട്: അഗ്രഭാഗത്തുള്ള അവസാന തുള്ളി ദ്രാവകം പോലും വിതരണം ചെയ്യാൻ കുറഞ്ഞ അളവുകൾ വിതരണം ചെയ്ത ശേഷം ഒരു ബ്ലോ-ഔട്ട് നിർബന്ധമാണ്. പാത്രത്തിൻ്റെ മതിലിന് നേരെയും ബ്ലോ-ഔട്ട് നടത്തണം. ദ്രാവക പ്രതലത്തിൽ ഒരു ബ്ലോ ഔട്ട് നടത്തുമ്പോൾ സാമ്പിളിലേക്ക് വായു കുമിളകൾ കൊണ്ടുവരാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക.