Кога волуменот на пипетирање од 0,2 до 5 мл, точноста на пипетирањето и прецизноста е од најголема важност, добра техника за пипетирање е од суштинско значење затоа што грешките во ракувањето се поочигледни со мали количини.
Бидејќи повеќе фокус се става на намалување на реагенсите и трошоците, помалите количини се во голема побарувачка, на пр., За подготовка на PCR Mastermix или ензимски реакции. Но, пипетирањето на мали количини од 0,2 - 5 мл поставува нови предизвици за точност и прецизност на пипетинг. Следниве точки се од суштинско значење:
- Големина на пипета и врв: Секогаш изберете ја пипетата со најнизок можен номинален волумен и најмалиот врв за да ја задржите перницата на воздухот што е можно помал. Кога пипетирате 1 мл, на пр., Изберете 0,25 - 2,5 мл пипета и врв за појавување наместо пипета од 1 - 10 мл.
- Калибрација и одржување: Од суштинско значење е вашите пипети да бидат правилно калибрирани и одржувани. Малите прилагодувања и скршените делови на пипета доведуваат до масовно зголемување на систематските и случајни вредности на грешка. Калибрацијата според ISO 8655 мора да се изврши еднаш годишно.
- Пипети за позитивно поместување: Проверете дали имате пипета за позитивно поместување со опсег со мал обем во вашата лабораторија. Во принцип, користењето на овој вид пипета доведува до подобар резултат на пипетинг во однос на точност и прецизност отколку со класични пипети за воздушно-перница.
- Обидете се да користите поголеми количини: Може да размислите да го разредите вашиот примерок во поголеми количини на пипета со иста количина во конечната реакција. Ова може да ги намали грешките во пипетинг со многу мали количини на примероци.
Покрај добра алатка, истражувачот мора да има многу добра техника на пипетирање. Обрнете посебно внимание на следниве чекори:
- Прицврстување на Совет: Не ја заглавувајте пипетата на врвот, бидејќи тоа може да го оштети крајот на финиот врв, предизвикува да се пренасочи течниот зрак или да го оштети отворот. Нанесете само светло притисок само при приложување на врв и користете пипета со конус на врвот на врвот.
- Држејќи ја пипетата: Не држете ја пипетата во раката додека чекате центрифуга, циклер, итн. Внатрешноста на пипетата ќе се загрее и ќе ја доведе перницата за воздух да се прошири, што резултира во отстапувања од поставениот волумен при пипетирање.
- Пред-ветување: навлажнување на воздухот во внатрешноста на врвот и пипета го подготвува врвот за примерокот и избегнува испарување кога се аспирира волуменот на преносот.
- Вертикална аспирација: Ова е многу важно при ракување со мали количини за да се избегне капиларен ефект што се јавува кога пипетата се држи под агол.
- Длабочина на потопување: Потопете го врвот што е можно помалку за да спречите течност да влезе во врвот заради капиларното дејство. Правило на палецот: колку е помал врвот и волуменот, толку е помала длабочината на потопување. Препорачуваме максимум 2 мм при пипетирање на мали количини.
- Дистрибуција под агол од 45 °: Оптималниот проток на течноста се гарантира кога пипетата се држи под агол од 45 °.
- Контакт до wallидот на садот или течната површина: Мали количини можат правилно да се дистрибуираат само кога врвот се држи против wallидот на садот или да се потопи во течност. Дури и последната капка од врвот може точно да се распредели.
- Излез: Ударот е задолжителен по распределувањето на ниски количини за да се распредели дури и последната капка течност присутна во врвот. Ударот треба да се изврши и на wallидот на бродот. Бидете внимателни да не внесувате воздушни меурчиња во примерокот кога изведувате удар на течната површина.
Време на објавување: февруари-18-2021 година