Nga tangihangaka whakamahia mo te rokiroki tangihanga o nga raina pūtau me etahi atu rawa koiora tino nui, i roto i nga awaawa kua whakakiia ki te hauota wai.
He maha nga waahanga ka whai waahi ki te pupuri angitu o nga pūtau i roto i te hauota wai. Ahakoa ko te maapono taketake he whakatio puhoi, ko te tikanga tika e whakamahia ana ka whakawhirinaki ki te momo pūtau me te cryoprotectant i whakamahia. He maha nga whakaaro mo te haumaru me nga tikanga pai hei whai whakaaro i te wa e rongoa ana nga pūtau ki nga wera iti.
Ko te whainga o tenei panui ki te whakaatu i te ahua o te penapena tangihanga ki roto i te hauota wai.
He aha nga Cryovials
He iti, he ipu kapi i hangaia hei pupuri i nga tauira wai i te pāmahana tino iti. Ka whakarite kia kaua nga pūtau e tiakina ana i roto i te cryoprotectant e pa atu ki te hauota wai, ka whakaiti i te tupono o te whati o nga pūtau i te wa e whai hua ana i te tino whakamatao o te hauota wai.
Ko te nuinga o nga wa e waatea ana nga ipu i roto i te whānuitanga o nga pukapuka me nga hoahoa - ka taea te miro o roto, o waho ranei ki nga papa papatahi, porotaka ranei. Kei te waatea hoki nga whakatakotoranga parakore me nga whakatakotoranga kore.
Ko wai te whakamahiCyrovialski te Rokiroki Pūtau i roto i te Nitrogen Wai
He maha nga whare taiwhanga NHS me nga whare taiwhanga motuhake, tae atu ki nga whare rangahau e tohunga ana ki te peeke toto taura, koiora pūtau epithelial, immunology me te koiora pūtau pūtau e whakamahi ana i nga cryovial ki te pupuri i nga pūtau.
Ko nga pūtau e tiakina ana i tenei ara ko nga B me T Cells, CHO Cells, Hematopoietic Stem and Progenitor Cells, Hybridomas, Intestinal Cells, Macrophages, Mesenchymal Stem and Progenitor Cells, Monocytes, Myeloma, NK Cells and Pluripotent Stem Cells.
He Tirohanga mo te Whakaorangia nga Cryovials i roto i te Nitrogen Wai
Ko te Cryopreservation he tukanga e pupuri ana i nga pūtau me etahi atu hanganga koiora ma te whakamatao ki nga mahana tino iti. Ka taea te penapena nga pūtau ki roto i te hauota wai mo nga tau kaore e ngaro te oranga o te pūtau. He whakahuahua tenei o nga tikanga whakahaere.
Whakaritenga Pūtau
Ko te tikanga tika mo te whakarite tauira ka rereke i runga i te momo o te pūtau, engari i te nuinga o te waa, ka kohia nga pūtau me te centrifuged ki te whakawhanake i te pire-nui-a-roto. Ka whakatārewahia tēnei pire ki roto i te supernatant i konatunatua ki te cryoprotectant, ki te reo whakamarumaru tangi ranei.
Cryopreservation Waenga
Ka whakamahia tenei tikanga ki te pupuri i nga pūtau i roto i nga taiao iti-pamahana ka pa ki a ratou ma te aukati i te hanganga o nga kiripiri i roto me te taapiri, na reira ka mate nga pūtau. Ko ta ratou mahi he whakarato i tetahi taiao haumaru, whakamarumaru mo nga pūtau me nga kopa i te wa o te whakatoo, te rokiroki, me te whakamaroke.
Ko te tikanga penei i te plasma tio hou (FFP), te otinga plasmalyte heparinised, he rongoa-kore-kore ranei, he rongoa-kore-waahanga kararehe ka konatunatua ki nga cryoprotectants penei i te dimethyl sulphoxide (DMSO) te glycerol ranei.
Ko te pellet tauira kua re-wai ka tohatohahia ki roto i nga tangihanga polypropylene penei i teSuzhou Ace Biomedical kamupene Cryogenic Rokiroki Vials.
He mea nui kia kaua e whakakiia nga tangihanga na te mea ka nui ake te tupono o te pakaru me te tuku o roto (1).
Reiti Whakatio Mana
I te nuinga o te waa, ka whakamahia te reiti whakatio puhoi mo te whakamaarama angitu o nga pūtau.
I muri i te tohatoha o nga tauira ki roto i nga ipu tangihanga, ka tuu ki runga i te huka makuku, ki roto ranei i te pouaka whakamahana 4 ℃ ka timata te mahi whakatio i roto i te 5 meneti. Hei aratohu whanui, ka whakamataohia nga pūtau i te tere o te -1 ki te -3 ia meneti (2). Ka tutuki tenei ma te whakamahi i te whakamatao ka taea te whakamaarama, ma te tuu ranei i nga ipu ki roto i te pouaka whakamatao kua tuu ki roto i te –70°C ki te –90°C te pouaka tio.
Whakawhiti ki Liquid Nitrogen
Ka whakawhitia nga ipu cryogenic tio ki roto i te taika hauota wai mo te wa roa ka mau tonu te pāmahana iti iho i te -135 ℃.
Ka taea te whiwhi i enei pāmahana tino iti ma te rumaki ki roto i te hauota wai, kohu kohu ranei.
Wāhanga Wai, Kohu ranei?
Ko te rokiroki i roto i te hauota hauota wai e mohiotia ana ki te pupuri i te pāmahana makariri me te rite tonu, engari kaore i te tūtohutia mo nga take e whai ake nei:
- Ko te hiahia mo nga pukapuka nui (hohonu) o te hauota wai he mea morearea pea. Ko te weranga, ko te mate manawa ranei na tenei he tino mate.
- Ko nga keehi kua tuhia mo te whakapataritari-whakawhitinga na nga mate hopuhopu penei i te aspergillus, hep B me te horapa huaketo ma te wai hauota wai (2,3)
- Ko te kaha o te hauota wai kia rere ki roto i nga ipu i te wa e rumaki ana. Ina tangohia mai i te rokiroki ka whakamahana ki te pāmahana rūma, ka tere te tipu o te hauota. No reira, ka pakaru te ipu ina tangohia mai i te rokiroki hauota wai, ka puta he morearea mai i nga otaota rere e rua me te rongo ki roto (1, 4).
Mo enei take, ko te nuinga o te rokiroki o te pāmahana tino iti i roto i te hauota hauota. Mena me penapena nga tauira ki roto i te waahanga wai, me whakamahi ngongo cryoflex motuhake.
Ko te taha whakararo ki te wahanga kohu ka puta he rōnaki paemahana poutū ka puta he rerekee i waenga i te -135 ℃ me te -190 ℃. Ma tenei e tika te aro turuki i nga taumata hauota wai me nga rereketanga o te pāmahana (5).
He maha nga kaihanga e kii ana he pai nga tangi tangi mo te rokiroki ki raro ki te -135 ℃, hei whakamahi ranei i te wahanga kohu anake.
Te whakamaroke i o Pūtau Kua tiakina
He taumaha te tikanga whakamaroke mo te ahurea tio, me te whakahaere tika me te tikanga kia pai ai te oranga, te whakaora, me te mahi o nga pūtau. Ko nga tikanga whakamaarama ka whakawhirinaki ki nga momo pūtau motuhake. Heoi, ko te whakamaroke tere ka kiia he paerewa ki:
- Whakaitihia nga paanga ki te whakaora i te waea
- Awhina ki te whakaiti i te wa whakakitenga ki nga wairewa kei roto i te papanga mīti
- Whakaitihia nga kino ma te whakamau i te hukapapa
Ko nga kaukau wai, te kaukau pirepire, nga taputapu miihini motuhake ranei ka whakamahia hei whakamaroke tauira.
Ko te nuinga o nga wa ka rewa 1 te raina pūtau i te wa mo te 1-2 meneti, ma te ata hurihuri i roto i te kaukau wai 37 ℃ tae noa ki te iti o te hukapapa e toe ana ki roto i te ipu i mua i te horoinga ki roto i te tikanga whakatipu i mua i te whakamahana.
Mō ētahi pūtau pēnei i ngā kukune whakangote, he mea nui te whakamahana puhoi kia ora ai ratou.
Kua reri nga ruma i naianei mo te ahurea pūtau, mo te wehe i te pūtau, mo te take ranei o te haematopoietic stem cell - he rangahau oranga hei whakapumau i te pono o nga pūtau kakau takoha i mua i te rongoatanga myeloablative.
He tikanga noa ki te tango i nga wahi iti o te tauira i horoia i mua i te horoi i whakamahia hei mahi i te tatau pūtau hei whakatau i nga kuhanga o nga pūtau mo te whakakikorua i te ahurea. Ka taea e koe te aromatawai i nga hua o nga tikanga wehewehenga pūtau me te whakatau i te oranga o te pūtau.
Nga Tikanga Pai mo te Rokiroki o Cryovial
Ko te pai o te whakamarumaru o nga tauira e rongoa ana i roto i nga tangihanga ka whakawhirinaki ki te maha o nga waahanga o te kawa tae atu ki te rokiroki tika me te pupuri rekoata.
- Wehea nga pūtau ki waenga i nga waahi rokiroki– Mena ka whakaaehia nga pukapuka, wehea nga pūtau i waenga i nga ipu ka penapena ki nga waahi motuhake hei whakaiti i te tupono o te ngaro o nga tauira na te ngoikore o nga taputapu.
- Aukati i te poke-whakawhiti– Whiriwhiria mo te whakamahi kotahi nga ipu cryogenic horomata, autoclave ranei i mua i te whakamahinga o muri
- Whakamahia nga oko e tika ana te rahi mo o pūtau– Ka tae mai nga ipu i roto i te whānuitanga o nga pukapuka i waenga i te 1 me te 5mls. A ape i te whakakii i nga ipu hei whakaiti i te tupono ka pakaru.
- Tīpakohia he ipu cryogenic o roto, o waho ranei– E taunaki ana etahi o nga whare wananga i nga ipu miro o roto mo nga tikanga haumaru - ka taea hoki te aukati i te poke i te wa e whakakī ana, i te wa e rongoa ana ki te hauota wai.
- Aukati i te Leakage- Whakamahia nga hiri kua werohia ki roto i te hiri kua werohia ki roto i te potae-taapiri, i nga mowhiti-O ranei hei aukati i te turuturu me te poke.
- Whakamahia nga tohu tohu 2D me nga ipu tapanga– hei whakarite i te whaiwhai, ko nga ipu me nga waahi tuhi nui ka taea e ia ipu te tapanga tika. Ka taea e nga tohu tohu 2D te awhina i te whakahaere rokiroki me te pupuri rekoata. He pai nga potae tohu tae mo te tautuhi ngawari.
- Te tiaki tika mo te rokiroki- Kia kore ai e ngaro nga pūtau, me aro turuki nga oko rokiroki i te pāmahana me te taumata hauota wai. Me whakauru nga whakaoho hei whakatupato i nga kaiwhakamahi mo nga hapa.
Whakatupato Haumaru
Ko te hauota wai he mahi noa i roto i nga rangahau hou engari ka pa te mate kino ki te he te whakamahi.
Ko nga taputapu whakamarumaru whaiaro (PPE) e tika ana kia mau ki te whakaiti i te tupono o te haupapa, te wera me etahi atu mea kino i te wa e whakahaere ana i te hauota wai. Mau
- Ko nga karapu cryogenic
- Koti taiwhanga
- Ko te parepare kanohi katoa e atete ana ki te pa ki te kaki
- He hu kati
- apron kirihou parewai
Me whakanoho nga pouaka hauota wai ki roto i nga waahi whai hau pai hei whakaiti i te tupono o te hauhau – ka rehu te hauota ka mawhiti, ka nekehia te hauora hau. Ko nga toa pukapuka nui me iti nga punaha whakaoho hāora.
He pai te mahi takirua i te wa e whakahaere ana i te hauota wai, me aukati te whakamahi i waho o nga haora mahi noa.
Cryovial hei Tautoko i To Rerenga Mahi
Ko te kamupene a Suzhou Ace Biomedical he maha nga momo momo hua e tutuki ana i o hiahia whakamaarama mo nga momo momo pūtau. Kei roto i te kōpaki te whānuitanga o nga ngongo me te whānuitanga o nga tangihanga parakore.
Ko a maatau tangihanga:
-
Te Pouaka Matapihi Taiwhanga 0.5mL 1.5mL 2.0mL Wai Cryovial Cryogenic Vials Conical Raro Cryotube with Gasket
● 0.5ml,1.5ml,2.0ml te whakatakotoranga,me te remu me te kore remu ranei
● Hoahoa koeko, tu motuhake ranei, he mea parakore, he kore-matea ranei e waatea ana
● He mea hanga nga ngongo potae ki te polypropylene hauora
● PP Cryotube Vials Ka taea te whakatotoka me te rewa
●Ka taea e te hoahoa potae o waho te whakaiti i te tupono o te poke i te wa o te maimoatanga tauira.
● Potae ngongo cryogenic ngongo Miro huritao mo te whakamahi
● Ko nga ngongo e pai ana ki nga rotors noa
● Ko nga ngongo tangi-o-mowhiti tangi ka uru ki nga pouaka pouaka pouaka pouaka 1-inihi me te 2-inihi, 48well, 81well,96well me 100well
● Ka taea ki te 121°C me te whakatio ki te -86°CWAHI NO
MAUTANGA
ROTO
KAUPAPAKATOA
PCS/Puke
PEKE/PAHI
ACT05-BL-N
PP
0.5ML
Pango, Kōwhai, Kahurangi, Whero, Waiporoporo, Mā
500
10
ACT15-BL-N
PP
1.5ML
Pango, Kōwhai, Kahurangi, Whero, Waiporoporo, Mā
500
10
ACT15-BL-NW
PP
1.5ML
Pango, Kōwhai, Kahurangi, Whero, Waiporoporo, Mā
500
10
ACT20-BL-N
PP
2.0ML
Pango, Kōwhai, Kahurangi, Whero, Waiporoporo, Mā
500
10
Wā tuku: Tihema-27-2022