Kei roto i te paerewa o nga tukanga te arotautanga me te whakatuutanga me te whakakotahitanga o muri, ka taea te mahi tino pai mo te wa roa - motuhake mai i te kaiwhakamahi. Ko te paerewa e whakarite ana i nga hua o te kounga teitei, tae atu ki o raatau whakaputanga me te whakataurite.
Ko te whainga o te PCR (matarohia) ko te whakatipuranga o te hua pono me te whakahoki ano. Mo etahi tono, ko te hua o teHua PCRe tika ana hoki. Mo enei tauhohenga, me tupato kia kaua e taupatupatu nga tauira, kia mau tonu te reremahi PCR. Ko te tikanga, ko te whakamaoritanga ki te whakaiti i te whakaurunga o nga poke ka puta mai he hua pai, he hua kino teka ranei, ka aukati ranei i te tauhohenga PCR. I tua atu, kia rite nga tikanga tauhohenga mo ia tauira i roto i te oma, ka taea hoki te whakawhiti ki nga tauhohenga o muri mai (he rite tonu te tikanga). E pa ana tenei ki te hanganga o nga tauhohenga tae atu ki te ahua o te whakahaere i te pāmahana i roto i te pahikara. Ko nga hapa o nga kaiwhakamahi, ko te tikanga, me karohia nga mea e taea ana.
Kei raro iho nei, ka whakaatuhia e matou nga wero ka pa ki te wa whakarite me te whakahaerenga o te PCR - me nga huarahi ki nga otinga e noho ana e pa ana ki nga taputapu me nga taonga e whakamahia ana mo te whakataurite i nga rerenga mahi PCR.
Te whakarite tauhohenga
Ko te tohatoha o nga waahanga tauhohenga ki roto i nga ipu-PCR, i nga pereti ranei, he maha nga wero e tika ana kia hinga:
Nga tikanga tauhohenga
Ko te whakatau tika me te tika o nga waahanga takitahi he mea nui ki te whai i nga ahuatanga tauhohenga tino rite. I tua atu i te tikanga paipa paipa, he mea nui te whiriwhiri i te taputapu tika. He maha nga wa kei roto i nga ranunga matua PCR nga matū e piki ake ai te pokey, e whakaputa pahuka ranei. I roto i te mahi paipa, ka arai enei ki te makuku nui o tetohutohu paipa, na reira ka whakaiti i te tika o te paipa. Ma te whakamahi i nga punaha toha tika, etahi atu tohutohu paipa paipa ranei e iti ake ana te makuku ka taea te whakapai ake i te tika me te tika o te mahi paipa.
Nga poke
I te wa o te tukunga, ka hangaia nga aerosol, mena ka uru ki roto o te pipette, ka pokea tetahi atu tauira i te wa o te mahi paipa. Ka taea te aukati ma te whakamahi i nga tohutohu tātari, i nga punaha nuku tika ranei.
Nga taonga pau pera itohutohuKo nga oko me nga pereti e whakamahia ana i roto i te rerengamahi PCR me kaua e mau nga matū e whakararu ana i te tauira, e whakapohehe ranei i te hua. Kei roto i enei ko te DNA, DNases, RNases me te aukati PCR, tae atu ki nga waahanga ka marewa pea mai i te rauemi i te wa o te tauhohenga - he matū e kiia nei he rewa.
Hapa kaiwhakamahi
Ko te nui ake o nga tauira ka tukatukahia, ka nui ake te tupono o te hapa. He ngawari noa iho te paipa o tetahi tauira ki te ipu he, ki te poka he ranei. Ka tino whakaitihia tenei mate ma te tohu ngawari ki nga puna. Na roto i te aunoatanga o nga mahi tuku, ka whakaitihia te "take tangata", ara, nga hapa me nga rereketanga e pa ana ki nga kaiwhakamahi, na reira ka piki ake te whakaputa, ina koa mo te iti o nga pukapuka tauhohenga. Me whai pereti e tika ana te whakapumautanga o te ahu hei mahi i roto i te teihana mahi. Ko nga tohu tohu taapiri e whakarato ana i te panui-miihini taapiri, he maamaa te tirotiro tauira puta noa i te mahi katoa.
Papatonotanga o te thermocycler
Ko te whakahōtaka i tetahi taputapu ka kaha ki te whakapau i te waa me te hapa. Ka mahi tahi nga ahuatanga rereke o te PCR hei whakangawari i tenei mahi, me te mea nui, kia noho haumaru:
Ko te mahi ngawari me te arahi pai o nga kaiwhakamahi ko te putake o te kaupapa pai. Ko te hanga i runga i tenei turanga, ka aukatihia e te whakahaerenga kaiwhakamahi kua parea-kupuhipa te whakarereke i ana ake kaupapa e etahi atu kaiwhakamahi. Mena he maha nga kaieke paihikara (he rite te momo) e whakamahia ana, he pai mena ka taea te whakawhiti tika i tetahi papatono mai i tetahi taputapu ki tetahi atu ma te USB, te hononga ranei. Ka taea e te rorohiko rorohiko te whakahaere matua me te haumaru o nga papatono, nga mana kaiwhakamahi me nga tuhinga kei runga rorohiko.
Rere PCR
I te wa e oma ana, ka whakanuia te DNA i roto i te oko tauhohenga, me waiho ia tauira ki nga tikanga tauhohenga riterite. Ko nga waahanga e whai ake nei e tika ana mo te tukanga:
Te whakahaere i te pāmahana
Ko te tino tika i roto i te whakahaere i te pāmahana me te riterite o te poraka kaihurihuri te putake mo te whakamahana pāmahana o nga tauira katoa. Ko te kounga teitei o nga huānga whakamahana me te whakamahana (petier huānga), me te huarahi e hono ai enei ki te poraka, ko nga mea whakatau ka whakatau i te tupono o nga rereketanga o te pāmahana e kiia nei ko te "painga taha"
Te whakaetonga
Ko nga kuhanga o nga waahanga tauhohenga takitahi kia kaua e huri i te waa o te tauhohenga na te whakaetonga. Ki te kore, he iti noa ihoHua PCRka taea te hanga, karekau ranei. Na reira he mea nui ki te whakaiti i te whakaetonga ma te whakarite hiri mau. I tenei keehi, ka mahi tahi te taupoki wera o te thermocycler me te hiri o te waka. He rereke nga whiringa hiri e waatea ana moNga pereti PCR (hono: Tuhinga hiri), e tutuki ai te hiri pai ma te hiri wera. Ka pai ano etahi atu katinga, mena ka taea te whakatika te pehanga whakapiri o te taupoki pahikara ki te hiri kua tohua.
Kua whakatakotohia te whakaritenga paerewa hei tiaki i nga hua tika me te whakaputa ano mo te wa roa. Kei roto i tenei ko te tiaki i nga taputapu i nga wa katoa kia pai ai te mahi. Ko nga taonga pau katoa me noho te kounga teitei puta noa i nga rota katoa ka mahia, a me whakapumau to ratou waatea.
Te wa tuku: Noema-29-2022