Ho an'ny fanehoan-kevitra fanamafisam-peo mahomby dia ilaina ny fisian'ny singa fanehoan-kevitra tsirairay ao amin'ny fifantohana marina amin'ny fanomanana tsirairay. Ankoatra izany, zava-dehibe ny tsy hisian'ny loto.
Indrindra fa rehefa maro ny fanehoan-kevitra tsy maintsy apetraka, dia napetraka mba hanomanana ny antsoina hoe master mix fa tsy ny pipet ny reagent tsirairay ao anaty sambo tsirairay. Ny fangaro efa namboarina mialoha dia azo amidy, izay tsy misy afa-tsy ny singa manokana (primer) sy ny rano ihany no ampiana. Raha tsy izany, ny fangaro master dia azo omanina ho anao. Amin'ireo variana roa ireo, ny fangaro dia zaraina amin'ny sambo PCR tsirairay tsy misy môdely ary ny santionan'ny ADN tsirairay dia ampiana misaraka amin'ny farany.
Ny fampiasana fangaro master dia manana tombony maromaro: Voalohany, mihena ny isan'ny dingana fametahana tokana. Amin'izany fomba izany, na ny mety hisian'ny hadisoan'ny mpampiasa mandritra ny pipetting sy ny mety hisian'ny loto dia mihena ary mazava ho azy fa voavonjy ny fotoana. Amin'ny ankapobeny, ny fahamarinan'ny pipetting dia avo kokoa, satria ny volume lehibe kokoa dia dosed. Mora takarina izany rehefa manamarina ny angon-drakitra ara-teknika amin'ny pipettes: Arakaraky ny kely kokoa ny habetsaky ny dosed, ny avo kokoa ny fiviliana. Ny zava-misy fa ny fanomanana rehetra dia avy amin'ny sambo iray ihany dia misy fiantraikany tsara amin'ny homogeneity (raha mifangaro tsara). Izany koa dia manatsara ny reproducibility ny andrana.
Rehefa manomana ny fangaro master dia tokony asiana 10% farafahakeliny fanampiny (ohatra, raha ilaina ny fanomanana 10, kajy amin'ny 11), ka na dia ny vilany farany aza dia feno tsara. Amin'izany fomba izany, ny tsy fahatomombanan'ny pipetting (kely), ary ny vokatry ny fahaverezan'ny santionany rehefa manonitra ny vahaolana misy fanasan-damba dia azo onitra. Ny fanasan-damba dia voarakitra ao anaty vahaolana anzima toy ny polymerase sy master mixes, ka mahatonga ny fiforonan'ny foam sy ny sisa tavela amin'ny faritra anatiny.toro-hevitra pipette.
Miankina amin'ny fampiharana sy ny karazana ranon-javatra atolotra, ny teknikan'ny pipetting marina (1) dia tokony hofidina ary ny fitaovana mifanaraka amin'izany. Ho an'ny vahaolana misy fanasan-damba, dia soso-kevitra ny rafitra fifindran'ny mivantana na ilay antsoina hoe "fijanonana ambany" toro-hevitra pipette ho solon'ny pipette misy rivotra. Ny vokatry nyACE PIPETTEdia mifototra amin'ny ambonin'ny hydrophobic manokana. Ny ranon-javatra misy fanasan-damba dia tsy mamela sarimihetsika sisa ao anatiny sy ivelany, mba hampihenana ny fahaverezan'ny vahaolana.
Ankoatra ny fatrany marina amin'ny singa rehetra, dia zava-dehibe ihany koa ny tsy hisian'ny fandotoana ny fanomanana. Tsy ampy ny mampiasa fitaovana azo ampiasaina amin'ny fahadiovana avo lenta, satria ny fizotran'ny pipetting amin'ny pipette misy rivotra dia afaka mamokatra aerosol izay mijanona ao anaty pipette. Ny ADN izay mety ho voarakitra ao amin'ny aerosol dia azo afindra avy amin'ny santionany iray mankany amin'ny manaraka amin'ny dingana famafazana manaraka ary mitarika ho amin'ny fandotoana. Ireo rafitra fifindra-monina mivantana voalaza etsy ambony dia mety hanamaivana izany loza izany ihany koa. Ho an'ny pipettes amin'ny rivotra dia misy dikany ny mampiasa toro-hevitra momba ny sivana mba hiarovana ny pipette cone amin'ny alàlan'ny fitazonana splashes, aerosol, ary biomolecules.
Fotoana fandefasana: Dec-06-2022