Cryovialsdia matetika ampiasaina amin'ny fitahirizana cryogenic tsipika sela sy fitaovana biolojika manan-danja hafa, ao amin'ny dewar feno azota ranon-javatra.

Misy dingana maromaro tafiditra amin'ny fiarovana mahomby ny sela amin'ny azota ranoka. Raha ny fitsipika fototra dia ny fanamainana miadana, ny teknika marina ampiasaina dia miankina amin'ny karazana sela sy ny cryoprotectant ampiasaina. Misy fiheverana momba ny fiarovana sy fomba fanao tsara indrindra tokony hodinihina rehefa mitahiry sela amin'ny hafanana ambany toy izany.

Ity lahatsoratra ity dia mikendry ny hanome topimaso ny fomba fitahirizana ny cryovial amin'ny azota ranoka.

Inona no atao hoe Cryovial

Ny cryovial dia vilia kely misy satroka natao hitahirizana santionany ranon-javatra amin'ny hafanana faran'izay ambany. Miantoka izy ireo fa ny sela voatahiry ao amin'ny cryoprotectant dia tsy mifandray mivantana amin'ny azota ranon-javatra, manamaivana ny mety hisian'ny fahatapahan'ny sela nefa mbola mahazo tombony amin'ny fiantraikan'ny hatsiaka mahery vaika avy amin'ny azota ranona.

Ny vials dia matetika misy amin'ny karazana boky sy endrika - mety ho kofehy anatiny na ivelany miaraka amin'ny ambany fisaka na boribory. Misy ihany koa ny endrika sterile sy tsy sterile.

Iza no mampiasaCyrovialsmba hitahiry ny sela ao anaty ranon-javatra azota

Ny isan-karazany ny NHS sy ny laboratoara tsy miankina, ary koa ny andrim-pikarohana manam-pahaizana manokana momba ny tadin-drà banky, epithelial sela biolojia, immunology ary stem cell biolojia mampiasa cryovials mba cryopreserve sela.

Ny sela voatahiry amin'izany fomba izany dia ahitana ny sela B sy T, ny sela CHO, ny sela hematopoietika sy ny sela progenitor, ny Hybridomas, ny selan'ny tsinay, ny macrophages, ny cellule mesenchymal sy ny progenitor, ny monocytes, ny myeloma, ny cellules NK ary ny cellule stem pluripotent.

Overview ny fomba fitahirizana Cryovials amin'ny ranon-javatra azota

Ny cryopreservation dia dingana iray mitahiry sela sy zavatra biolojika hafa amin'ny alàlan'ny fampangatsiahana azy ireo amin'ny hafanana ambany dia ambany. Ny sela dia azo tehirizina amin'ny azota ranoka mandritra ny taona maro tsy misy fahaverezan'ny fahafahan'ny sela. Ity dia famintinana ny fomba fiasa ampiasaina.

Fiomanana sela

Ny fomba marina hanomanana santionany dia hiovaova arakaraka ny karazana sela, fa amin'ny ankapobeny, ny sela dia angonina sy centrifuged mba hamorona pellet manankarena sela. Ity pellet ity dia averina ao anaty supernatant mifangaro amin'ny cryoprotectant na fitaovana cryopreservation.

Cryopreservation Media

Ity fitaovana ity dia ampiasaina amin'ny fitahirizana ny sela ao amin'ny tontolo ambany hafanana hiharan'izy ireo amin'ny alàlan'ny fanakanana ny fiforonan'ny kristaly anatiny sy extracellular ary noho izany ny fahafatesan'ny sela. Ny andraikitr'izy ireo dia ny manome tontolo iainana azo antoka sy fiarovana ho an'ny sela sy ny tavy mandritra ny fizotran'ny hatsiaka, fitehirizana ary fanalefahana.

Ny fitaovana toy ny plasma fresh frozen (FFP), heparinised plasmalyte solution na serum-free, biby tsy misy singa dia mifangaro amin'ny cryoprotectants toy ny dimethyl sulphoxide (DMSO) na glycerol.

Ny pellet santionany nohavaozina indray dia arotsaka ao anaty cryovial polypropylene toy nySuzhou Ace Biomedical orinasa Cryogenic Storage Vials.

Zava-dehibe ny tsy famenoana be loatra ny cryovial satria mety hampitombo ny mety ho triatra sy ny mety hamoahana ny atiny izany (1).

Voafehy ny tahan'ny fangatsiana

Amin'ny ankapobeny, ny tahan'ny fanamainana voafehy miadana dia ampiasaina amin'ny fitahirizana ny sela mahomby.

Aorian'ny fandefasana ireo santionany ao anaty vials cryogenic, dia apetraka amin'ny gilasy mando na ao anaty vata fampangatsiahana 4 ℃ izy ireo ary manomboka ao anatin'ny 5 minitra ny fomba fanamainana. Raha ny torolalana ankapobeny, ny sela dia mangatsiaka amin'ny tahan'ny -1 hatramin'ny -3 isa-minitra (2). Izany dia azo atao amin'ny alalan'ny fitaovana fampangatsiahana programmable na amin'ny alalan'ny fametrahana vials ao amin'ny vata insulated napetraka ao amin'ny -70 ° C hatramin'ny -90 ° C ny tahan'ny vata fampangatsiahana.

Hiverina any amin'ny Liquid Nitrogen

Ny vials cryogenic mangatsiaka dia afindra any amin'ny tanky azota azota mandritra ny fotoana tsy voafetra raha toa ka mitazona hafanana latsaky ny -135 ℃.

Ireo mari-pana faran'izay ambany ireo dia azo amin'ny alalan'ny asitrika ao anaty ranon-javatra na etona azota.

Rano sa Vapor Phase?

Ny fitehirizana amin'ny nitrogen phase liquide dia fantatra amin'ny fitazonana ny mari-pana mangatsiaka miaraka amin'ny tsy fitoviana tanteraka, saingy matetika no tsy soso-kevitra noho ireto antony manaraka ireto:

• Ny filana be dia be (halalin'ny) ny ranon-javatra azota izay mety ho loza. Tena mampidi-doza ny may na ny asphyxiation noho izany.
• Tranga voarakitra an-tsoratra momba ny fihanaky ny aretina vokatry ny areti-mifindra toy ny aspergillus, hep B ary ny fihanaky ny viriosy amin'ny alàlan'ny fitaovana azota (2,3)
• Ny mety hisian'ny azota ranon-javatra mitete ao anaty vials mandritra ny asitrika. Rehefa esorina amin'ny fitehirizana ary afanaina amin'ny mari-pana amin'ny efitrano, dia mitombo haingana ny azota. Vokatr'izany, mety ho vaky ilay vilia rehefa esorina ao amin'ny fitehirizana azota azota, ka miteraka loza amin'ny fako manidina sy ny fiparitahan'ny ao anatiny (1, 4).

Noho ireo antony ireo, ny fitehirizana hafanana faran'izay ambany dia matetika amin'ny nitrogen phase etona. Rehefa tsy maintsy tehirizina ao amin'ny dingan'ny rano ny santionany, dia tokony hampiasa fantsona cryoflex manokana.

Ny lafy ratsiny amin'ny dingan'ny etona dia mety hitranga ny gradient mari-pana mitsangana ka miteraka fiovaovan'ny mari-pana eo anelanelan'ny -135 ℃ sy -190 ℃. Izany dia mitaky fanaraha-maso amim-pitandremana sy amim-pahazotoana ny haavon'ny azota sy ny fiovan'ny mari-pana (5).

Mpanamboatra maro no manoro hevitra fa ny cryovial dia mety amin'ny fitehirizana hatramin'ny -135 ℃ na ampiasaina amin'ny dingana etona ihany.

Fandotoana ny sela Cryopreserve anao

Ny fomba fandevenana dia mahasosotra ho an'ny kolontsaina mangatsiaka, ary ilaina ny fikarakarana sy teknika araka ny tokony ho izy mba hiantohana ny fahavitrihana tsara indrindra, ny fanarenana ary ny fiasan'ny sela. Miankina amin'ny karazana sela manokana ny protocols thawing marina. Na izany aza, ny fanalefahana haingana dia heverina ho fenitra amin'ny:

• Ampihena ny fiantraika rehetra amin'ny fanarenana ny sela
• Ampio ny fampihenana ny fotoana fampidiran-dresaka amin'ireo solute misy ao amin'ny haino aman-jery mangatsiaka
• Manamaivana ny fahasimbana rehetra amin'ny alàlan'ny fanavaozana ny ranomandry

Ny fandroana rano, ny fandroana vakana, na ny fitaovana mandeha ho azy manokana dia matetika ampiasaina handevonana santionany.

Ny tsipika sela 1 matetika dia avela mandritra ny 1-2 minitra, amin'ny alàlan'ny fanodikodinan'ny rano mafana 37 ℃ mandra-pahatongan'ny ranomandry kely tavela ao anaty vial alohan'ny hanasana azy ireo amin'ny fitaovana fitomboana efa mafana.

Ho an'ny sela sasany toy ny embryon mampinono, ilaina ny hafanana miadana mba hahaveloman'izy ireo.

Ny sela izao dia vonona amin'ny kolontsaina sela, fitokanana sela, na amin'ny trangan'ny cellule stem haematopoietic - fanadihadiana momba ny viability mba hiantohana ny fahamarinan'ny sela mpanome alohan'ny fitsaboana myeloablative.

Fanao mahazatra ny maka aliquots kely amin'ny santionany efa voasasa efa nampiasaina hanaovana fanisana sela mba hamaritana ny habetsahan'ny sela ho an'ny fametahana amin'ny kolontsaina. Azonao atao ny manombatombana ny vokatry ny fomba fitokanana sela ary mamaritra ny fahaveloman'ny sela.

Fomba fanao tsara indrindra amin'ny fitahirizana Cryovial

Ny fahombiazan'ny cryopreservation ny santionany voatahiry ao amin'ny cryovials dia miankina amin'ny singa maro ao amin'ny protocole ao anatin'izany ny fitahirizana tsara sy ny fitehirizana rakitra.

• Zarao ny sela eo amin'ny toerana fitahirizana- Raha avela ny boky dia zarao ny sela eo anelanelan'ny vials ary tehirizo amin'ny toerana samihafa mba hampihenana ny mety ho fahaverezan'ny santionany noho ny tsy fahombiazan'ny fitaovana.
• Misoroka ny fihanaky ny aretina- Misafidiana tavoahangy cryogenic sterile tokana na autoclave alohan'ny fampiasana manaraka
• Mampiasà vials mifanaraka amin'ny haben'ny sela- Ny vials dia tonga amin'ny karazana volume eo anelanelan'ny 1 sy 5mls. Fadio ny famenoana be loatra ny vials mba hampihenana ny mety ho vaky.
• Misafidiana vials cryogenic anatiny na ivelany- Ny lovia vita amin'ny kofehy anatiny dia atolotry ny oniversite sasany ho fepetra fiarovana - afaka misoroka ny fandotoana mandritra ny famenoana na rehefa voatahiry ao anaty nitrogen ranoka.
• Misoroka ny leakage- Mampiasà tombo-kase misy tsindrona roa voavolavola ao amin'ny satroka visy na peratra O mba hisorohana ny fivoahana sy ny loto.
• Mampiasà barcode 2D sy asio marika- mba hahazoana antoka ny fanaraha-maso, ny vials misy faritra fanoratana lehibe dia ahafahan'ny vial tsirairay manana marika tsara. Ny barcode 2D dia afaka manampy amin'ny fitantanana fitahirizana sy fitehirizana rakitra. Ny satroka misy kaody miloko dia ilaina mba hamantarana mora kokoa.
• Fikarakarana fitahirizana sahaza- Mba hahazoana antoka fa tsy ho very ny sela, dia tokony hanara-maso tsy tapaka ny mari-pana sy ny haavon'ny azota rano ny fitoeran-drano. Tokony hapetraka ny fanairana hanairana ny mpampiasa amin'ny fahadisoana.

Fiarovana fiarovana

Lasa fanao mahazatra amin'ny fikarohana maoderina ny azota ranon-javatra saingy mety hiteraka ratra mafy raha tsy ampiasaina amin'ny fomba mety.

Ny fitaovana fiarovana manokana (PPE) araka ny tokony ho izy dia tokony hanaovana mba hampihenana ny mety hisian'ny fanala, ny may ary ny tranga ratsy hafa rehefa mikarakara azota rano. anaovan'ireo

• fonon-tanana cryogenic
• Akanjo laboratoara
• Saron-tava feno mahatohitra ny fiatraikany izay manarona ny tenda ihany koa
• Kiraro mihidy
• Apron plastika tsy misy fitifirana

Ny vata fampangatsiahana azota misy rano dia tokony hapetraka ao amin'ny faritra misy rivotra tsara mba hampihenana ny mety hisian'ny asphyxiation - etona ny azota nitsoaka ary mamindra oksizenina amin'ny atmosfera. Ny trano fivarotana lehibe dia tokony hanana rafitra fanairana oksizenina ambany.

Ny miasa tsiroaroa rehefa mitantana ny azota ranon-javatra dia tsara indrindra ary ny fampiasana azy ivelan'ny ora fiasana mahazatra dia tokony ho voarara.

Cryovials hanohanana ny fizotranao

Ny orinasa Suzhou Ace Biomedical dia manolotra vokatra maro samihafa mifanaraka amin'ny filanao cryopreservation ho an'ny karazana sela samihafa. Ny portfolio dia ahitana karazana tubesas ary koa karazana cryovial sterile.

Ny cryovial anay dia:

• Saron'ny laboratoara 0.5mL 1.5mL 2.0mL Cryovial Cryogenic Vials Conical Bottom Cryotube miaraka amin'ny Gasket

  ● 0.5ml,1.5ml,2.0ml famaritana, misy zipo na tsy misy zipo
  ● Ny endrika conical na tena mijoro, sterile na tsy sterile dia samy misy
  ● Ny fantsona satrony dia vita amin'ny polypropylène ara-pitsaboana
  ● PP Cryotube Vials dia azo averina averina averina averina
  ●Ny famolavolana satroka ivelany dia mety hampihena ny mety hisian'ny loto mandritra ny fitsaboana santionany.
  ● Tavoahangy kriôgène satrony Tady visy ho an'ny rehetra ampiasaina
  ● Ny fantsona dia mifanentana amin'ny ankamaroan'ny rotors mahazatra
  ● Cryogenic fantsona o-peratra fantsona mifanaraka amin'ny fenitra 1-mirefy sy 2-mirefy, 48well, 81well，96well ary 100well vata fampangatsiahana
  ● Autoclavable hatramin'ny 121°C ary azo apetraka amin'ny -86°C

  FIZARANA NO	KEVITRA	BOKY FAHA-	CAPLOKO	PCS/BAG	SAKAFO/TRATRA
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Mainty, mavo, manga, mena, volomparasy, fotsy	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Mainty, mavo, manga, mena, volomparasy, fotsy	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Mainty, mavo, manga, mena, volomparasy, fotsy	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Mainty, mavo, manga, mena, volomparasy, fotsy	500	10