Ny fenitra ny fizotrany dia ahitana ny fanolorany sy ny fananganana sy ny fampiroboroboana manaraka azy ireo, mamela ny fampisehoana tsara indrindra amin'ny fotoana maharitra - tsy miankina amin'ny mpampiasa. Ny fenitra dia miantoka ny valiny avo lenta, ary koa ny famerenany sy ny fampitoviana azy ireo.
Ny tanjon'ny (Classic) Pcr dia taranaka azo itokisana sy azo averina. Ho an'ny fampiharana sasany, ny vokatry nyProduct PCRdia misy ihany koa. Noho ireo fanehoan-kevitra ireo dia tsy maintsy raisina ny fikarakarana mba hiantohana fa tsy mifandefitra ny santionany ary mijanona ho milamina ny workflow pcr. Raha ny voafaritra manokana dia mandika ny hanamaivana ny fampidirana ny fitotoana izay mety hitondra vokatra ratsy diso na diso na manelingelina ny fihetsiky ny PCR. Ankoatr'izay, ny toe-piainana mihetsiketsika dia tokony ho mitovy amin'ny santionany tsirairay ao anaty hazakazaka ary azo afindra amin'ny fanehoan-kevitra avy eo (amin'ny fomba mitovy). Io dia manondro ny firongatry ny fanehoan-kevitra ary ny karazana fifehezana ny mari-pana amin'ny cycler. Ny fahadisoan'ny mpampiasa, mazava ho azy, dia tokony hohalavirina araka izay azo atao.
Ity ambany ity dia hasehontsika ny fanamby izay sendra mandritra ny fiomanana sy mandritra ny fihazakazahana PCR - sy ny fomba fiasa amin'ny vahaolana izay misy momba ny zavamaneno sy ny fiheverana ampiasaina amin'ny fenitra ny WORCS.
Fanomanana ny fihetseham-po
Ny fanaparitahana ireo singa amin'ny fanehoan-kevitra ao anaty pcr-vilany, na takelaka, tsirairay avy, dia misy fanamby maro izay tokony ho resy:
Fomba fanehoan-kevitra
Ny fatran'ny singa tena sy ny singa tsirairay dia tsy maintsy ilaina rehefa mikendry ny fihetseham-po mitovy amin'ny tena izy. Ankoatry ny teknika fantsom-pifidianana tsara, ny fisafidianana ny fitaovana mety dia manakiana. Ny Master Master-Mixes matetika dia misy akora izay mampitombo ny viscosity na miteraka foam. Mandritra ny fizotran'ny pipetting, ireo dia mitarika amin'ny fandoroana be dia beTorohevitra Pipette, ka mampihena ny fitrandrahana pipetting. Ny fampiasana ireo rafitra dispensing mivantana na toro-hevitra momba ny pipette hafa izay tsy mora tohina amin'ny fandotoana dia afaka manatsara ny fahitsiana sy ny famaritana ny fizotran'ny pipetting.
Locaminations
Mandritra ny fizotry ny fanaparitahana, ny aerosol dia novolavolaina izay, raha avela hanatratra ny ao anaty pipette, dia mety handoto ny santionany hafa mandritra ny dingana manaraka. Azo sorena amin'ny alàlan'ny fampiasana toro-hevitra sivana na rafitra famindrana mivantana.
Fahafaham-po toy nySOSO-KEVITRA, Ny takelaka sy ny takelaka izay ampiasaina ao amin'ny Work Workflow dia tsy tokony hisy akora izay mampandefitra ny santionany na mamitaka ny vokatra. Anisan'izany ny ADN, ny DNASES, ny rnases sy ny fanoratana ny pcr, ary koa ny singa mety ho resy amin'ny fanehoan-kevitra mandritra ny fanehoan-kevitra - zavatra fantatra amin'ny anarana hoe ravin-tany.
Hadisoana mpampiasa
Ireo santionany misimisy kokoa dia zahana, avo kokoa ny risika mety hitranga. Mora izany dia mora hitranga fa ny santionany iray dia pipetted ao anaty vilany diso na ny tsy mety. Ity risika ity dia mety hampihena be dia be amin'ny fanamarihana tsara ny lava-drano. Amin'ny alàlan'ny famaranana ny dingana dispensing, ny "anton-dehilahy", izany hoe, ny hadisoana sy ny fiovan'ny mpampiasa, dia mihamitombo, ka mitombo ny famerenam-bokatra, indrindra amin'ny tranga kely fanehoan-kevitra kely. Izany dia mitaky takelaka misy ny fitoniana ampy tsara ampiasaina amin'ny toeram-piasana. Ny barcode mipetaka dia manome famakiana milina fanampiny, izay manatsara ny fanenjehana santionany mandritra ny dingana iray manontolo.
Fandaharana ny thermocycler
Ny fandaharana fampitaovana dia mety hanaporofo fa mandany fotoana ary koa ny fahadisoana. Ny cycler cycler pcr samy hafa dia miara-miasa mba hanatsorana ny dingana fizahana ary, ny zava-dehibe indrindra, ny hampiala azy io:
Ny fitarihana mora sy ny mpitari-dalana tsara dia ny fototry ny fandaharana mahomby. Ny fananganana amin'ity fototra ity, ny fitantanan-draharahan'ny mpampiasa fiarovana amin'ny tenimiafina dia hanakana ny fandaharan'asan'ny tsirairay avy mba hiova amin'ny mpampiasa hafa. Raha ampiasaina ny rivodoza marobe (mitovy karazana) dia mahasoa raha azo averina mivantana avy amin'ny fitaovana iray amin'ny alàlan'ny USB na fifandraisana. Ny rindrambaiko informatika dia ahafahan'ny fitantanana afovoany sy azo antoka ny fandaharan'asa, ny zon'ny mpampiasa sy ny antontan-taratasin'ny solosaina.
PCR Run
Mandritra ny fihazakazahana, ny ADN dia nohamafisina tao anaty sambo fanehoan-kevitra, izay tokony hampihena ny santionany tsirairay amin'ny toe-javatra mitovy sy tsy miova. Ireto lafiny manaraka ireto dia mifandraika amin'ny fizotrany:
Fifehezana ny mari-pana
Ny fahitsiana tsara amin'ny fifehezana ny mari-pana sy ny firaisan-kina amin'ny sakana cycler no fototry ny famoahan'ny mari-pana amin'ny santionany rehetra. Ny kalitao avo lenta sy ny singa manafana (ny singa peltier), ary koa ny fomba ifandraisany amin'ny sakana, dia ireo lafin-javatra manapa-kevitra izay hamaritra ny risika ny tsy fitovian'ny mari-pana fantatra amin'ny anarana hoe "effects"
lasa etona
Ny fitrandrahana ny singa ara-pihetseham-po tsirairay dia tsy tokony hiova mandritra ny fihetsiky ny fihetsik'izy ireo noho ny horakoraka. Raha tsy izany, dia mety tsy dia kely loatra izanyProduct PCRazo atokorana, na tsia mihitsy. Tena zava-dehibe ny fanalefahana ny hatsiaka amin'ny alàlan'ny fiantohana ny tombo-kase azo antoka. Amin'izany toe-javatra izany, ny saron-teraky ny thermocycler sy ny tombo-kasen'ilay tombo-kase ny asan'ny sambo. Ny safidy famehezana samihafa dia misyTakelaka PCR (Link: lahatsoratra site), izay ahatanteraka ny tombo-kase tsara indrindra amin'ny alàlan'ny famehezana hafanana. Ny fanakatonana hafa dia mety ho mety ihany koa, raha mbola misy ny tsindry fifandraisana amin'ny hazondamosin'ny cycler dia azo amboarina amin'ny tombo-kase voafantina.
Ny fanodinana fizaràna dia eo amin'ny toerany mba hiarovana ny vokatra marina sy azo averina amin'ny fotoana maharitra. Tafiditra ao anatin'izany ny fikojakojana ny fitaovana mba hahazoana antoka fa milamina foana izany. Ny fahazoana rehetra dia tokony ho kalitao tsy miova hatrany amin'ny filokana rehetra vokarina, ary ny fiafarany azo itokisana dia tsy maintsy antoka.
Paositra: Nov-29-2022