Ny fanamafisam-peo ny dingana dia ahitana ny fanatsarana azy ireo sy ny fametrahana sy ny fampifanarahana manaraka, mamela ny fampandehanana tsara indrindra mandritra ny fotoana maharitra - tsy miankina amin'ny mpampiasa. Ny fanamafisam-peo dia miantoka ny vokatra avo lenta, ary koa ny famerenana sy ny fampitahana azy ireo.
Ny tanjon'ny PCR (klasika) dia ny famokarana vokatra azo antoka sy azo averina. Ho an'ny fampiharana sasany, ny vokatry nyPCR vokatramifandraika koa. Ho an'ireo fanehoan-kevitra ireo, dia tsy maintsy atao ny fitandremana mba hahazoana antoka fa tsy misy lesoka ny santionany ary tsy miova ny fizotran'ny PCR. Amin'ny ankapobeny, izany dia midika hoe manamaivana ny fampidirana loto izay mety hitarika ho amin'ny vokatra tsara diso na diso na manakana ny fihetsiky ny PCR mihitsy aza. Fanampin'izany, ny fepetra fanehoan-kevitra dia tokony hitovy araka izay azo atao ho an'ny santionany tsirairay ao anatin'ny hazakazaka iray ary azo afindra amin'ny fanehoan-kevitra manaraka (amin'ny fomba mitovy). Izany dia manondro ny firafitry ny fanehoan-kevitra ary koa ny karazana fanaraha-maso ny mari-pana ao amin'ny bisikileta. Ny hadisoan'ny mpampiasa, mazava ho azy, dia tokony hohalavirina araka izay azo atao.
Eto ambany dia hampiseho ireo fanamby atrehana mandritra ny fanomanana sy mandritra ny fandehan'ny PCR - ary ny fomba fiasa amin'ny vahaolana izay misy momba ny fitaovana sy kojakoja ampiasaina amin'ny fanamafisana ny workflows PCR.
Fiomanana fanehoan-kevitra
Ny famoahana ireo singa fanehoan-kevitra ao anaty sambo PCR, na takelaka, tsirairay avy, dia misy fanamby maro tsy maintsy resena:
Fepetra fanehoan-kevitra
Ny fatrany marina sy marina amin'ny singa tsirairay dia tena ilaina rehefa mikendry ny toe-javatra mitovy amin'izay mety hitranga. Ankoatra ny teknika pipetting tsara, ny fisafidianana ny fitaovana mety dia zava-dehibe. Ny PCR master-mixes matetika dia misy akora mampitombo ny viscosity na miteraka foam. Mandritra ny dingan'ny pipetting dia mitarika ho amin'ny fandotoana be ny ranotoro-hevitra pipette, ka mampihena ny fahamarinan'ny pipetting. Ny fampiasana rafitra fanaparitahana mivantana na toro-hevitra hafa amin'ny pipette izay tsy dia mora mandona dia afaka manatsara ny fahamarinan'ny fizotry ny pipetting.
Fandotoana
Mandritra ny dingan'ny famoahana dia avoaka ny aerosol izay, raha avela hiditra ao anatin'ny pipette, dia mety handoto santionany hafa mandritra ny dingana fampidinana manaraka. Azo sorohina amin'ny alalan'ny fampiasana toro-hevitra sivana na rafitra fifindra-monina mivantana izany.
Consumables toy nySOSO-KEVITRA, sambo sy takelaka ampiasaina amin'ny PCR workflow dia tsy tokony hisy akora manimba ny santionany na mandika ny vokatra. Anisan'izany ny ADN, DNases, RNases ary PCR inhibitors, ary koa ireo singa mety hivoaka avy amin'ny akora mandritra ny fanehoan-kevitra - akora fantatra amin'ny anarana hoe leachables.
Fahadisoan'ny mpampiasa
Arakaraky ny fikarakarana santionany no atahorana ho diso. Mety hitranga mora foana fa misy santionany apetraka amin'ny lavaka tsy mety na amin'ny lavaka fantsakana. Mety hihena be io risika io amin'ny alalan'ny marika mora hita amin'ny fantsakana. Amin'ny alàlan'ny automatique amin'ny dispensing, ny "antony maha-olombelona", izany hoe, ny lesoka sy ny fiovaovan'ny mpampiasa, dia mihena, ka mampitombo ny famerenana indray, indrindra amin'ny trangan-javatra kely. Mitaky takelaka manana fitoniana amin'ny refy ampy izany mba hampiasaina amin'ny toeram-piasana. Ny barcodes mipetaka dia manome fahafahana mamaky milina fanampiny, izay manamora ny fanaraha-maso ny santionany mandritra ny dingana manontolo.
Programming ny thermocycler
Ny fampandehanana fitaovana iray dia mety ho lany fotoana ary mety ho diso. Ny endri-javatra PCR thermal cycler samy hafa dia miara-miasa mba hanatsorana ity dingana ity ary indrindra indrindra, mba ho azo antoka:
Ny fampandehanana mora sy ny fitarihana mpampiasa tsara no fototry ny fandaharana mahomby. Miorina amin'io fototra io, ny fitantanan'ny mpampiasa voaaro amin'ny tenimiafina dia hisoroka ny fandaharan'ny tena manokana tsy ho novain'ny mpampiasa hafa. Raha mpitaingina bisikileta maromaro (mitovy karazana) no ampiasaina, dia tsara raha azo afindra mivantana avy amin'ny fitaovana iray mankany amin'ny iray hafa amin'ny alalan'ny USB na fifandraisana ny programa iray. Ny rindrankajy informatika dia ahafahan'ny fitantanana foibe sy azo antoka ny programa, ny zon'ny mpampiasa ary ny antontan-taratasy amin'ny solosaina.
PCR mandeha
Mandritra ny fihazakazahana dia ampitomboina ny ADN ao amin'ny sambo fanehoan-kevitra, izay tokony hiharan'ny fepetra fanehoan-kevitra mitovy sy tsy miovaova ny santionany tsirairay. Ireto manaraka ireto dia manan-danja amin'ny dingana:
Fanaraha-maso ny maripana
Ny fahamendrehana tsara amin'ny fanaraha-maso ny mari-pana sy ny homogeneity ny sakana cycler no fototry ny fanamafisana ny mari-pana amin'ny santionany rehetra. Ny kalitao avo lenta amin'ny singa fanafanana sy fampangatsiahana (singa peltier), ary koa ny fomba ifandraisan'izy ireo amin'ny sakana, no anton-javatra manapa-kevitra izay hamaritra ny mety hisian'ny tsy fitovizan'ny mari-pana fantatra amin'ny anarana hoe "effect edge".
lasa etona
Tsy tokony hiova ny fifantohana amin'ny singa fanehoan-kevitra tsirairay mandritra ny hetsika noho ny etona. Raha tsy izany, dia mety ho kely dia kelyPCR vokatramety hiteraka, na tsy misy mihitsy. Noho izany dia zava-dehibe ny hampihenana ny etona amin'ny alàlan'ny fiantohana ny tombo-kase azo antoka. Amin'ity tranga ity, ny saron'ny thermocycler mafana sy ny tombo-kase amin'ny sambo dia miara-miasa. Safidy famehezana samihafa dia misytakelaka PCR (rohy: lahatsoratra famehezana), izay ahazoana ny tombo-kase tsara indrindra amin'ny alàlan'ny famehezana hafanana. Mety mety koa ny fanakatonana hafa, raha toa ka azo amboarina amin'ny tombo-kase voafantina ny fanerena mifandray amin'ny saron'ny mpitaingina bisikileta.
Apetraka ny fanamafisam-peo mba hiarovana ny vokatra marina sy azo averina mandritra ny fotoana maharitra. Tafiditra ao anatin’izany ny fikojakojana tsy tapaka ny fitaovana mba hahazoana antoka fa ao anatin’ny toe-javatra tsara foana. Ny entana azo ampiasaina rehetra dia tokony ho avo lenta tsy tapaka amin'ny vokatra rehetra, ary tsy maintsy azo antoka ny fisiany azo antoka.
Fotoana fandefasana: Nov-29-2022