Sava lalana
Inona no atao hoe asidra asidra?
Amin'ny teny tsotra indrindra amin'ny teny, ny fitrandrahana asidra nokleary dia ny fanesorana ny RNA sy / na ADN avy amin'ny santionany sy ny be loatra izay tsy ilaina. Ny fizotry ny fitrandrahana dia manalavitra ny asidra nokleary avy amin'ny santionany ary manome azy ireo amin'ny endriky ny tsy fitoviana, afaka amin'ny diluents sy ireo voaloto izay mety hisy fiantraikany amin'ny fampiharana ambany.
Fampiharana ny fitrandrahana asidra nokleary
Ny asidra nokleana voadio dia ampiasaina ao amin'ny plethora amin'ny fampiharana samihafa, ary manerana ny indostria samihafa. Ny fahasalamana dia angamba ny faritra izay ampiasainy indrindra, miaraka amin'ny RNA sy ADN fanadiovana ilaina amin'ny mpampiantrano maro samihafa amin'ny tanjona fitsapana samihafa.
Ny fampiharana ny fitrandrahana asidra nokleary amin'ny fahasalamana dia misy:
- Ny taranaka manaraka dia manara-penitra (NGS)
- Ny fambolena mifototra amin'ny SNP
- Genotyping miorina
- famolavolana enzyme famerana
- famakafakana amin'ny fampiasana enzifika manova (ohatra ny ligation sy ny cloning)
Misy ihany koa ny sehatra hafa mihoatra ny fahasalamana, izay misy ny fitrandrahana asidra nokleary, ao anatin'izany fa tsy voafetra amin'ny fitsapana, ny forensics ary ny genomika.
Tantara fohy momba ny fitrandrahana asidra nokleary
Extraction ADNNy daty niverin-dàlana, miaraka amin'ny mpitsabo voalohany fantatra dia notantanan'ny mpitsabo voalohany antsoina hoe Friedrich Miescher tamin'ny 1869. Nanantena ny hamaha ny fitsipiky ny fiainana ny Miesher. Taorian'ny tsy naharetany tamin'ny lymphocytes, dia afaka nahazo vazivazy ny ADN avy amin'ny Leucocyta hita ao amin'ny pus amin'ny fehikibo. Nanao izany izy tamin'ny fampidirana asidra ary avy eo i Alkali tao amin'ny sela handao ny cytoplasm sela, ary avy eo namolavola protocol iray mba hampisaraka ny ADN avy amin'ny proteinina hafa.
Taorian'ny fikarohana momba ny famotehana an'i Miescher dia maro ny mpahay siansa maro no mandroso sy mamolavola teknika mba hampitambatra sy hanadiovana ny ADN. Edwin Joseph Cohn, mpahay siansa proteinina no namorona teknika maro ho an'ny fanadiovana proteinina mandritra ny WW2. Izy no tompon'andraikitra amin'ny fanalavirana ny sombintsombin'ny serum albumin ny ranon-dra, izay zava-dehibe amin'ny fitazonana ny tsindry OSMOTIC amin'ny lalan-drà. Tena zava-dehibe ny fitandremana ny miaramila.
Tamin'ny taona 1953 Francis Crick, niaraka tamin'i Rosalind Franklin sy James Watson, dia namaritra ny firafitry ny ADN, ary mampiseho fa misy rojo vy misy ny nokleafo lava. Ity fahitana mahatsiravina ity dia nanala ny lalana ho an'i Meselson sy Stahl, izay afaka namorona protocol centrifugation sivana mba hanesorana ny ADN avy amin'ny E. Coli Bakteria rehefa nasehon'izy ireo ny fizaram-paritry ny ADN nandritra ny taona 1958.
Tekinika momba ny fitrandrahana asidra asidra
Inona ireo dingana 4 amin'ny fitrandrahana ADN?
Ny fomba fitrandrahana rehetra dia mangotraka amin'ny dingana mitovy.
Fanakorontanana sela. Ity sehatra ity, izay antsoina koa hoe lysis sela, dia misy ny fanakorontanana ny rindrin'ny sela sy / na ny membrane sela, raha avoaka ny tsiranoka intra-cellular izay misy ny asidra sela misy tombony.
Fanesorana ny potika tsy tiana. Anisan'izany ny membrane lipids, proteins ary asidra nokleary hafa izay mety hanelingelina ny fampiharana ambany.
Fitokana-monina. Misy fomba maro samihafa hanisana ireo asidra nokleary ny fahalianana amin'ny lysate izay noforonina izay noforoninao, izay latsaka eo anelanelan'ny sokajy roa lehibe: vahaolana mifototra na fanjakana mifototra (jereo ny faritra manaraka).
Fifantohana. Taorian'ny asidra nokleary dia nitoka-monina avy amin'ny voaloto sy ny diluents hafa rehetra, atolotra ao anaty elatra fatratra izy ireo.
Ireo karazana fitrandrahana roa
Misy karazana fitrandrahana asidra nokleary roa - vahaolana amin'ny fomba mifototra amin'ny vahaolana sy ny fomba fitsipi-pitondran-tena. Ny fomba fiasa mifototra amin'ny vahaolana dia fantatra amin'ny fomba fitrandrahana simika ihany koa, satria tafiditra amin'ny fampiasana zavatra simika handrava ny sela sy ny fidirana amin'ny fitaovana nokleary. Ity dia mety hampiasana ny sômba organika toy ny phenol sy chloroform, na ny tsy manimba ary noho izany dia misy sombin-tsokosoko tsy misy dikany ary noho ny proteinina k na silica gel.
Ohatra amin'ireo fomba fitrandrahana simika samihafa mba handrava ny sela iray dia misy:
- fanimbana osmotic ny membrane
- fandevonan-kanina amin'ny rindrina
- solubilisation of membrane
- miaraka amin'ny mpanararaotra
- miaraka amin'ny fitsaboana alkali
Teknolojia ara-panjakana, izay antsoina koa hoe fomba mekanika, dia misy ny fanararaotana ny fomba ifandraisan'ny ADN amin'ny substrate matevina. Amin'ny fisafidianana voromailala na molekiola izay hasiana ny ADN fa tsy ny mpandinika fa tsy ny famakafakana, azo atao ny mampisaraka azy roa. Ohatra ny teknika fitrandrahana sisin-dàlana miforitra ao anatiny ary misy ny fampiasana silica sy magnetika.
Nohazavaina ny fitrandrahana bead magnetika
Ny fomba fitrandrahana magnetika
Ny mety hisian'ny fanesorana ny vakana magnetika dia nekena voalohany tao amin'ny patanty amerikana izay nametrahan'i Trevor Hawkins, ho an'ny andrim-pikarohana Whitefead Institute. Ity paty ity dia nanaiky fa azo natao ny naka ny fitaovana ara-barotra tamin'ny alàlan'ny famatorana azy ireo amin'ny mpitatitra mpanohana mafy, izay mety ho vakana magnetika. Ny fotokevitra dia ny fampiasanao vatam-bokatra be dia be izay hamboarin'ny fototarazo ny fototarazo, izay afaka misaraka amin'ny tsy manam-petra amin'ny alàlan'ny fampiharana ny hery magnetika mankany ivelan'ny sambo mitazona ny santionany.
Maninona no mampiasa fitrandrahana bead magnetika?
Ny teknolojia fitrandrahana magnetika dia mihamitombo, noho ny mety hisian'ny fomba fanao haingana sy mahomby. Tato ho ato dia nisy ny fivoaran'ny vakana magnetika be dia be miaraka amin'ny rafitra fambolena mety, izay nahatonga ny famafazana ny fitrandrahana asidra nokleary sy ny fiasa izay henjana sy ny fahazavana. Ary koa, ny fomba fitrandrahana sela dia tsy tafiditra amin'ny dingana centrifugation izay mety hiteraka hery manoritra ny ADN. Midika izany fa ny tadin'ny ADN lava dia mijanona ho tsy mivaingana, izay zava-dehibe amin'ny fitiliana genomika.
Paositra: Nov-25-2022