Kā aizzīmogot PCR plāksni

Ievads

PCR plāksnes, laboratorijas štāpeļšķiedrām daudzus gadus, mūsdienu vidē kļūst vēl izplatītāki, jo laboratorijas palielina viņu caurlaidspēju un arvien vairāk izmanto automatizāciju savā darbplūsmā. Var būt grūti sasniegt šos mērķus, saglabājot eksperimentu precizitāti un integritāti. Viena no kopīgajām jomām, kurās kļūdas var rāpot, ir ar blīvēšanuPCR plāksnes, ar sliktu tehniku, kas ļauj iztvaikot paraugus, mainīt pH un tādējādi traucējot fermentatīvās funkcijas, kā arī piesārņojuma aicinājumu. Mācoties aizzīmogot aPCR plāksnePareizi novērš šos riskus un nodrošina reproducējamus rezultātus.

Atrodiet pareizo blīvējumu savai PCR plāksnei

Plāksnes vāciņi pret plēves blīves pret vākiem
Vāciņiir labs veids, kā aizzīmogot savu plāksni ar stingru blīvējumu, vienlaikus dodot jums elastību ļoti viegli atgūt un atkārtoti nokārtot plāksni pēc nepieciešamības bez atkritumiem. Tomēr CAPS ir pāris galvenie trūkumi.

Pirmkārt, jums būs jāiegādājas konkrētā vāciņa, kas ir saderīga, kas padara tos ne daudzpusīgus. Jums būs jāpārliecinās, ka jūsu izvēlētais vāciņš der plāksnei, kas ir atkarīga no tā ražotāja, un izvēlieties vai nu ar kupolu, vai plakanu, pamatojoties uz izmantoto termocikleru.

Otrkārt, vāciņu pielietošana plāksnei var būt ļoti atkārtojoša un garlaicīga, riskējot ar savstarpēju piesārņojumu, ja nepareizā urbumā uzliekat nepareizu vāciņu.

Kamēr plēves blīvējumi ir mazāk elastīgi noņemšanas un nomaiņas ziņā, tie ir ļoti daudzpusīgi, jo tie būs piemēroti jebkura veida PCR plāksnei, neņemot vērā to, kurš ir ražotājs. Tos var vienkārši sagriezt pēc izmēra, padarot tos ļoti efektīvus.

Vēl viena iespēja ir plāksnes vāks. Tie piedāvā mazāku aizsardzību par vāciņiem un blīvējumiem, un galvenokārt tiek izmantoti tikai īstermiņa segums, lai novērstu piesārņojumu.

Optiskās un folijas plēves blīves

Neatkarīgi noAlumīnija folijas filmaLai aizzīmogotu savu plāksni, izlemj jūsu eksperimentālais formāts.Optiskās blīvēšanas plēvesir caurspīdīgi, lai jūs varētu novērot paraugus, vienlaikus tos aizsargājot un novēršot iztvaikošanu. Tie ir īpaši noderīgi arī QPCR eksperimentos, kas ietver ļoti precīzu fluorescences mērījumu veikšanu tieši no plāksnes, tādā gadījumā jums būs nepieciešama blīvēšanas plēve, kas filtrē pēc iespējas mazāk fluorescences. Ir svarīgi pārliecināties, ka zīmogam vai vāciņam, kuru izmantojat, ir pietiekami augsts optiskās skaidrības līmenis, lai nodrošinātu, ka lasījumi ir precīzi.

Folijas plēves ir piemērotas visiem paraugiem, kas ir jutīgi pret gaismu vai ir jāuzglabā zem 80 ° C. Šī iemesla dēļ lielākajai daļai paraugu, kas paredzēti ilgtermiņa glabāšanai, būs nepieciešama folijas plēve. Folijas plēves ir arī caururbtas, kas ir noderīgas vai nu atsevišķu aku pārbaudei, vai arī paraugu pārvietošanai ar adatām. Tas var notikt manuāli vai kā daļu no robotizētas platformas.

Ņemiet vērā arī to, ka agresīvām vielām, kurās ietilpst skābes, bāzes vai šķīdinātāji, būs nepieciešams blīvējums, kas tās var izturēt, un tādā gadījumā folijas blīvējums, iespējams, ir piemērotāks.

Līme pret karstuma blīvēšanas plēvi
Adhesive plēves blīvesir ļoti taisni uz priekšu un viegli uzklājiet. Viss, kas jums nepieciešams, ir tas, lai lietotājam uzklātu blīvējumu plāksnei un izmantotu vienkāršu aplikatora rīku, lai nospiestu un izveidotu cieši blīvējumu.

Siltuma blīvējumi ir progresīvāki, nodrošinot ilgstošu blīvējumu, kas samazināts iztvaikošanas ātrums, salīdzinot ar parasto līmes blīvējumu. Šī opcija ir piemērota, ja jūs vēlaties saglabāt paraugus ilgtermiņā, lai gan tam ir papildu prasība par plāksnes blīvēšanas aprīkojumu.

Kā aizzīmogot PCR plāksni

Plāksnes blīvēšanas metode

Pašlīmējošs

1. Pārliecinieties, ka strādājat ar plakanu un stabilu darba virsmas

2. Noņemiet filmu no tās iesaiņojuma un noņemiet pamatni

3. Uzmanīgi novietojiet blīvējumu uz plāksnes, vienlaikus pārliecinoties, ka visas akas ir pārklātas

4. Izmantojiet aplikatora rīku, lai spiedienu pieliktu pāri plāksnei. Sāciet no viena gala un strādājiet pie otra, vienmērīgi nospiežot

5. Atkārtojiet šo daudzkārt

6. Palaidiet aplikatoru ap ārējām akām, lai pārliecinātos, ka tās ir arī pareizi noslēgtas.

Karstuma blīvējumi

Siltuma blīvējumi darbojas, izkausējot plēvi līdz katras iedobes malai ar plāksnes blīvētāja palīdzību. Lai darbinātu siltuma blīvētāju, skatiet instrukcijas, ko nodrošina aprīkojuma ražotājs. Pārliecinieties, vai ražotājs, no kura jūs iegādājaties savu aprīkojumu, ir cienījams, jo ir ļoti svarīgi, lai blīvējums būtu piemērots, efektīvs un ūdensnecaurlaidīgs.

Plāksnes blīvēšanas augšējie gali

a. Uzliekot spiedienu uz blīvējumu, dodieties gan horizontālos, gan vertikālos virzienos, lai nodrošinātu pareizu blīvējumu

b. Vienmēr ir laba prakse veikt testa braucienu ar visu, ko jūs darāt, un tas neatšķiras no plāksnes blīvējuma. Pārbaudiet ar tukšu plāksni, pirms to lietojat ar paraugiem.

c. Pārbaudot, noņemiet zīmogu un paskatieties, lai redzētu, ka līme ir pareizi iestrēgusi, bez spraugām. Pirmajā atsauces dokumentā tas ir vizuāls attēlojums. Ja jūs neesat pareizi noslēgis plāksni, noņemot blīvējumu, būs spraugas, kur līme nav pilnībā izveidojusi plāksni.

D. Paraugu nosūtīšanai un pārvadāšanai var būt noderīgi uzklāt plastmasas blīvējumu uz folijas blīvējuma virsū papildu aizsardzībai (īpaši no pīrsinga).

E. Vienmēr pārliecinieties, ka, uzklājot filmu, nav izciļņu vai grumbu - tie izraisīs noplūdes un iztvaikošanu