Kā aizzīmogot PCR plāksni

Ievads

PCR plāksnes, kas ir bijis laboratorijas pamatelements jau daudzus gadus, kļūst arvien izplatītāks mūsdienu vidē, jo laboratorijas palielina savu caurlaidspēju un arvien vairāk savās darbplūsmās izmanto automatizāciju. Var būt grūti sasniegt šos mērķus, vienlaikus saglabājot eksperimentu precizitāti un integritāti. Viena no izplatītākajām vietām, kur var pieļaut kļūdas, ir blīvējumsPCR plāksnes, ar sliktu tehniku, kas ļauj iztvaikot paraugus, mainot pH un tādējādi izjaucot fermentatīvās funkcijas un izraisot piesārņojumu. Mācīšanās, kā aizzīmogot aPCR plāksnepareizi novērš šos riskus un nodrošina reproducējamus rezultātus.

Atrodiet pareizo blīvējumu savai PCR plāksnei

Plākšņu vāciņi pret plēves blīvēm un vākiem
Cepuresir labs veids, kā noblīvēt plāksni ar ciešu blīvējumu, vienlaikus nodrošinot elastību, lai plāksni ļoti viegli noņemtu un atkārtoti noslēgtu pēc vajadzības, bez jebkādiem atkritumiem. Tomēr vāciņiem ir daži galvenie trūkumi.

Pirmkārt, jums būs jāiegādājas īpašs vāciņš, kas ir saderīgs, tāpēc tie nav daudzpusīgi. Jums būs jāpārliecinās, vai izvēlētais vāciņš atbilst plāksnei, kas ir atkarīgs no tā ražotāja, un izvēlieties vai nu kupolu, vai plakanu, pamatojoties uz izmantoto termociklu.

Otrkārt, vāciņu uzlikšana uz šķīvja var būt ļoti atkārtota un nogurdinoša, radot savstarpējas inficēšanās risku, ja uzliksiet nepareizu vāciņu nepareizai iedobei.

Lai gan plēves blīves ir mazāk elastīgas noņemšanas un nomaiņas ziņā, tās ir ļoti daudzpusīgas, jo derēs jebkura veida PCR plāksnēm neatkarīgi no ražotāja. Tos var vienkārši sagriezt pēc izmēra, padarot tos ļoti efektīvus.

Vēl viena iespēja ir plāksnes vāks. Tie nodrošina mazāku aizsardzību nekā vāciņi un blīvējumi, un tos galvenokārt izmanto tikai īslaicīgam pārklājumam, lai novērstu piesārņojumu.

Optiskie un folijas plēves blīvējumi

Neatkarīgi no tā, vai jums ir nepieciešams optisks, caurspīdīgs blīvējums vaialumīnija folijas plēvešķīvja aizzīmogošanu nosaka jūsu eksperimentālais formāts.Optiskās blīvējuma plēvesir caurspīdīgi, lai jūs varētu novērot paraugus, vienlaikus aizsargājot tos un novēršot iztvaikošanu. Tie ir īpaši noderīgi arī qPCR eksperimentos, kas ietver ļoti precīzus fluorescences mērījumus tieši no plāksnes, un tādā gadījumā jums būs nepieciešama blīvējuma plēve, kas filtrē pēc iespējas mazāku fluorescenci. Ir svarīgi pārliecināties, ka izmantotajam blīvējumam vai vāciņam ir pietiekami augsts optiskās skaidrības līmenis, lai nodrošinātu rādījumu precizitāti.

Folijas plēves ir piemērotas visiem paraugiem, kas ir jutīgi pret gaismu vai jāuzglabā temperatūrā, kas zemāka par 80°C. Šī iemesla dēļ lielākajai daļai paraugu, kas paredzēti ilgstošai uzglabāšanai, būs nepieciešama folijas plēve. Arī folijas plēves ir caurduramas, kas ir noderīgas gan atsevišķu iedobju pārbaudei, gan paraugu pārnešanai ar adatām. Tas var notikt manuāli vai kā daļa no robotizētas platformas.

Ņemiet vērā arī to, ka agresīvām vielām, kas satur skābes, bāzes vai šķīdinātājus, būs nepieciešams blīvējums, kas tās var izturēt, un tādā gadījumā folijas blīvējums, visticamāk, ir piemērotāks.

Līmējošā plēve salīdzinājumā ar termoblīvēšanas plēvi
Līmplēves blīvesir ļoti vienkārši un viegli pielietojami. Viss, kas jums nepieciešams, ir lietotājam uzlikt plāksni un izmantot vienkāršu aplikatora instrumentu, lai nospiestu un izveidotu ciešu blīvējumu.

Siltuma blīvējumi ir uzlaboti, nodrošinot ilgstošāku blīvējumu, kam ir samazināts iztvaikošanas ātrums salīdzinājumā ar parasto līmes blīvējumu. Šī opcija ir piemērota, ja vēlaties uzglabāt paraugus ilgtermiņā, lai gan tas ir saistīts ar papildu prasībām plākšņu blīvēšanas iekārtām.

Kā aizzīmogot PCR plāksni

Plākšņu blīvēšanas metode

Pašlīmējošs

1. Pārliecinieties, ka strādājat uz līdzenas un stabilas darba virsmas

2. Izņemiet plēvi no iepakojuma un noņemiet pamatni

3. Uzmanīgi uzlieciet blīvējumu uz plāksnes, vienlaikus pārliecinoties, ka visas iedobes ir aizsegtas

4. Izmantojiet aplikatora instrumentu, lai uzliktu spiedienu pāri plāksnei. Sāciet no viena gala un virzieties uz otru, vienmērīgi nospiežot

5. Atkārtojiet to vairākas reizes

6. Apvelciet aplikatoru ap ārējām iedobēm, lai pārliecinātos, ka arī tās ir pareizi noslēgtas.

Siltuma blīvējumi

Siltuma blīvējumi darbojas, izkausējot plēvi līdz katras iedobes malai, izmantojot plākšņu blīvētāju. Lai izmantotu karstuma blīvētāju, skatiet iekārtas ražotāja sniegtos norādījumus. Pārliecinieties, ka ražotājs, no kura iegādājaties savu aprīkojumu, ir uzticams, jo ir ļoti svarīgi, lai blīvējums būtu pareizs, efektīvs un ūdensnecaurlaidīgs.

Plākšņu blīvēšanas augšējie padomi

a. Izdarot spiedienu uz blīvējumu, virzieties gan horizontālā, gan vertikālā virzienā, lai nodrošinātu pareizu blīvējumu

b. Vienmēr ir laba prakse veikt testa darbību neatkarīgi no jūsu darbības, un tas neatšķiras ar plākšņu blīvējumu. Pārbaudiet ar tukšu plāksni, pirms lietojat to ar paraugiem.

c. Pārbaudot, noņemiet blīvējumu un pārbaudiet, vai līme ir pareizi pielipusi bez atstarpēm. Tas ir vizuāli attēlots pirmajā atsauces dokumentā. Ja neesat pareizi noblīvējis plāksni, noņemot blīvējumu, būs spraugas, kur līme nav pilnībā pielipusi pie plāksnes.

d. Paraugu nosūtīšanai un transportēšanai var būt noderīgi uzlikt plastmasas blīvējumu uz folijas blīvējuma, lai nodrošinātu papildu aizsardzību (īpaši pret caurduršanu).

e. Vienmēr pārliecinieties, ka, uzklājot plēvi, nav izciļņu vai grumbu – tas izraisīs noplūdi un iztvaikošanu