5 Vienkārši padomi, kā novērst kļūdas, strādājot ar PCR plāksnēm

Polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) ir viena no plaši zināmajām metodēm, kuras izmanto dzīvības zinātnes laboratorijās.

PCR plāksnes tiek ražotas no pirmās klases plastmasas, lai lieliski apstrādātu un analizētu paraugus vai savāktos rezultātus.

Viņiem ir plānas un viendabīgas sienas, lai nodrošinātu precīzu termisko pārnešanu.

Gatavojoties reāllaika lietojumiem, minūtes DNS vai RNS sadaļa tiek nošķirta un glabāta PCR plāksnēs.

PCR plāksnes ir ļoti efektīvas siltuma blīvēšanā un ierobežo arī siltuma plūsmu.

Tomēr kā efektīvas un uzticamas PCR plāksnes ir kļūdas un neprecizitātes, apstrādājot paraugus.

Tāpēc, ja jūs interesē labas un augstas kvalitātes iegūšanaPCR plāksnes.Ideāli ir sazināties ar uzticamu PCR plāksnes ražotāju. Ar to jūs esat pārliecināts par labāko darījumu.

Šeit ir daži piesardzības pasākumi, kas jāievēro, lai izvairītos no reaģentu vai paraugu piesārņojuma un neļautu neprecizitātei rāpoties rezultātos.

Apkārtnes sterilizēšana
Nepareizi pozitīvi vai negatīvi rodas piemaisījumu klātbūtnes dēļ, kas liek jums šaubīties par rezultātiem.

Piemaisījumi un piesārņotāji rodas dažādās formās, piemēram, nesaistītā DNS vai ķīmiskās piedevās, kas galu galā samazina reakcijas efektivitāti un efektivitāti.

Ir daudz veidu, kā ievērojami samazināt PCR plāksnes piesārņojuma ātrumu.

Sterilizētu filtru padomu izmantošana ir vēl viens noderīgs veids, kā novērst piemaisījumu liešanu paraugos caur pipetēm.

Veltiet pilnīgi tīru aprīkojuma komplektu, kas satur pipetes un plauktus, tikai PCR lietošanai. Tas garantēs nenozīmīgu piemaisījumu vai piesārņotāju nodošanu laboratorijā.

Izmantojiet balinātājus, etanolu uz pipetēm, statīviem un soliem, lai noslaucītu piesārņotājus.

Lai vēl vairāk samazinātu daļiņu piesārņojumu, piešķiriet rezervētu vietu visām jūsu PCR reakcijām.

Katrā solī izmantojiet tīrus cimdus un bieži tos nomainiet.

PCR plāksnes
Pārbaudiet veidnes koncentrāciju un tīrību.
Jāuztur soliņa un aprīkojuma tīrība, ko izmanto, analizējot paraugus ar PCR. Pirms analīzes un apstrādes ir svarīgi apstiprināt paraugu tīrības pakāpi.

Parasti analizatori ņem vērā DNS paraugu koncentrāciju un tīrības līmeni.

Engoavour absorbcijas attiecība uz 260nm/280nm nedrīkst būt mazāka par 11.8. Savukārt piemaisījumu identificēšanai tiek izmantoti nākamais viļņa garums starp 230 nm līdz 320 nm.

Piemēram, haotropie sāļi un citi organiski savienojumi tiek atklāti ar 230 nm absorbcijas ātrumu. Savukārt duļķainība DNS paraugos tiek arī atklāta un pārbaudīta ar absorbcijas ātrumu 320 nm.

Izvairieties no PCR plāksņu pārslodzes ar produktu
Cik vien ir vēlams darbināt vairākus produktus vienlaicīgi, tas rada savstarpēju piesārņošanu PCR plāksnēs.

PCR plāksņu pārslodze ar dažādiem produktiem atkritumiem un apgrūtina paraugu noskaidrošanu.

Veiciet uzskaiti par alikvotu PCR reaģentiem
Nepārtraukti sasalšanas/atkausēšanas cikli un bieža alikvotu lietošana var sabojāt PCR reaģentus, fermentus un DNTP, izmantojot pārkristalizāciju.

Vienmēr cenšos uzraudzīt izmantoto alikvotu ātrumu, sagatavojot paraugus, lai analizētu.

Vēlamās LIMS ir vairāk piemērotas, lai kontrolētu inventāru un reaģentu un paraugu daudzumu iesaldētu vai atkausētu.

Izvēlieties labāko atlaidināšanas temperatūru.
Nepareizas atlaidināšanas temperatūras izvēle un izmantošana ir vēl viena metode PCR rezultāti satur kļūdu.

Dažreiz reakcija nenotiek, kā plānots. Vēlams samazināt rūdīšanas temperatūru, lai atvieglotu veiksmīgu reakciju.

Tomēr temperatūras pazemināšana palielina viltus pozitīvu un gruntēšanas dimēru izskata iespējas.

Ir svarīgi apstiprināt kušanas līknes analīzi, izmantojot PCR plāksnes, jo tas ir labs rādītājs pareizās atlaidināšanas temperatūras izvēlei.

Primer dizaina programmatūra palīdz projektēt, nodrošināt labās atkvēlināšanas temperatūru ar tieši samazina kļūdu PCR plāksnēs.

Vai jums nepieciešama augstas kvalitātes PCR plāksne?
Gadījumā, ja esat apsvēris iespēju atrast uzticamu ražotājuPCR plāksnesApvidū Vairāk meklējiet, jo esat īstajā vietā.

LaipnsNoklikšķiniet šeit, lai sazinātos ar mumsaugstas kvalitātes produktiem un pakalpojumiem par cenu, kas banku nesalauzīs.


Pasta laiks: Oct-30-2021