ມາດຕະຖານຂອງຂະບວນການປະກອບມີການເພີ່ມປະສິດທິພາບແລະການສ້າງຕັ້ງຕໍ່ມາແລະການປະສົມກົມກຽວ, ອະນຸຍາດໃຫ້ປະສິດທິພາບທີ່ດີທີ່ສຸດໃນໄລຍະຍາວ - ບໍ່ຂຶ້ນກັບຜູ້ໃຊ້. ມາດຕະຖານຮັບປະກັນຜົນໄດ້ຮັບທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການແຜ່ພັນແລະການປຽບທຽບຂອງພວກເຂົາ.
ເປົ້າຫມາຍຂອງ (ຄລາສສິກ) PCR ແມ່ນການຜະລິດຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້. ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກສະເພາະໃດຫນຶ່ງ, ຜົນຜະລິດຂອງຜະລິດຕະພັນ PCRຍັງມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງ. ສໍາລັບປະຕິກິລິຍາເຫຼົ່ານີ້, ຕ້ອງໄດ້ຮັບການເອົາໃຈໃສ່ເພື່ອຮັບປະກັນວ່າຕົວຢ່າງບໍ່ຖືກທໍາລາຍແລະຂະບວນການເຮັດວຽກ PCR ຄົງທີ່. ໂດຍສະເພາະ, ນີ້ຫມາຍຄວາມວ່າການຫຼຸດຜ່ອນການແນະນໍາການປົນເປື້ອນທີ່ສາມາດນໍາໄປສູ່ຜົນໄດ້ຮັບທາງລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງຫຼືບໍ່ຖືກຕ້ອງຫຼືແມ້ກະທັ້ງຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຍາ PCR. ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ເງື່ອນໄຂການຕິກິຣິຍາຄວນຈະຄືກັນເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້ສໍາລັບແຕ່ລະຕົວຢ່າງຂອງແຕ່ລະຄົນພາຍໃນໄລຍະຫນຶ່ງແລະຍັງສາມາດໂອນໄປຫາປະຕິກິລິຍາຕໍ່ໄປ (ຂອງວິທີການດຽວກັນ). ນີ້ຫມາຍເຖິງອົງປະກອບຂອງປະຕິກິລິຍາເຊັ່ນດຽວກັນກັບປະເພດຂອງການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມໃນ cycler ໄດ້. ຄວາມຜິດພາດຂອງຜູ້ໃຊ້, ແນ່ນອນ, ຕ້ອງໄດ້ຮັບການຫຼີກເວັ້ນຫຼາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.
ຂ້າງລຸ່ມນີ້, ພວກເຮົາຈະສະແດງໃຫ້ເຫັນສິ່ງທ້າທາຍທີ່ພົບໃນລະຫວ່າງການກະກຽມແລະຕະຫຼອດໄລຍະຂອງ PCR - ແລະວິທີການແກ້ໄຂບັນຫາທີ່ມີຢູ່ໃນເຄື່ອງມືແລະເຄື່ອງບໍລິໂພກທີ່ໃຊ້ສໍາລັບການກໍານົດມາດຕະຖານຂອງຂະບວນການເຮັດວຽກ PCR.
ການກະກຽມປະຕິກິລິຍາ
ການແຈກຢາຍອົງປະກອບຕິກິຣິຍາເຂົ້າໄປໃນເຮືອ PCR, ຫຼືແຜ່ນ, ຕາມລໍາດັບ, ປະກອບດ້ວຍສິ່ງທ້າທາຍຫຼາຍຢ່າງທີ່ຕ້ອງໄດ້ຮັບການແກ້ໄຂ:
ເງື່ອນໄຂປະຕິກິລິຍາ
ປະລິມານຢາທີ່ຖືກຕ້ອງແລະຊັດເຈນຂອງສ່ວນປະກອບຂອງແຕ່ລະບຸກຄົນແມ່ນຂາດບໍ່ໄດ້ໃນເວລາທີ່ແນໃສ່ເງື່ອນໄຂຕິກິຣິຍາທີ່ຄ້າຍຄືກັນທີ່ສຸດທີ່ເປັນໄປໄດ້. ນອກເຫນືອໄປຈາກເຕັກນິກການທໍ່ທີ່ດີ, ການເລືອກເຄື່ອງມືທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນສໍາຄັນ. PCR master-mixes ເລື້ອຍໆມີສານທີ່ເພີ່ມຄວາມຫນືດຫຼືສ້າງໂຟມ. ໃນລະຫວ່າງການຂະບວນການ pipetting, ເຫຼົ່ານີ້ນໍາໄປສູ່ການ wetting ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຂອງຄໍາແນະນໍາ pipette, ດັ່ງນັ້ນການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຖືກຕ້ອງ pipetting. ການນໍາໃຊ້ລະບົບການແຜ່ກະຈາຍໂດຍກົງຫຼືຄໍາແນະນໍາ pipette ທາງເລືອກທີ່ມີຄວາມສ່ຽງຫນ້ອຍທີ່ຈະ wetting ສາມາດປັບປຸງຄວາມຖືກຕ້ອງແລະຄວາມແມ່ນຍໍາຂອງຂະບວນການ pipetting ໄດ້.
ການປົນເປື້ອນ
ໃນລະຫວ່າງຂະບວນການແຈກຢາຍ, aerosols ໄດ້ຖືກສ້າງຂື້ນ, ຖ້າອະນຸຍາດໃຫ້ເຂົ້າໄປໃນທໍ່ທໍ່, ອາດຈະປົນເປື້ອນຕົວຢ່າງອື່ນໃນຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປຂອງທໍ່ທໍ່. ນີ້ສາມາດປ້ອງກັນໄດ້ໂດຍການໃຊ້ຄໍາແນະນໍາການກັ່ນຕອງຫຼືລະບົບການເຄື່ອນຍ້າຍໂດຍກົງ.
ເຄື່ອງບໍລິໂພກເຊັ່ນຄໍາແນະນໍາ, ເຮືອແລະແຜ່ນທີ່ຖືກນໍາໃຊ້ໃນຂະບວນການເຮັດວຽກ PCR ຈະຕ້ອງບໍ່ມີສານທີ່ທໍາລາຍຕົວຢ່າງຫຼືປອມຜົນໄດ້ຮັບ. ເຫຼົ່ານີ້ລວມມີ DNA, DNases, RNases ແລະ PCR inhibitors, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບອົງປະກອບທີ່ອາດຈະ leach ຈາກວັດສະດຸໃນລະຫວ່າງການຕິກິຣິຍາ - ສານທີ່ເອີ້ນວ່າ leachables.
ຜູ້ໃຊ້ຜິດພາດ
ການປະມວນຜົນຕົວຢ່າງຫຼາຍ, ຄວາມສ່ຽງຂອງຄວາມຜິດພາດສູງ. ມັນສາມາດເກີດຂຶ້ນໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍວ່າຕົວຢ່າງຖືກທໍ່ເຂົ້າໄປໃນເຮືອທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງຫຼືດີ. ຄວາມສ່ຽງນີ້ສາມາດຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໂດຍການເຮັດເຄື່ອງຫມາຍທີ່ເຫັນໄດ້ຊັດເຈນຂອງນໍ້າສ້າງ. ໂດຍຜ່ານລະບົບອັດຕະໂນມັດຂອງຂັ້ນຕອນການແຈກຢາຍ, "ປັດໄຈຂອງມະນຸດ", ຫມາຍຄວາມວ່າ, ຄວາມຜິດພາດແລະການປ່ຽນແປງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຜູ້ໃຊ້ໄດ້ຖືກຫຼຸດລົງ, ດັ່ງນັ້ນການເພີ່ມການແຜ່ພັນ, ໂດຍສະເພາະໃນກໍລະນີຂອງປະລິມານຕິກິຣິຍາຂະຫນາດນ້ອຍ. ອັນນີ້ຕ້ອງການແຜ່ນທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງດ້ານມິຕິທີ່ພຽງພໍເພື່ອໃຊ້ໃນບ່ອນເຮັດວຽກ. ບາໂຄດທີ່ຕິດຄັດມາໃຫ້ເຄື່ອງອ່ານເພີ່ມເຕີມ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ການຕິດຕາມຕົວຢ່າງງ່າຍຕະຫຼອດຂະບວນການທັງໝົດ.
ການຂຽນໂປລແກລມຂອງ thermocycler
ການຂຽນໂປຣແກຣມເຄື່ອງມືສາມາດພິສູດໄດ້ວ່າໃຊ້ເວລາຫຼາຍເຊັ່ນດຽວກັນກັບຄວາມຜິດພາດ. ຄຸນສົມບັດເຄື່ອງໄຊ້ຄວາມຮ້ອນ PCR ທີ່ແຕກຕ່າງກັນເຮັດວຽກຮ່ວມກັນເພື່ອເຮັດໃຫ້ຂັ້ນຕອນຂະບວນການນີ້ງ່າຍ ແລະ, ສໍາຄັນທີ່ສຸດ, ເພື່ອເຮັດໃຫ້ມັນປອດໄພ:
ການດໍາເນີນງານງ່າຍແລະການຊີ້ນໍາຂອງຜູ້ໃຊ້ທີ່ດີແມ່ນພື້ນຖານຂອງການຂຽນໂປຼແກຼມທີ່ມີປະສິດທິພາບ. ການກໍ່ສ້າງໃນພື້ນຖານນີ້, ການຄຸ້ມຄອງຜູ້ໃຊ້ທີ່ມີລະຫັດຜ່ານປ້ອງກັນຈະປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ໂປຼແກຼມຂອງຕົນເອງຖືກດັດແປງໂດຍຜູ້ໃຊ້ອື່ນໆ. ຖ້າເຄື່ອງໃຊ້ລົດຖີບຫຼາຍ (ປະເພດດຽວກັນ), ມັນເປັນປະໂຫຍດຖ້າໂຄງການສາມາດໂອນໂດຍກົງຈາກອຸປະກອນຫນຶ່ງໄປຫາອີກອັນຫນຶ່ງໂດຍຜ່ານ USB ຫຼືການເຊື່ອມຕໍ່. ຊອບແວຄອມພິວເຕີເຮັດໃຫ້ການບໍລິຫານສູນກາງແລະຄວາມປອດໄພຂອງໂຄງການ, ສິດທິຂອງຜູ້ໃຊ້ແລະເອກະສານໃນຄອມພິວເຕີໄດ້.
ແລ່ນ PCR
ໃນລະຫວ່າງການແລ່ນ, DNA ໄດ້ຖືກຂະຫຍາຍຢູ່ໃນເຮືອຕິກິຣິຍາ, ບ່ອນທີ່ແຕ່ລະຕົວຢ່າງຄວນໄດ້ຮັບການປະຕິບັດຕາມເງື່ອນໄຂຕິກິຣິຍາທີ່ຄືກັນ. ລັກສະນະຕໍ່ໄປນີ້ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບຂະບວນການ:
ການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມ
ຄວາມຖືກຕ້ອງທີ່ດີເລີດໃນການຄວບຄຸມອຸນຫະພູມແລະຄວາມເປັນເອກະລັກຂອງຕັນ cycler ເປັນພື້ນຖານສໍາລັບການປັບອຸນຫະພູມແມ້ກະທັ້ງຂອງຕົວຢ່າງທັງຫມົດ. ຄຸນນະພາບສູງຂອງອົງປະກອບຄວາມຮ້ອນແລະຄວາມເຢັນ (ອົງປະກອບ peltier), ເຊັ່ນດຽວກັນກັບວິທີການເຫຼົ່ານີ້ເຊື່ອມຕໍ່ກັບຕັນ, ແມ່ນປັດໃຈຕັດສິນໃຈທີ່ຈະກໍານົດຄວາມສ່ຽງຂອງຄວາມແຕກຕ່າງຂອງອຸນຫະພູມທີ່ເອີ້ນວ່າ "ຜົນກະທົບຂອງຂອບ".
ການລະເຫີຍ
ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງອົງປະກອບຕິກິຣິຍາແຕ່ລະບຸກຄົນບໍ່ຄວນປ່ຽນແປງໃນໄລຍະເວລາຂອງປະຕິກິລິຍາເນື່ອງຈາກການລະເຫີຍ. ຖ້າບໍ່ດັ່ງນັ້ນ, ມັນເປັນໄປໄດ້ວ່າຫນ້ອຍຫຼາຍຜະລິດຕະພັນ PCRອາດຈະຖືກສ້າງຂື້ນ, ຫຼືບໍ່ມີເລີຍ. ດັ່ງນັ້ນ, ມັນເປັນສິ່ງ ສຳ ຄັນທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນການລະເຫີຍໃຫ້ໜ້ອຍທີ່ສຸດໂດຍການຮັບປະກັນການປະທັບຕາທີ່ປອດໄພ. ໃນກໍລະນີນີ້, ຝາປິດຄວາມຮ້ອນຂອງເຄື່ອງເຮັດຄວາມຮ້ອນແລະປະທັບຕາຂອງເຮືອເຮັດວຽກຢູ່ໃນມື. ທາງເລືອກການຜະນຶກທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນມີຢູ່ແຜ່ນ PCR (ການເຊື່ອມຕໍ່: ບົດຄວາມການຜະນຶກ), ຊຶ່ງການປະທັບຕາທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນບັນລຸໄດ້ໂດຍຜ່ານການປະທັບຕາຄວາມຮ້ອນ. ການປິດອື່ນໆອາດຈະເຫມາະສົມ, ຕາບໃດທີ່ຄວາມກົດດັນການຕິດຕໍ່ຂອງ lid cycler ສາມາດປັບໄດ້ກັບປະທັບຕາທີ່ເລືອກ.
ມາດຕະຖານຂະບວນການແມ່ນຢູ່ໃນສະຖານທີ່ເພື່ອປົກປ້ອງຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຖືກຕ້ອງແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້ໃນໄລຍະຍາວ. ນີ້ປະກອບມີການບໍາລຸງຮັກສາອຸປະກອນເປັນປົກກະຕິເພື່ອຮັບປະກັນວ່າມັນຢູ່ໃນສະພາບທີ່ເຮັດວຽກດີສະເຫມີ. ເຄື່ອງບໍລິໂພກທັງໝົດຄວນມີຄຸນນະພາບສູງຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງໃນທົ່ວທຸກອັນທີ່ຜະລິດ, ແລະຄວາມພ້ອມທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງພວກມັນຕ້ອງໄດ້ຮັບການຮັບປະກັນ.
ເວລາປະກາດ: 29-11-2022