ປະຕິກິລິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ Polymerase (PCR) ແມ່ນຫນຶ່ງໃນວິທີການທີ່ຮູ້ຈັກກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງທີ່ໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງວິທະຍາສາດຊີວິດ.
ແຜ່ນ PCR ແມ່ນຜະລິດຈາກພາດສະຕິກຊັ້ນທໍາອິດສໍາລັບການປຸງແຕ່ງທີ່ດີເລີດແລະການວິເຄາະຕົວຢ່າງຫຼືຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເກັບກໍາ.
ພວກມັນມີຝາບາງໆ ແລະເປັນເນື້ອດຽວກັນເພື່ອໃຫ້ການຖ່າຍທອດຄວາມຮ້ອນທີ່ຊັດເຈນ.
ໃນການກະກຽມສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ພາກສ່ວນນາທີຂອງ DNA ຫຼື RNA ແມ່ນ secluded ແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນແຜ່ນ PCR.
ແຜ່ນ PCR ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການປະທັບຕາຄວາມຮ້ອນແລະຈໍາກັດການໄຫຼຂອງຄວາມຮ້ອນເຊັ່ນດຽວກັນ.
ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຍ້ອນວ່າແຜ່ນ PCR ມີປະສິດຕິຜົນແລະເຊື່ອຖືໄດ້, ຄວາມຜິດພາດແລະຄວາມບໍ່ສອດຄ່ອງແມ່ນງ່າຍດາຍໃນຂະນະທີ່ການປຸງແຕ່ງຕົວຢ່າງ.
ເພາະສະນັ້ນ, ຖ້າຫາກວ່າທ່ານມີຄວາມສົນໃຈທີ່ຈະໄດ້ຮັບທີ່ດີແລະມີຄຸນນະພາບສູງແຜ່ນ PCR.ມັນເຫມາະສົມທີ່ຈະຕິດຕໍ່ຜູ້ຜະລິດແຜ່ນ PCR ທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້. ດ້ວຍນີ້, ທ່ານແນ່ໃຈວ່າໄດ້ຮັບການຕົກລົງທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ນີ້ແມ່ນຂໍ້ຄວນລະວັງບາງຢ່າງທີ່ຈະປະຕິບັດຕາມເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂອງ reagents ຫຼືຕົວຢ່າງແລະປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງຈາກການ creeping ເຂົ້າໄປໃນຜົນໄດ້ຮັບ.
Sterilizing ທີ່ຢູ່ອ້ອມຂ້າງ
ໃນທາງບວກຫຼືທາງລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງເກີດຂື້ນເນື່ອງຈາກການປະກົດຕົວຂອງຄວາມບໍ່ສະອາດ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ທ່ານສົງໃສຜົນໄດ້ຮັບ.
ຄວາມບໍ່ສະອາດແລະການປົນເປື້ອນເກີດຂື້ນໃນຮູບແບບຕ່າງໆເຊັ່ນ DNA ທີ່ບໍ່ກ່ຽວຂ້ອງຫຼືສານເພີ່ມສານເຄມີເຊິ່ງໃນທີ່ສຸດກໍ່ຫຼຸດລົງປະສິດທິພາບແລະປະສິດທິພາບຂອງປະຕິກິລິຍາ.
ມີຫຼາຍວິທີທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາການປົນເປື້ອນຂອງແຜ່ນ PCR ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
ການນໍາໃຊ້ຄໍາແນະນໍາການກັ່ນຕອງການຂ້າເຊື້ອແມ່ນເປັນອີກວິທີຫນຶ່ງທີ່ເປັນປະໂຫຍດເພື່ອປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ impurities ເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງຂອງທ່ານໂດຍຜ່ານ pipettes ໄດ້.
ອຸທິດອຸປະກອນທີ່ມີຄວາມສະອາດຢ່າງສົມບູນ, ປະກອບດ້ວຍ pipettes ແລະ racks, ສະເພາະສໍາລັບການນໍາໃຊ້ PCR. ນີ້ຈະຮັບປະກັນການຍົກຍ້າຍຂອງ impurities ຫຼືສິ່ງປົນເປື້ອນທີ່ບໍ່ມີເຫດຜົນໃນທົ່ວຫ້ອງທົດລອງ.
ໃຊ້ສານຟອກຂາວ, ເອທານອນໃສ່ທໍ່ທໍ່, ຊັ້ນວາງ ແລະເບາະນັ່ງເພື່ອເຊັດສິ່ງປົນເປື້ອນ.
ຈັດສັນພື້ນທີ່ສະຫງວນສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR ທັງຫມົດຂອງທ່ານເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນຂອງອະນຸພາກຕື່ມອີກ.
ໃຊ້ຖົງມືທີ່ສະອາດທຸກຂັ້ນຕອນ ແລະປ່ຽນແທນເລື້ອຍໆ.
ແຜ່ນ PCR
ກວດກາຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບ.
ຄວາມສະອາດຂອງ bench ແລະອຸປະກອນທີ່ໃຊ້ໃນເວລາທີ່ການວິເຄາະຕົວຢ່າງກັບ PCR ຄວນໄດ້ຮັບການຮັກສາໄວ້. ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະກວດສອບລະດັບຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງກ່ອນທີ່ຈະວິເຄາະແລະການປຸງແຕ່ງ.
ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ນັກວິເຄາະຈະພິຈາລະນາຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງ DNA.
ພະຍາຍາມອັດຕາສ່ວນການດູດຊຶມສໍາລັບ 260nm / 280nm ຈະຕ້ອງບໍ່ຫນ້ອຍກວ່າ 1.8. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມຍາວຄື່ນຕໍ່ມາລະຫວ່າງ 230nm ແລະ 320nm ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດ impurities.
ໃນຕົວຢ່າງ, ເກືອ chaotropic ແລະທາດປະສົມອິນຊີອື່ນໆຖືກກວດພົບໃນອັດຕາການດູດຊຶມ 230nm. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມຂົມຂື່ນໃນຕົວຢ່າງ DNA ຍັງຖືກກວດພົບແລະກວດສອບໃນອັດຕາການດູດຊຶມຂອງ 320nm.
ຫຼີກເວັ້ນການໂຫຼດ PCR Plates ກັບຜະລິດຕະພັນ
ເທົ່າທີ່ມັນຕ້ອງການທີ່ຈະດໍາເນີນການຜະລິດຕະພັນຫຼາຍອັນພ້ອມໆກັນ, ມັນເຮັດໃຫ້ມີການປົນເປື້ອນຂ້າມແຜ່ນ PCR.
ການໂຫຼດແຜ່ນ PCR ຫຼາຍເກີນໄປດ້ວຍຜະລິດຕະພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນເຮັດໃຫ້ເສຍ ແລະເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ສຸດທີ່ຈະກວດສອບຕົວຢ່າງ.
ຮັກສາບັນທຶກຂອງ Aliquot PCR Reagents
ຮອບວຽນການແຊ່ແຂງ/ເສື່ອມຕໍ່ເນື່ອງ ແລະການໃຊ້ aliquot ເລື້ອຍໆອາດຈະທໍາລາຍທາດປະຕິສັງຂອນ PCR, ເອນໄຊ ແລະ DNTP ຜ່ານການເຮັດເປັນກ້ອນຄືນໃໝ່.
ພະຍາຍາມຕິດຕາມອັດຕາຂອງ aliquot ທີ່ໃຊ້ໃນຂະນະທີ່ກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ຈະວິເຄາະ.
LIMS ທີ່ຕ້ອງການແມ່ນ ເໝາະ ສົມກວ່າທີ່ຈະຄວບຄຸມສາງແລະປະລິມານຂອງ reagents ແລະຕົວຢ່າງ froze ຫຼື thawed.
ເລືອກອຸນຫະພູມ Annealing ທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ການເລືອກແລະການນໍາໃຊ້ອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ຜິດພາດແມ່ນອີກວິທີການ PCR ຜົນໄດ້ຮັບມີຄວາມຜິດພາດ.
ບາງຄັ້ງ, ປະຕິກິລິຍາບໍ່ໄປຕາມແຜນການ. ມັນຕ້ອງການທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອຸນຫະພູມ annealing ເພື່ອຄວາມສະດວກໃນການຕິກິຣິຍາສົບຜົນສໍາເລັດ.
ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ການຫຼຸດອຸນຫະພູມເພີ່ມໂອກາດຂອງຜົນບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງແລະຮູບລັກສະນະຂອງ primer dimers.
ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະຢືນຢັນການວິເຄາະຂອງເສັ້ນໂຄ້ງ melting ໃນເວລາທີ່ນໍາໃຊ້ແຜ່ນ PCR ເນື່ອງຈາກວ່າມັນເປັນຕົວຊີ້ວັດທີ່ດີຂອງການເລືອກອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ຖືກຕ້ອງ.
ຊອບແວການອອກແບບ primer ຊ່ວຍໃນການອອກແບບ, ການສະຫນອງອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ຖືກຕ້ອງດ້ວຍການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຜິດພາດໂດຍກົງໃນແຜ່ນ PCR.
ຕ້ອງການແຜ່ນ PCR ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງບໍ?
ໃນກໍລະນີທີ່ທ່ານໄດ້ພິຈາລະນາບ່ອນທີ່ຈະຊອກຫາຜູ້ຜະລິດທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງແຜ່ນ PCR. ບໍ່ຊອກຫາອີກຕໍ່ໄປເພາະວ່າເຈົ້າຢູ່ບ່ອນທີ່ຖືກຕ້ອງ.
ດ້ວຍຄວາມເມດຕາຄລິກທີ່ນີ້ເພື່ອຕິດຕໍ່ພວກເຮົາສໍາລັບຜະລິດຕະພັນແລະການບໍລິການທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງໃນລາຄາທີ່ຈະບໍ່ທໍາລາຍທະນາຄານ.
ເວລາປະກາດ: ຕຸລາ 30-2021