ປະຕິກິລິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ Polymerase (PCR) ແມ່ນຫນຶ່ງໃນບັນດາວິທີການທີ່ຮູ້ກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງວິທະຍາສາດຊີວິດ.
ແຜ່ນ PCR ແມ່ນຜະລິດຈາກປຼາສະຕິກທີ່ຊັ້ນຮຽນທໍາອິດສໍາລັບການປຸງແຕ່ງແລະການວິເຄາະທີ່ດີເລີດຂອງຕົວຢ່າງຫຼືຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເກັບ.
ພວກເຂົາມີຝາບາງໆແລະ homogenous ເພື່ອໃຫ້ການໂອນຍ້າຍຄວາມຮ້ອນທີ່ຊັດເຈນ.
ໃນການກະກຽມສໍາລັບການນໍາໃຊ້ເວລາຈິງ, ພາກທີນາທີຂອງ DNA ຫຼື RNA ແມ່ນຖືກປິດແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນແຜ່ນ PCR.
ແຜ່ນ PCR ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການປະທັບຕາຄວາມຮ້ອນແລະຈໍາກັດການໄຫລຂອງຄວາມຮ້ອນເຊັ່ນກັນ.
ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ເປັນປະສິດຕິຜົນແລະເຊື່ອຖືໄດ້ແຜ່ນ PCR ແມ່ນ, ຄວາມຜິດພາດແລະຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງຫຼືບໍ່ມີປະໂຫຍດໄດ້ງ່າຍໃນຂະນະທີ່ຕົວຢ່າງການປຸງແຕ່ງ.
ເພາະສະນັ້ນ, ຖ້າທ່ານສົນໃຈທີ່ຈະໄດ້ຮັບການຮັບເອົາສິ່ງທີ່ດີແລະມີຄຸນນະພາບສູງແຜ່ນ PCR.ມັນເປັນສິ່ງທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ຈະຕິດຕໍ່ຜູ້ຜະລິດຈານແຜ່ນ PCR ທີ່ຫນ້າເຊື່ອຖື. ດ້ວຍສິ່ງນີ້ທ່ານກໍາລັງຮັບປະກັນໃຫ້ໄດ້ຮັບການຈັດການທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ນີ້ແມ່ນຂໍ້ຄວນລະວັງບາງຢ່າງທີ່ຄວນປະຕິບັດຕາມເພື່ອຫລີກລ້ຽງການປົນເປື້ອນຂອງ reagents ຂອງ reagents ຫຼືຕົວຢ່າງແລະປ້ອງກັນຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງຈາກການເລືອເຂົ້າໄປໃນຜົນໄດ້ຮັບ.
ອະເຊື້ອບໍລິເວນອ້ອມຮອບ
ໃນທາງບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງຫຼືລົບເກີດຂື້ນຍ້ອນການມີຄວາມບໍ່ສະອາດ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ທ່ານສົງໄສຜົນໄດ້ຮັບ.
ຄວາມບໍ່ສະອາດແລະສິ່ງທີ່ປົນເປື້ອນເກີດຂື້ນໃນຮູບແບບຕ່າງໆເຊັ່ນ: ອາການເພີ່ມເຕີມຂອງ DNA ຫຼືສານເຄມີທີ່ບໍ່ກ່ຽວຂ້ອງເຊິ່ງໃນທີ່ສຸດຫຼຸດລົງປະສິດທິຜົນແລະປະສິດທິຜົນຂອງປະຕິກິລິຍາ.
ມີຫລາຍວິທີທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາການປົນເປື້ອນຂອງແຜ່ນ PCR ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
ການນໍາໃຊ້ຄໍາແນະນໍາກ່ຽວກັບການກັ່ນຕອງທີ່ເປັນຫມັນແມ່ນອີກວິທີຫນຶ່ງທີ່ເປັນປະໂຫຍດໃນການປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຄວາມບໍ່ສະອາດຈາກການເລືອເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງຂອງທ່ານໂດຍຜ່ານທໍ່ສົ່ງ.
ອຸທິດຊຸດອຸປະກອນທີ່ສະອາດສົມບູນ, ປະກອບດ້ວຍທໍ່ແລະ racks, ສະເພາະສໍາລັບການນໍາໃຊ້ PCR. ນີ້ຈະຮັບປະກັນການໂອນຍ້າຍທີ່ບໍ່ມີປະໂຫຍດຫຼືການປົນເປື້ອນອ້ອມຫ້ອງທົດລອງ.
ນໍາໃຊ້ຄວາມມຶນເມົາ, ເອທານອນຢູ່ເທິງທໍ່, racks ແລະ benches ເພື່ອເຊັດສິ່ງປົນເປື້ອນ.
ຈັດສັນພື້ນທີ່ສະຫງວນໄວ້ສໍາລັບໂປແກຼມ PCR ຂອງທ່ານທັງຫມົດເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນຂອງສ່ວນຕື່ມອີກ.
ໃຊ້ຖົງມືທີ່ສະອາດຢູ່ທຸກໆບາດກ້າວແລະປ່ຽນແທນໃຫ້ພວກເຂົາເລື້ອຍໆ.
ແຜ່ນ PCR
ກວດກາຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບ.
ຄວາມສະອາດຂອງ bench ແລະອຸປະກອນທີ່ໃຊ້ໃນເວລາທີ່ການວິເຄາະຕົວຢ່າງກັບ PCR ຄວນໄດ້ຮັບການຮັກສາໄວ້. ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະເຮັດໃຫ້ລະດັບຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງຂອງຕົວຢ່າງກ່ອນການວິເຄາະແລະການປຸງແຕ່ງ.
ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ການວິເຄາະພິຈາລະນາພິຈາລະນາລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແລະລະດັບຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງ DNA.
ຄວາມພະຍາຍາມທີ່ສຸດອັດຕາສ່ວນຂອງການດູດຊືມສໍາລັບ 260nm / 280nm ຕ້ອງບໍ່ຫນ້ອຍກວ່າ 1,8. ໃນຂະນະທີ່ຄື້ນຕໍ່ໄປຕໍ່ມາໃນລະຫວ່າງວັນທີ 230NM ແລະ 320NM ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອກໍານົດຄວາມບໍ່ສະອາດ.
ໃນຕົວຢ່າງ, ເກືອ chaotropic ແລະສານປະກອບອິນຊີອື່ນໆຖືກກວດພົບໃນເວລາ 230NM ອັດຕາການດູດຊຶມ. ໃນຂະນະທີ່ tonbidity ໃນຕົວຢ່າງ DNA ຍັງຖືກກວດພົບແລະຢັ້ງຢືນໃນອັດຕາການດູດຊຶມຂອງ 320NM.
ຫລີກລ້ຽງແຜ່ນ PCR ທີ່ເກີນໄປດ້ວຍຜະລິດຕະພັນ
ຫຼາຍເທົ່າທີ່ຕ້ອງການທີ່ຈະດໍາເນີນການຜະລິດຕະພັນທີ່ຫຼາກຫຼາຍພ້ອມກັນ, ມັນຈະສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການປົນເປື້ອນຂອງແຜ່ນ PCR.
Overloading ແຜ່ນ PCR ທີ່ມີຜະລິດຕະພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ຈະຮູ້ຕົວຢ່າງ.
ຮັກສາບັນທຶກຂອງ aliquot PCR reagents
ຮອບວຽນ freeze / ລະລາຍແລະການນໍາໃຊ້ເລື້ອຍໆຂອງ Aliquot ອາດຈະສ້າງຄວາມເສຍຫາຍໃຫ້ PCR Ragents, Enzymes ແລະ DNTP ໂດຍຜ່ານການສະແດງຄວາມຄິດເຫັນ.
ສະເຫມີພະຍາຍາມຕິດຕາມອັດຕາການໃຊ້ຂອງ Aliquot ໃຊ້ໃນຂະນະທີ່ກໍາລັງກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ຈະຖືກວິເຄາະ.
ຂໍ້ຈໍາກັດທີ່ມັກແມ່ນເຫມາະສົມກວ່າທີ່ຈະຄວບຄຸມສິນຄ້າຄົງຄັງແລະຈໍານວນເງິນຊ່ວຍເຫຼືອແລະຕົວຢ່າງ froze ຫຼື thawed.
ເລືອກອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ການເລືອກເອົາແລະການນໍາໃຊ້ອຸນຫະພູມທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນອີກວິທີການຂອງ PCR ອີກປະການຫນຶ່ງທີ່ມີຂໍ້ຜິດພາດ.
ບາງຄັ້ງ, ປະຕິກິລິຍາບໍ່ໄດ້ໄປຕາມແຜນການ. ມັນເປັນສິ່ງທີ່ຕ້ອງການທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອຸນຫະພູມຂອງ annaling ເພື່ອສ້າງຄວາມສະດວກໃຫ້ແກ່ປະຕິກິລິຍາທີ່ປະສົບຜົນສໍາເລັດ.
ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ການຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມເພີ່ມໂອກາດຂອງການເປັນໄປໄດ້ແລະ primer dimers ຮູບລັກສະນະທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.
ມັນເປັນສິ່ງທີ່ສໍາຄັນທີ່ຈະຢືນຢັນການວິເຄາະເສັ້ນໂຄ້ງທີ່ລະລາຍໃນເວລາທີ່ໃຊ້ແຜ່ນ PCR ເພາະມັນເປັນຕົວຊີ້ບອກທີ່ດີຂອງການເລືອກອຸນຫະພູມທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.
ໂປແກຼມອອກແບບ Primer Design ຊ່ວຍດ້ວຍການອອກແບບ, ການສະຫນອງອຸນຫະພູມທີ່ຖືກຕ້ອງໂດຍໃຊ້ຄວາມຜິດພາດໂດຍກົງໃນແຜ່ນ PCR.
ໃນຄວາມຕ້ອງການຂອງແຜ່ນ PCR ທີ່ມີຄວາມຕ້ອງການສູງບໍ?
ໃນກໍລະນີທີ່ທ່ານໄດ້ຮັບການພິຈາລະນາບ່ອນທີ່ຈະຊອກຫາຜູ້ຜະລິດທີ່ຫນ້າເຊື່ອຖືແຜ່ນ PCR. ຄົ້ນຫາບໍ່ມີອີກແລ້ວເພາະວ່າທ່ານຢູ່ບ່ອນທີ່ຖືກຕ້ອງ.
ກະລຸນາກົດບ່ອນນີ້ເພື່ອຕິດຕໍ່ຫາພວກເຮົາສໍາລັບຜະລິດຕະພັນແລະການບໍລິການທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງໃນລາຄາທີ່ຈະບໍ່ທໍາລາຍທະນາຄານ.
ເວລາໄປສະນີ: Oct-30-2021