5 ຄໍາແນະນໍາງ່າຍໆເພື່ອປ້ອງກັນຄວາມຜິດພາດໃນເວລາທີ່ເຮັດວຽກກັບແຜ່ນ PCR

ປະຕິກິລິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ Polymerase (PCR) ແມ່ນຫນຶ່ງໃນວິທີການທີ່ຮູ້ຈັກກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງທີ່ໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງວິທະຍາສາດຊີວິດ.

ແຜ່ນ PCR ແມ່ນຜະລິດຈາກພາດສະຕິກຊັ້ນທໍາອິດສໍາລັບການປຸງແຕ່ງທີ່ດີເລີດແລະການວິເຄາະຕົວຢ່າງຫຼືຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເກັບກໍາ.

ພວກມັນມີຝາບາງໆ ແລະເປັນເນື້ອດຽວກັນເພື່ອໃຫ້ການຖ່າຍທອດຄວາມຮ້ອນທີ່ຊັດເຈນ.

ໃນການກະກຽມສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ພາກສ່ວນນາທີຂອງ DNA ຫຼື RNA ແມ່ນ secluded ແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນແຜ່ນ PCR.

ແຜ່ນ PCR ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການປະທັບຕາຄວາມຮ້ອນແລະຈໍາກັດການໄຫຼຂອງຄວາມຮ້ອນເຊັ່ນດຽວກັນ.

ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຍ້ອນວ່າແຜ່ນ PCR ມີປະສິດຕິຜົນແລະເຊື່ອຖືໄດ້, ຄວາມຜິດພາດແລະຄວາມບໍ່ສອດຄ່ອງແມ່ນງ່າຍດາຍໃນຂະນະທີ່ການປຸງແຕ່ງຕົວຢ່າງ.

ເພາະສະນັ້ນ, ຖ້າຫາກວ່າທ່ານມີຄວາມສົນໃຈທີ່ຈະໄດ້ຮັບທີ່ດີແລະມີຄຸນນະພາບສູງແຜ່ນ PCR.ມັນເຫມາະສົມທີ່ຈະຕິດຕໍ່ຜູ້ຜະລິດແຜ່ນ PCR ທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້. ດ້ວຍນີ້, ທ່ານແນ່ໃຈວ່າໄດ້ຮັບການຕົກລົງທີ່ດີທີ່ສຸດ.

ນີ້ແມ່ນຂໍ້ຄວນລະວັງບາງຢ່າງທີ່ຈະປະຕິບັດຕາມເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂອງ reagents ຫຼືຕົວຢ່າງແລະປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງຈາກການ creeping ເຂົ້າໄປໃນຜົນໄດ້ຮັບ.

Sterilizing ທີ່ຢູ່ອ້ອມຂ້າງ
ໃນທາງບວກຫຼືທາງລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງເກີດຂື້ນເນື່ອງຈາກການປະກົດຕົວຂອງຄວາມບໍ່ສະອາດ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ທ່ານສົງໃສຜົນໄດ້ຮັບ.

ຄວາມບໍ່ສະອາດແລະການປົນເປື້ອນເກີດຂື້ນໃນຮູບແບບຕ່າງໆເຊັ່ນ DNA ທີ່ບໍ່ກ່ຽວຂ້ອງຫຼືສານເພີ່ມສານເຄມີເຊິ່ງໃນທີ່ສຸດກໍ່ຫຼຸດລົງປະສິດທິພາບແລະປະສິດທິພາບຂອງປະຕິກິລິຍາ.

ມີຫຼາຍວິທີທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາການປົນເປື້ອນຂອງແຜ່ນ PCR ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.

ການນໍາໃຊ້ຄໍາແນະນໍາການກັ່ນຕອງການຂ້າເຊື້ອແມ່ນເປັນອີກວິທີຫນຶ່ງທີ່ເປັນປະໂຫຍດເພື່ອປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ impurities ເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງຂອງທ່ານໂດຍຜ່ານ pipettes ໄດ້.

ອຸ​ທິດ​ອຸ​ປະ​ກອນ​ທີ່​ມີ​ຄວາມ​ສະ​ອາດ​ຢ່າງ​ສົມ​ບູນ​, ປະ​ກອບ​ດ້ວຍ pipettes ແລະ racks​, ສະ​ເພາະ​ສໍາ​ລັບ​ການ​ນໍາ​ໃຊ້ PCR​. ນີ້ຈະຮັບປະກັນການຍົກຍ້າຍຂອງ impurities ຫຼືສິ່ງປົນເປື້ອນທີ່ບໍ່ມີເຫດຜົນໃນທົ່ວຫ້ອງທົດລອງ.

ໃຊ້ສານຟອກຂາວ, ເອທານອນໃສ່ທໍ່ທໍ່, ຊັ້ນວາງ ແລະເບາະນັ່ງເພື່ອເຊັດສິ່ງປົນເປື້ອນ.

ຈັດສັນພື້ນທີ່ສະຫງວນສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR ທັງຫມົດຂອງທ່ານເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນຂອງອະນຸພາກຕື່ມອີກ.

ໃຊ້ຖົງມືທີ່ສະອາດທຸກຂັ້ນຕອນ ແລະປ່ຽນແທນເລື້ອຍໆ.

ແຜ່ນ PCR
ກວດກາຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບ.
ຄວາມສະອາດຂອງ bench ແລະອຸປະກອນທີ່ໃຊ້ໃນເວລາທີ່ການວິເຄາະຕົວຢ່າງກັບ PCR ຄວນໄດ້ຮັບການຮັກສາໄວ້. ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະກວດສອບລະດັບຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງກ່ອນທີ່ຈະວິເຄາະແລະການປຸງແຕ່ງ.

ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ນັກວິເຄາະຈະພິຈາລະນາຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງຕົວຢ່າງ DNA.

ພະຍາຍາມອັດຕາສ່ວນການດູດຊຶມສໍາລັບ 260nm / 280nm ຈະຕ້ອງບໍ່ຫນ້ອຍກວ່າ 1.8. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມຍາວຄື່ນຕໍ່ມາລະຫວ່າງ 230nm ແລະ 320nm ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດ impurities.

ໃນຕົວຢ່າງ, ເກືອ chaotropic ແລະທາດປະສົມອິນຊີອື່ນໆຖືກກວດພົບໃນອັດຕາການດູດຊຶມ 230nm. ໃນຂະນະທີ່ຄວາມຂົມຂື່ນໃນຕົວຢ່າງ DNA ຍັງຖືກກວດພົບແລະກວດສອບໃນອັດຕາການດູດຊຶມຂອງ 320nm.

ຫຼີກເວັ້ນການໂຫຼດ PCR Plates ກັບຜະລິດຕະພັນ
ເທົ່າທີ່ມັນຕ້ອງການທີ່ຈະດໍາເນີນການຜະລິດຕະພັນຫຼາຍອັນພ້ອມໆກັນ, ມັນເຮັດໃຫ້ມີການປົນເປື້ອນຂ້າມແຜ່ນ PCR.

ການໂຫຼດແຜ່ນ PCR ຫຼາຍເກີນໄປດ້ວຍຜະລິດຕະພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນເຮັດໃຫ້ເສຍ ແລະເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ສຸດທີ່ຈະກວດສອບຕົວຢ່າງ.

ຮັກສາບັນທຶກຂອງ Aliquot PCR Reagents
ຮອບວຽນການແຊ່ແຂງ/ເສື່ອມຕໍ່ເນື່ອງ ແລະການໃຊ້ aliquot ເລື້ອຍໆອາດຈະທໍາລາຍທາດປະຕິສັງຂອນ PCR, ເອນໄຊ ແລະ DNTP ຜ່ານການເຮັດເປັນກ້ອນຄືນໃໝ່.

ພະຍາຍາມຕິດຕາມອັດຕາຂອງ aliquot ທີ່ໃຊ້ໃນຂະນະທີ່ກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ຈະວິເຄາະ.

LIMS ທີ່ຕ້ອງການແມ່ນ ເໝາະ ສົມກວ່າທີ່ຈະຄວບຄຸມສາງແລະປະລິມານຂອງ reagents ແລະຕົວຢ່າງ froze ຫຼື thawed.

ເລືອກອຸນຫະພູມ Annealing ທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ການ​ເລືອກ​ແລະ​ການ​ນໍາ​ໃຊ້​ອຸນ​ຫະ​ພູມ annealing ທີ່​ຜິດ​ພາດ​ແມ່ນ​ອີກ​ວິ​ທີ​ການ PCR ຜົນ​ໄດ້​ຮັບ​ມີ​ຄວາມ​ຜິດ​ພາດ​.

ບາງຄັ້ງ, ປະຕິກິລິຍາບໍ່ໄປຕາມແຜນການ. ມັນຕ້ອງການທີ່ຈະຫຼຸດຜ່ອນອຸນຫະພູມ annealing ເພື່ອຄວາມສະດວກໃນການຕິກິຣິຍາສົບຜົນສໍາເລັດ.

ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ການຫຼຸດອຸນຫະພູມເພີ່ມໂອກາດຂອງຜົນບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງແລະຮູບລັກສະນະຂອງ primer dimers.

ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະຢືນຢັນການວິເຄາະຂອງເສັ້ນໂຄ້ງ melting ໃນເວລາທີ່ນໍາໃຊ້ແຜ່ນ PCR ເນື່ອງຈາກວ່າມັນເປັນຕົວຊີ້ວັດທີ່ດີຂອງການເລືອກອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ຖືກຕ້ອງ.

ຊອບແວການອອກແບບ primer ຊ່ວຍໃນການອອກແບບ, ການສະຫນອງອຸນຫະພູມ annealing ທີ່ຖືກຕ້ອງດ້ວຍການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຜິດພາດໂດຍກົງໃນແຜ່ນ PCR.

ຕ້ອງການແຜ່ນ PCR ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງບໍ?
ໃນກໍລະນີທີ່ທ່ານໄດ້ພິຈາລະນາບ່ອນທີ່ຈະຊອກຫາຜູ້ຜະລິດທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງແຜ່ນ PCR. ບໍ່ຊອກຫາອີກຕໍ່ໄປເພາະວ່າເຈົ້າຢູ່ບ່ອນທີ່ຖືກຕ້ອງ.

ດ້ວຍຄວາມເມດຕາຄລິກທີ່ນີ້ເພື່ອຕິດຕໍ່ພວກເຮົາສໍາລັບຜະລິດຕະພັນແລະການບໍລິການທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງໃນລາຄາທີ່ຈະບໍ່ທໍາລາຍທະນາຄານ.


ເວລາປະກາດ: ຕຸລາ 30-2021