Wann d'Pipetéierungsvolumen vun 0,2 bis 5 μL pipettéieren, ass d'Pipetéierungsgenauegkeet a Präzisioun vu gréisster Wichtegkeet, eng gutt Pipettetechnik ass essentiell well d'Handhabungsfehler méi offensichtlech sinn mat klenge Volumen.
Wéi méi Fokus op d'Reduktioun vun Reagenzen a Käschten gesat gëtt, si méi kleng Volumen an héich Nofro, zB fir d'Virbereedung vu PCR Mastermix oder Enzymreaktiounen. Awer d'Pipetéierung vu klenge Volumen vun 0,2 - 5 µL setzt nei Erausfuerderunge fir d'Pipetéierungsgenauegkeet a Präzisioun. Déi folgend Punkte si wesentlech:
- Pipette an Tippgréisst: Wielt ëmmer d'Pipette mat dem niddregsten Nominalvolumen an de klengsten Tipp fir de Loftkëssen esou kleng wéi méiglech ze halen. Wann Dir 1 µL pipettet, zB, wielt eng 0,25 - 2,5 µL Pipette a passenden Tipp anstatt eng 1 - 10 µL Pipette.
- Kalibratioun an Ënnerhalt: Et ass essentiell datt Är Pipette richteg kalibréiert an erhale sinn. Kleng Upassungen a gebrach Deeler op enger Pipette féieren zu enger massiver Erhéijung vun systematesch an zoufälleg Feeler Wäerter. Eng Kalibrierung no ISO 8655 muss eemol am Joer duerchgefouert ginn.
- Positiv Verdrängungspipetten: Kontrolléiert ob Dir eng positiv Verdrängungspipette mat engem nidderegen Volumenbereich an Ärem Labo hutt. Am Allgemengen féiert d'Benotzung vun dëser Zort Pipette zu engem bessere Pipetteresultat a punkto Genauegkeet a Präzisioun wéi mat klassesche Loftkëssenpipetten.
- Probéiert méi grouss Bänn ze benotzen: Dir kënnt iwwerleeën Är Probe ze verdënnen fir méi grouss Bänn mat der selwechter Quantitéit an der leschter Reaktioun ze pipetten. Dëst kann Pipettéierungsfehler mat ganz klenge Probevolumen reduzéieren.
Zousätzlech zu engem gudden Tool muss de Fuerscher eng ganz gutt Pipettetechnik hunn. Opgepasst besonnesch op déi folgend Schrëtt:
- Tipp Befestigung: Steng d'Pipette net op den Tipp, well dëst kann de feinen Tipp Enn beschiedegen, datt de Flëssegstrahl ëmgeleet gëtt oder d'Orizise beschiedegt. Gëlle just e liichten Drock wann Dir en Tipp befestegt a benotzt eng Pipette mat engem Fréijoersbelaaschtten Tippkegel.
- D'Pipette halen: Halt d'Pipette net an Ärer Hand wärend Dir op d'Zentrifuge waart, de Cycler, asw.. D'Innere vun der Pipette wäert ophëtzen an d'Loftkëssen erweideren, wat zu Ofwäichunge vum Set Volumen beim Pipette kënnt.
- Pre-Befeuchtung: D'Befeuchtung vun der Loft am Tipp a Pipette preparéiert den Tipp fir d'Probe a vermeit Verdampung beim Aspiréieren vum Transfervolumen.
- Vertikal Aspiratioun: Dëst ass ganz wichteg wann Dir mat klenge Bänn handelt fir de kapilläre Effekt ze vermeiden deen optrieden wann d'Pipette an engem Wénkel gehal gëtt.
- Immersiounsdéift: Taucht den Tipp sou wéineg wéi méiglech fir ze vermeiden datt Flëssegkeet an den Tipp erakënnt wéinst dem Kapillareffekt. Daumenregel: Wat méi kleng den Tipp a Volumen ass, wat méi niddereg ass d'Tauchtdéift. Mir recommandéieren e Maximum vun 2 mm wann Dir kleng Volumen pipettet.
- Verdeelung bei 45 ° Wénkel: Optimal Ausfluss vun der Flëssegkeet ass garantéiert wann d'Pipette an engem 45 ° Wénkel gehal gëtt.
- Kontakt op d'Gefässmauer oder d'Flëssegkeetsfläch: Kleng Volumen kënnen nëmme richteg ausgeliwwert ginn wann den Tipp géint d'Gefässmauer gehal gëtt, oder an d'Flëssegkeet taucht. Och de leschten Drëps vum Tipp kann präzis ausgedeelt ginn.
- Ausblosen: E Blow-Out ass obligatoresch no der Verdeelung vu klenge Volumen fir souguer dee leschte Tropfen Flëssegkeet, déi am Tipp präsent ass, auszeginn. D'Blow-out soll och géint d'Gefässmauer duerchgefouert ginn. Passt virsiichteg net Loftblasen an d'Probe ze bréngen wann Dir e Blow-out op der flësseger Uewerfläch maacht.
Post Zäit: 18. Februar 2021