Ийгиликтүү күчөтүү реакциялары үчүн ар бир препаратта жеке реакция компоненттери туура концентрацияда болушу зарыл. Мындан тышкары, булгануу пайда болбошу маанилүү.
Айрыкча, көптөгөн реакцияларды орнотуу керек болгондо, ар бир реагентти ар бир идишке өз-өзүнчө пикеттөөнүн ордуна мастер-микс деп аталганды даярдоо белгиленген. Алдын ала конфигурацияланган аралашмалар коммерциялык жактан жеткиликтүү, аларда үлгүгө тиешелүү компоненттер (праймер) жана суу гана кошулат. Же болбосо, мастер-микс өз алдынча даярдалышы мүмкүн. Эки вариантта тең аралашма ар бир ПЦР идишке шаблонсуз бөлүштүрүлөт жана ДНКнын жеке үлгүсү аягында өзүнчө кошулат.
Мастер аралашманы колдонуу бир нече артыкчылыктарга ээ: Биринчиден, бир пилоттук кадамдардын саны азаят. Ушундай жол менен пиптинг учурунда колдонуучунун каталарынын коркунучу да, булгануу коркунучу да минималдаштылат жана, албетте, убакыт үнөмдөлөт. Негизи пиптингдин тактыгы да жогору, анткени чоң көлөмдө дозаланышат. Пипеткалардын техникалык маалыматтарын текшерүүдө муну түшүнүү оңой: дозаланган көлөм канчалык аз болсо, четтөөлөр ошончолук жогору болушу мүмкүн. Бардык препараттардын бир идиштен чыгышы бир тектүүлүккө оң таасирин тийгизет (эгерде жакшы аралаштырылса). Бул ошондой эле эксперименттердин кайталанышын жакшыртат.
Мастер аралашманы даярдоодо эң аз дегенде 10% кошумча көлөм кошуу керек (мисалы, 10 препарат талап кылынса, 11дин негизинде эсептеңиз), акыркы идиш да туура толтурулат. Ушундай жол менен, (бир аз) питингдердин так эместиктери жана жуучу каражатты камтыган эритмелерди дозалоодо үлгү жоготуусунун кесепеттерин компенсациялоого болот. Жуучу каражаттар полимераздар жана мастер аралашмалар сыяктуу ферменттик эритмелерде камтылгандыктан, көбүктүн пайда болушуна жана нормалдуу ички бетинде калдыктардын пайда болушуна алып келет.пипетка учтары.
Колдонмого жана бериле турган суюктуктун түрүнө жараша туура пиптинг техникасын (1) жана тиешелүү жабдууларды тандоо керек. Кир жуугучтарды камтыган эритмелер үчүн аба жаздык пипеткаларына альтернатива катары түз жылыш системасы же “аз кармалуу” деп аталган пипетка учтары сунушталат. таасириACE PIPETTE учуөзгөчө гидрофобдук бетке негизделген. Курамында жуучу каражаттар бар суюктуктар ички жана сырткы бетинде калдык пленка калтырбайт, ошондуктан эритменин коромжу болушун азайтууга болот.
Бардык компоненттердин так дозалануусунан тышкары, препараттардын булгануусу болбошу да маанилүү. Жогорку тазалыктагы чыгымдалуучу материалдарды колдонуу жетишсиз, анткени аба жаздык пипеткасында пипеткалоо процесси пипетта калган аэрозолдорду пайда кылышы мүмкүн. Аэрозолдун курамында болушу мүмкүн болгон ДНК кийинки пиптинг кадамында бир үлгүдөн экинчи үлгүгө өткөрүлүп, булганууга алып келиши мүмкүн. Жогоруда айтылган түз жылытуу системалары да бул коркунучту азайтышы мүмкүн. Аба жаздык пипеткалары үчүн пипетка конусун чачыратууларды, аэрозолдорду жана биомолекулаларды сактап калуу үчүн чыпка учтарын колдонуу мааниси бар.
Посттун убактысы: 2022-жылдын 6-декабрына чейин