Dema Pipetkirina Tevliheviyên PCR-ê Divê Çi Bihesibînin?

Ji bo reaksiyonên amplifikasyonê yên serketî, pêdivî ye ku hêmanên reaksiyonê yên takekesî di her amadekariyê de bi hûrguliya rast hebin. Ji bilî vê, girîng e ku tu gemarî çênebe.

Nemaze dema ku pêdivî ye ku gelek reaksîyon bêne saz kirin, hate saz kirin ku li şûna ku her reagentek ji hev veqetandî di nav her keştiyekê de bipipekirina bi navê mîksek masterê were amadekirin. Miksên pêş-sazkirî ji hêla bazirganî ve têne peyda kirin, ku tê de tenê hêmanên nimûne-taybet (primer) û av têne zêdekirin. Wekî din, tevliheviya masterê dikare bi xwe were amadekirin. Di her du guhertoyan de, tevlihevî li her keştiyek PCR bêyî şablon tê belav kirin û nimûneya DNA ya kesane di dawiyê de ji hev cuda tê zêdekirin.

Bikaranîna mîksek masterê çend avantajên xwe hene: Yekem, hejmara gavên pipekirina yekane kêm dibe. Bi vî rengî, hem xetereya xeletiyên bikarhêner di dema pipetkirinê de û hem jî xetera gemarbûnê kêm dibe û, helbet, dem tê xilas kirin. Di prensîbê de, rastbûna pipetkirinê jî bilindtir e, ji ber ku cildên mezintir têne doz kirin. Dema ku daneyên teknîkî yên pipettan kontrol dikin ev hêsan tê fêm kirin: Çiqas hêjeya dozkirî piçûktir be, ew qas guheztin dikarin bibin. Rastiya ku hemî amadekarî ji heman keştiyê têne bandorek erênî li ser homojeniyê dike (heke baş were tevlihev kirin). Ev jî dubarekirina ceribandinan çêtir dike.

Di dema amadekirina mîksa sereke de, divê herî kêm %10 hêjmarek zêde were zêdekirin (mînak heke 10 amadekarî hewce ne, li ser bingeha 11-ê hesab bikin), da ku keştiya paşîn jî bi rêkûpêk tije bibe. Bi vî rengî, nerastiyên pipekirinê (sivik), û bandora windabûna nimûneyê dema ku dozkirina çareseriyên ku di nav deterjantê de ne dikare were telafî kirin. Paqijker di nav çareseriyên enzîmê yên wekî polîmeraz û mîksên sereke de hene, ku dibe sedema pêkhatina kef û bermayiyên li ser rûyê hundurîn ên normal.tips pipette.

Li gorî serîlêdanê û celebê şilava ku tê belavkirin, divê teknîka pipekirinê ya rast (1) were hilbijartin û alavên guncan were hilbijartin. Ji bo çareseriyên ku di nav deterjantan de hene, pergalek jicîhûwarkirina rasterast an jî tîpên pipetê yên ku jê re tê gotin "ragirtina kêm" wekî alternatîfek ji bo pîpetên pêfliya hewayê têne pêşniyar kirin. Bandora jiACE PIPETTE tipBi taybetî li ser rûberek hîdrofobîk tê damezrandin. Avên ku di nav deterjantan de hene, fîlimek bermayî li hundur û derve nahêlin, da ku windabûna çareseriyê kêm bibe.

Ji xeynî dozkirina rast a hemî pêkhateyan, di heman demê de girîng e ku pîsbûna amadekariyan çênebe. Ne bes e ku meriv malzemeyên paqijiya bilind bikar bîne, ji ber ku pêvajoya pîpkirinê ya di pîpetek hewayê de dikare aerosolên ku di pipetê de dimînin hilberîne. ADN-ya ku dibe ku di aerosolê de hebe, dikare di qonaxa piperkirinê ya jêrîn de ji nimûneyek bo nimûneyek din were veguheztin û bi vî rengî bibe sedema qirêjbûnê. Pergalên jicîhûwarkirina rasterast ên ku li jor hatine destnîşan kirin jî dikarin vê xetereyê kêm bikin. Ji bo pîpetên pêlava hewayê maqûl e ku meriv serişteyên parzûnê bikar bînin da ku konê pîpetê bi girtina rijandin, aerosol û biomolekulan biparêzin.


Dema şandinê: Dec-06-2022