휴대용 수동 피펫으로 소량을 피펫팅하는 방법

시약 및 비용 절감에 더 많은 초점이 맞춰짐에 따라 PCR 마스터믹스 또는 효소 반응 준비 등을 위한 더 적은 양의 수요가 높아졌습니다. 그러나 0.2 – 5 µL의 소량을 피펫팅하면 피펫팅 정확성과 정밀도에 대한 새로운 과제가 발생합니다. 다음 사항이 필수적입니다.

1. 피펫 및 팁 크기: 에어 쿠션을 최대한 작게 유지하려면 항상 공칭 용량이 가장 작고 팁이 가장 작은 피펫을 선택하십시오. 예를 들어 1 µL을 피펫팅하는 경우 1 – 10 µL 피펫보다는 0.25 – 2.5 µL 피펫과 그에 맞는 팁을 선택하십시오.
2. 교정 및 유지 관리: 피펫을 적절하게 교정하고 유지 관리하는 것이 중요합니다. 피펫의 작은 조정과 파손된 부품으로 인해 체계적이고 무작위적인 오류 값이 엄청나게 증가합니다. ISO 8655에 따른 교정은 1년에 한 번 수행해야 합니다.
3. 정변위 피펫: 실험실에 용량 범위가 낮은 정변위 피펫이 있는지 확인하세요. 일반적으로 이러한 유형의 피펫을 사용하면 기존 에어 쿠션 피펫을 사용하는 것보다 정확도와 정밀도 측면에서 더 나은 피펫팅 결과를 얻을 수 있습니다.
4. 더 큰 용량을 사용해 보십시오: 최종 반응에서 동일한 양으로 더 큰 용량을 피펫팅하기 위해 샘플을 희석하는 것을 고려할 수 있습니다. 이는 매우 적은 양의 샘플에서도 피펫팅 오류를 줄일 수 있습니다.

좋은 도구 외에도 연구자는 매우 좋은 피펫팅 기술을 가지고 있어야 합니다. 다음 단계에 특별한 주의를 기울이십시오.

1. 팁 부착: 피펫을 팁에 끼우지 마십시오. 미세한 팁 끝이 손상되어 액체 빔이 방향이 바뀌거나 오리피스가 손상될 수 있습니다. 팁을 부착할 때는 약간의 압력만 가하고 스프링이 장착된 팁 콘이 있는 피펫을 사용하십시오.
2. 피펫 쥐기: 원심분리기, 사이클러 등을 기다리는 동안 피펫을 손에 쥐지 마십시오. 피펫 내부가 뜨거워지고 에어쿠션이 팽창하여 피펫팅 시 설정된 용량에서 벗어나게 됩니다.
3. 사전 습윤: 팁과 피펫 내부 공기의 가습은 샘플용 팁을 준비하고 이동량을 흡입할 때 증발을 방지합니다.
4. 수직 흡인: 이는 피펫을 비스듬히 잡을 때 발생하는 모세관 효과를 피하기 위해 소량을 처리할 때 매우 중요합니다.
5. 담그는 깊이: 모세관 효과로 인해 액체가 팁에 들어가는 것을 방지하기 위해 팁을 가능한 한 적게 담그십시오. 경험 법칙: 팁과 부피가 작을수록 담금 깊이가 낮아집니다. 소량을 피펫팅할 때는 최대 2mm를 권장합니다.
6. 45° 각도로 분주: 피펫을 45° 각도로 고정하면 최적의 액체 흐름이 보장됩니다.
7. 용기 벽 또는 액체 표면에 접촉: 팁을 용기 ​​벽에 대고 있거나 액체에 담근 경우에만 소량이 적절하게 분배될 수 있습니다. 팁의 마지막 한 방울까지 정확하게 추출할 수 있습니다.
8. 블로우아웃: 팁에 있는 액체의 마지막 한 방울까지 분배하기 위해 소량을 분배한 후에는 블로우아웃이 필수입니다. 폭발은 용기 벽에 대해서도 수행되어야 합니다. 액체 표면에 블로우 아웃을 수행할 때 샘플에 기포가 들어가지 않도록 주의하십시오.