ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಪೈಪ್ ಮಾಡುವಾಗ ಏನು ಪರಿಗಣಿಸಬೇಕು?

ಯಶಸ್ವಿ ವರ್ಧನೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗಾಗಿ, ಪ್ರತಿ ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಸರಿಯಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ವೈಯಕ್ತಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶಗಳು ಇರುವುದು ಅವಶ್ಯಕ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಯಾವುದೇ ಮಾಲಿನ್ಯ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂಬುದು ಮುಖ್ಯ.

ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಅನೇಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಸಬೇಕಾದಾಗ, ಪ್ರತಿ ಕಾರಕವನ್ನು ಪ್ರತಿ ಹಡಗಿಗೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಪೈಪ್ ಮಾಡುವ ಬದಲು ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವದನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪೂರ್ವ-ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡಿದ ಮಿಶ್ರಣಗಳು ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಮಾದರಿ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಘಟಕಗಳು (ಪ್ರೈಮರ್) ಮತ್ತು ನೀರನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ, ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ನೀವೇ ತಯಾರಿಸಬಹುದು. ಎರಡೂ ರೂಪಾಂತರಗಳಲ್ಲಿ, ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಪ್ರತಿ ಪಿಸಿಆರ್ ಹಡಗಿಗೆ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಇಲ್ಲದೆ ವಿತರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವೈಯಕ್ತಿಕ ಡಿಎನ್‌ಎ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ ಹಲವಾರು ಪ್ರಯೋಜನಗಳಿವೆ: ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಏಕ ಪೈಪ್‌ಟಿಂಗ್ ಹಂತಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ, ಪೈಪ್‌ಟಿಂಗ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಳಕೆದಾರರ ದೋಷಗಳ ಅಪಾಯ ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಮಯವನ್ನು ಉಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಾತ್ವಿಕವಾಗಿ, ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಡೋಸ್ ಮಾಡಿದ ಕಾರಣ ಪೈಪಿಂಗ್ ನಿಖರತೆ ಸಹ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ. ಪೈಪೆಟ್‌ಗಳ ತಾಂತ್ರಿಕ ಡೇಟಾವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸುವಾಗ ಇದು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಸುಲಭ: ಡೋಸ್ಡ್ ಪರಿಮಾಣ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ವಿಚಲನಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗಬಹುದು. ಎಲ್ಲಾ ಸಿದ್ಧತೆಗಳು ಒಂದೇ ಹಡಗಿನಿಂದ ಬರುತ್ತವೆ ಎಂಬ ಅಂಶವು ಏಕರೂಪತೆಯ ಮೇಲೆ ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ (ಚೆನ್ನಾಗಿ ಬೆರೆಸಿದರೆ). ಇದು ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಸಹ ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ.

ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸುವಾಗ, ಕನಿಷ್ಠ 10 % ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಬೇಕು (ಉದಾ. 10 ಸಿದ್ಧತೆಗಳು ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ, 11 ರ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಿ), ಇದರಿಂದಾಗಿ ಕೊನೆಯ ಹಡಗು ಸಹ ಸರಿಯಾಗಿ ತುಂಬಿರುತ್ತದೆ. ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ, ಡಿಟರ್ಜೆಂಟ್-ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಡೋಸಿಂಗ್ ಮಾಡುವಾಗ (ಸ್ವಲ್ಪ) ಅಸಮರ್ಪಕಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ನಷ್ಟದ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸಬಹುದು. ಡಿಟರ್ಜೆಂಟ್‌ಗಳು ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳಂತಹ ಕಿಣ್ವದ ದ್ರಾವಣಗಳಲ್ಲಿವೆ, ಇದು ಫೋಮ್ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಆಂತರಿಕ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಅವಶೇಷಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆಪೈಪೆಟ್ ಸಲಹೆಗಳು.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಮತ್ತು ವಿತರಿಸಬೇಕಾದ ದ್ರವದ ಪ್ರಕಾರವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ, ಸರಿಯಾದ ಪೈಪಿಂಗ್ ತಂತ್ರವನ್ನು (1) ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ತವಾದ ಸಾಧನಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು. ಡಿಟರ್ಜೆಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪರಿಹಾರಗಳಿಗಾಗಿ, ನೇರ ಸ್ಥಳಾಂತರ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಅಥವಾ “ಕಡಿಮೆ ಧಾರಣ” ಪೈಪೆಟ್ ಸುಳಿವುಗಳನ್ನು ಏರ್-ಕುಶನ್ ಪೈಪೆಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಪರಿಣಾಮಏಸ್ ಪೈಪೆಟ್ ತುದಿನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ. ಡಿಟರ್ಜೆಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ದ್ರವಗಳು ಒಳಭಾಗ ಮತ್ತು ಹೊರಗೆ ಶೇಷ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ಬಿಡುವುದಿಲ್ಲ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಪರಿಹಾರದ ನಷ್ಟವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು.

ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳ ನಿಖರವಾದ ಡೋಸಿಂಗ್ ಜೊತೆಗೆ, ಸಿದ್ಧತೆಗಳ ಯಾವುದೇ ಮಾಲಿನ್ಯವು ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆಯ ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಗಾಳಿಯ ಕುಶನ್ ಪೈಪೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಪೈಪ್‌ಟಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಪೈಪೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ಏರೋಸಾಲ್‌ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. ಏರೋಸಾಲ್‌ನಲ್ಲಿರಬಹುದಾದ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಪೈಪ್‌ಟಿಂಗ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಒಂದು ಮಾದರಿಯಿಂದ ಇನ್ನೊಂದಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಇದರಿಂದಾಗಿ ಮಾಲಿನ್ಯಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಮೇಲೆ ತಿಳಿಸಲಾದ ನೇರ ಸ್ಥಳಾಂತರ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಈ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಏರ್-ಕುಶನ್ ಪೈಪೆಟ್‌ಗಳಿಗಾಗಿ ಸ್ಪ್ಲಾಶ್‌ಗಳು, ಏರೋಸಾಲ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ಅಣುಗಳನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಪೈಪೆಟ್ ಕೋನ್ ಅನ್ನು ರಕ್ಷಿಸಲು ಫಿಲ್ಟರ್ ಸಲಹೆಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಅರ್ಥಪೂರ್ಣವಾಗಿದೆ.