ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಅವುಗಳ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಸ್ಥಾಪನೆ ಮತ್ತು ಸಮನ್ವಯತೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಬಳಕೆದಾರರಿಂದ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಖಾತ್ರಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಜೊತೆಗೆ ಅವುಗಳ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
(ಕ್ಲಾಸಿಕ್) PCR ನ ಗುರಿಯು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದ ಫಲಿತಾಂಶದ ಪೀಳಿಗೆಯಾಗಿದೆ. ಕೆಲವು ಅನ್ವಯಗಳಿಗೆ, ಇಳುವರಿಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಸಹ ಪ್ರಸ್ತುತವಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ, ಮಾದರಿಗಳು ರಾಜಿಯಾಗದಂತೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಕ್‌ಫ್ಲೋ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾಳಜಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಇದು ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ತಪ್ಪು ಋಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಅಥವಾ PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಮಾಲಿನ್ಯಗಳ ಪರಿಚಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ಮಾದರಿಯ ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ಒಂದು ರನ್‌ನೊಳಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಒಂದೇ ಆಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ನಂತರದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ (ಅದೇ ವಿಧಾನದ) ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದು. ಇದು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸಂಯೋಜನೆ ಮತ್ತು ಸೈಕ್ಲರ್‌ನಲ್ಲಿನ ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಪ್ರಕಾರವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಬಳಕೆದಾರರ ದೋಷಗಳು, ಸಹಜವಾಗಿ, ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ತಪ್ಪಿಸಬೇಕು.
ಕೆಳಗೆ, ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು PCR ರನ್‌ನ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಎದುರಾಗುವ ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ನಾವು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತೇವೆ - ಮತ್ತು PCR ವರ್ಕ್‌ಫ್ಲೋಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸುವ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಉಪಭೋಗ್ಯಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಪರಿಹಾರಗಳ ವಿಧಾನಗಳು.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ತಯಾರಿ
ಕ್ರಮವಾಗಿ ಪಿಸಿಆರ್-ನಾಳಗಳು ಅಥವಾ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಘಟಕಗಳನ್ನು ವಿತರಿಸುವುದು ಬಹು ಸವಾಲುಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಅದನ್ನು ಜಯಿಸಬೇಕು:
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಟ್ಟುಕೊಂಡು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಘಟಕಗಳ ನಿಖರವಾದ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾದ ಡೋಸಿಂಗ್ ಅನಿವಾರ್ಯವಾಗಿದೆ. ಉತ್ತಮ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ತಂತ್ರದ ಜೊತೆಗೆ, ಸರಿಯಾದ ಸಾಧನವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ. PCR ಮಾಸ್ಟರ್-ಮಿಶ್ರಣಗಳು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಸ್ನಿಗ್ಧತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಅಥವಾ ಫೋಮ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಪೈಪ್ಟಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಇವುಗಳು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ತೇವಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆಪೈಪೆಟ್ ಸಲಹೆಗಳು, ಹೀಗೆ ಪೈಪ್ಟಿಂಗ್ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ನೇರ ವಿತರಣಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಅಥವಾ ಪರ್ಯಾಯ ಪೈಪೆಟ್ ಟಿಪ್ಸ್ ಬಳಕೆ ಕಡಿಮೆ ಒದ್ದೆಯಾಗುವುದರಿಂದ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು.
ಮಾಲಿನ್ಯಗಳು
ವಿತರಿಸುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಏರೋಸಾಲ್‌ಗಳು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತವೆ, ಇದು ಪೈಪೆಟ್‌ನ ಒಳಭಾಗವನ್ನು ತಲುಪಲು ಅನುಮತಿಸಿದರೆ, ಮುಂದಿನ ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಮತ್ತೊಂದು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಕಲುಷಿತಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಫಿಲ್ಟರ್ ಸಲಹೆಗಳು ಅಥವಾ ನೇರ ಸ್ಥಳಾಂತರ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಇದನ್ನು ತಡೆಯಬಹುದು.
ಮುಂತಾದ ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳುಸಲಹೆಗಳು, PCR ವರ್ಕ್‌ಫ್ಲೋನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಪಾತ್ರೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಮಾದರಿಯನ್ನು ರಾಜಿ ಮಾಡುವ ಅಥವಾ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ತಪ್ಪಾಗಿಸುವಂತಹ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಾರದು. ಇವುಗಳಲ್ಲಿ DNA, DNases, RNases ಮತ್ತು PCR ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳು, ಹಾಗೆಯೇ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವಸ್ತುವಿನಿಂದ ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಸೋರಿಕೆಯಾಗುವ ಘಟಕಗಳು ಸೇರಿವೆ - ಲೀಚಬಲ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ವಸ್ತುಗಳು.
ಬಳಕೆದಾರರ ದೋಷ
ಹೆಚ್ಚು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ದೋಷದ ಅಪಾಯವಿದೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ತಪ್ಪಾದ ಹಡಗಿಗೆ ಅಥವಾ ತಪ್ಪಾದ ಬಾವಿಗೆ ಹಾಕುವುದು ಸುಲಭವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸಬಹುದು. ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ಗುರುತಿಸುವ ಮೂಲಕ ಈ ಅಪಾಯವನ್ನು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ವಿತರಿಸುವ ಹಂತಗಳ ಯಾಂತ್ರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ, "ಮಾನವ ಅಂಶ", ಅಂದರೆ, ದೋಷಗಳು ಮತ್ತು ಬಳಕೆದಾರ-ಸಂಬಂಧಿತ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸಣ್ಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಮಾಣಗಳ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ. ಇದಕ್ಕೆ ಕಾರ್ಯಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಸಾಕಷ್ಟು ಆಯಾಮದ ಸ್ಥಿರತೆಯ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ ಬಾರ್‌ಕೋಡ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಯಂತ್ರ-ಓದಬಲ್ಲತೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಮಾದರಿ ಟ್ರ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಥರ್ಮೋಸೈಕ್ಲರ್ನ ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್
ಉಪಕರಣವನ್ನು ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್ ಮಾಡುವುದು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ದೋಷ ಪೀಡಿತವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಬಹುದು. ವಿಭಿನ್ನ ಪಿಸಿಆರ್ ಥರ್ಮಲ್ ಸೈಕ್ಲರ್ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಹಂತವನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಅದನ್ನು ಸುರಕ್ಷಿತವಾಗಿಸಲು ಒಟ್ಟಿಗೆ ಕೆಲಸ ಮಾಡುತ್ತವೆ:
ಸುಲಭವಾದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ಬಳಕೆದಾರ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನವು ಸಮರ್ಥ ಪ್ರೋಗ್ರಾಮಿಂಗ್‌ನ ಆಧಾರವಾಗಿದೆ. ಈ ಅಡಿಪಾಯದ ಮೇಲೆ ನಿರ್ಮಿಸುವುದು, ಪಾಸ್‌ವರ್ಡ್-ರಕ್ಷಿತ ಬಳಕೆದಾರ ಆಡಳಿತವು ಒಬ್ಬರ ಸ್ವಂತ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂಗಳನ್ನು ಇತರ ಬಳಕೆದಾರರಿಂದ ಬದಲಾಯಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಬಹು ಸೈಕ್ಲರ್‌ಗಳು (ಒಂದೇ ಪ್ರಕಾರದ) ಬಳಕೆಯಲ್ಲಿದ್ದರೆ, ಯುಎಸ್‌ಬಿ ಅಥವಾ ಸಂಪರ್ಕದ ಮೂಲಕ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಒಂದು ಉಪಕರಣದಿಂದ ಇನ್ನೊಂದಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿದರೆ ಅದು ಪ್ರಯೋಜನಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಕಂಪ್ಯೂಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂಗಳು, ಬಳಕೆದಾರರ ಹಕ್ಕುಗಳು ಮತ್ತು ದಾಖಲೆಗಳ ಕೇಂದ್ರ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷಿತ ಆಡಳಿತವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಪಿಸಿಆರ್ ರನ್
ಚಾಲನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ, ಸ್ಥಿರವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಿಗೆ ಒಳಪಡಿಸಬೇಕಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿ DNA ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ ಈ ಕೆಳಗಿನ ಅಂಶಗಳು ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ:
ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣ
ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ಸೈಕ್ಲರ್ ಬ್ಲಾಕ್‌ನ ಏಕರೂಪತೆಯು ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳ ಸಹ ತಾಪಮಾನದ ಕಂಡೀಷನಿಂಗ್‌ಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿದೆ. ತಾಪನ ಮತ್ತು ತಂಪಾಗಿಸುವ ಅಂಶಗಳ ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟ (ಪೆಲ್ಟಿಯರ್ ಅಂಶಗಳು), ಹಾಗೆಯೇ ಇವುಗಳನ್ನು ಬ್ಲಾಕ್‌ಗೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸುವ ವಿಧಾನ, "ಎಡ್ಜ್ ಎಫೆಕ್ಟ್" ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ತಾಪಮಾನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳ ಅಪಾಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಅಂಶಗಳಾಗಿವೆ.
ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆ
ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆಯಿಂದಾಗಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಘಟಕಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಬದಲಾಗಬಾರದು. ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಇದು ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಸಾಧ್ಯಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು, ಅಥವಾ ಯಾವುದೂ ಇಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ ಸುರಕ್ಷಿತ ಮುದ್ರೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುವ ಮೂಲಕ ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು ಬಹಳ ಮುಖ್ಯ. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಥರ್ಮೋಸೈಕ್ಲರ್ನ ಬಿಸಿಯಾದ ಮುಚ್ಚಳ ಮತ್ತು ಹಡಗಿನ ಮುದ್ರೆಯು ಕೈಯಲ್ಲಿ ಕೆಲಸ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ವಿವಿಧ ಸೀಲಿಂಗ್ ಆಯ್ಕೆಗಳು ಲಭ್ಯವಿದೆಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು (ಲಿಂಕ್: ಸೀಲಿಂಗ್ ಲೇಖನ), ಶಾಖ ಸೀಲಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಉತ್ತಮ ಮುದ್ರೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸೈಕ್ಲರ್ ಮುಚ್ಚಳದ ಸಂಪರ್ಕದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಆಯ್ದ ಸೀಲ್‌ಗೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸುವವರೆಗೆ ಇತರ ಮುಚ್ಚುವಿಕೆಗಳು ಸಹ ಸೂಕ್ತವಾಗಬಹುದು.
ದೀರ್ಘಾವಧಿಯಲ್ಲಿ ನಿಖರವಾದ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಕಾಪಾಡುವ ಸಲುವಾಗಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಜಾರಿಯಲ್ಲಿದೆ. ಇದು ಯಾವಾಗಲೂ ಉತ್ತಮ ಕೆಲಸದ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಲಕರಣೆಗಳ ನಿಯಮಿತ ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ಎಲ್ಲಾ ಸ್ಥಳಗಳಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಲಭ್ಯತೆಯನ್ನು ಖಾತರಿಪಡಿಸಬೇಕು.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ನವೆಂಬರ್-29-2022