សម្រាប់ប្រតិកម្ម amplification ជោគជ័យ វាចាំបាច់ដែលសមាសធាតុប្រតិកម្មបុគ្គលមានវត្តមាននៅក្នុងការប្រមូលផ្តុំត្រឹមត្រូវក្នុងការរៀបចំនីមួយៗ។ លើសពីនេះទៀតវាជាការសំខាន់ណាស់ដែលមិនមានការចម្លងរោគកើតឡើង។
ជាពិសេសនៅពេលដែលប្រតិកម្មជាច្រើនត្រូវរៀបចំ វាត្រូវបានបង្កើតឡើងដើម្បីរៀបចំអ្វីដែលគេហៅថា ល្បាយមេ ជំនួសឱ្យការបង្ហូរសារធាតុប្រតិកម្មនីមួយៗដាច់ដោយឡែកទៅក្នុងធុងនីមួយៗ។ ល្បាយដែលបានកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធជាមុនគឺអាចរកបានសម្រាប់ពាណិជ្ជកម្មដែលក្នុងនោះមានតែសមាសធាតុគំរូជាក់លាក់ (primer) និងទឹកប៉ុណ្ណោះដែលត្រូវបានបន្ថែម។ ម៉្យាងទៀត ល្បាយមេអាចត្រូវបានរៀបចំដោយខ្លួនឯង។ នៅក្នុងវ៉ារ្យ៉ង់ទាំងពីរ ល្បាយនេះត្រូវបានចែកចាយទៅកាន់នាវា PCR នីមួយៗដោយគ្មានគំរូ ហើយគំរូ DNA នីមួយៗត្រូវបានបន្ថែមដោយឡែកពីគ្នានៅចុងបញ្ចប់។
ការប្រើល្បាយមេមានគុណសម្បត្តិជាច្រើន៖ ទីមួយចំនួននៃជំហានបំពង់តែមួយត្រូវបានកាត់បន្ថយ។ នៅក្នុងវិធីនេះ ទាំងហានិភ័យនៃកំហុសរបស់អ្នកប្រើប្រាស់កំឡុងពេលដាក់បំពង់ និងហានិភ័យនៃការចម្លងរោគត្រូវបានបង្រួមអប្បបរមា ហើយជាការពិតណាស់ពេលវេលាត្រូវបានរក្សាទុក។ ជាគោលការណ៍ ភាពត្រឹមត្រូវនៃការដាក់បំពង់ក៏ខ្ពស់ជាងដែរ ដោយសារបរិមាណធំជាងត្រូវបានចាក់។ នេះងាយយល់នៅពេលពិនិត្យទិន្នន័យបច្ចេកទេសនៃបំពង់បង្ហូរ៖ ទំហំតូចជាងបរិមាណថ្នាំ គម្លាតអាចកាន់តែខ្ពស់។ ការពិតដែលថាការត្រៀមលក្ខណៈទាំងអស់បានមកពីនាវាតែមួយមានឥទ្ធិពលវិជ្ជមានទៅលើភាពដូចគ្នា (ប្រសិនបើលាយល្អ) ។ នេះក៏ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវលទ្ធភាពផលិតឡើងវិញនៃការពិសោធន៍ផងដែរ។
នៅពេលរៀបចំល្បាយមេ បរិមាណបន្ថែមយ៉ាងហោចណាស់ 10% គួរតែត្រូវបានបន្ថែម (ឧទាហរណ៍ប្រសិនបើការត្រៀមលក្ខណៈ 10 ត្រូវបានទាមទារ គណនាលើមូលដ្ឋាននៃ 11) ដូច្នេះសូម្បីតែធុងចុងក្រោយត្រូវបានបំពេញឱ្យបានត្រឹមត្រូវ។ តាមវិធីនេះ ភាពមិនត្រឹមត្រូវនៃការដាក់បំពង់ (បន្តិចបន្តួច) និងឥទ្ធិពលនៃការបាត់បង់គំរូនៅពេលចាក់ដំណោះស្រាយដែលមានសារធាតុសាប៊ូអាចត្រូវបានផ្តល់សំណង។ សារធាតុសាប៊ូមានផ្ទុកនៅក្នុងដំណោះស្រាយអង់ស៊ីមដូចជាប៉ូលីមេរ៉ាស និងល្បាយមេ ដែលបណ្តាលឱ្យមានការបង្កើតពពុះ និងសំណល់នៅលើផ្ទៃខាងក្នុងធម្មតាគន្លឹះ pipette.
អាស្រ័យលើកម្មវិធី និងប្រភេទរាវដែលត្រូវចែកចាយ បច្ចេកទេសបំពង់ត្រឹមត្រូវ (1) គួរតែត្រូវបានជ្រើសរើស និងឧបករណ៍ដែលសមស្របត្រូវបានជ្រើសរើស។ សម្រាប់ដំណោះស្រាយដែលមានសារធាតុ detergents ប្រព័ន្ធផ្លាស់ប្តូរដោយផ្ទាល់ ឬហៅថា "low retention" pipette tips ជាជម្រើសសម្រាប់បំពង់ខ្យល់ខ្នើយត្រូវបានណែនាំ។ ឥទ្ធិពលនៃព័ត៌មានជំនួយ ACE PIPETTEត្រូវបានផ្អែកលើផ្ទៃ hydrophobic ពិសេស។ សារធាតុរាវដែលមានសារធាតុ detergents មិនបន្សល់ទុកនូវខ្សែភាពយន្តដែលនៅសេសសល់ទាំងខាងក្នុង និងខាងក្រៅ ដូច្នេះការបាត់បង់ដំណោះស្រាយអាចត្រូវបានបង្រួមអប្បបរមា។
ក្រៅពីកម្រិតថ្នាំពិតប្រាកដនៃសមាសធាតុទាំងអស់ វាក៏សំខាន់ផងដែរ ដែលមិនមានការចម្លងរោគនៃការត្រៀមលក្ខណៈកើតឡើង។ វាមិនគ្រប់គ្រាន់ទេក្នុងការប្រើសម្ភារៈប្រើប្រាស់ដែលមានភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ ពីព្រោះដំណើរការដាក់បំពង់ក្នុងបំពង់ខ្យល់អាចបង្កើតសារធាតុ aerosols ដែលនៅសេសសល់ក្នុងបំពង់។ DNA ដែលអាចមាននៅក្នុង aerosol អាចត្រូវបានផ្ទេរពីគំរូមួយទៅមួយបន្ទាប់ទៀតក្នុងជំហាននៃការដាក់បំពង់ខាងក្រោម ហើយដូច្នេះនាំទៅរកការចម្លងរោគ។ ប្រព័ន្ធផ្លាស់ទីលំនៅដោយផ្ទាល់ដែលបានរៀបរាប់ខាងលើក៏អាចកាត់បន្ថយហានិភ័យនេះផងដែរ។ សម្រាប់បំពង់ខ្នើយខ្យល់ វាសមហេតុផលក្នុងការប្រើគន្លឹះតម្រងដើម្បីការពារកោណ pipette ដោយរក្សាការបែកទឹក អេរ៉ូសូល និងជីវម៉ូលេគុល។
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី០៦ ខែធ្នូ ឆ្នាំ២០២២