គ្រីស្តាល់ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការផ្ទុកសារធាតុ cryogenic នៃខ្សែកោសិកា និងសម្ភារៈជីវសាស្ត្រសំខាន់ៗផ្សេងទៀត នៅក្នុងទឹកដែលពោរពេញទៅដោយអាសូតរាវ។

មានដំណាក់កាលជាច្រើនដែលពាក់ព័ន្ធនឹងការរក្សាទុកកោសិកាដោយជោគជ័យនៅក្នុងអាសូតរាវ។ ខណៈពេលដែលគោលការណ៍ជាមូលដ្ឋានគឺការបង្កកយឺត បច្ចេកទេសពិតប្រាកដដែលប្រើប្រាស់គឺអាស្រ័យលើប្រភេទកោសិកា និងសារធាតុការពារគ្រីស្តាល់ដែលបានប្រើ។ មានការពិចារណាអំពីសុវត្ថិភាពជាច្រើន និងការអនុវត្តល្អបំផុតដែលត្រូវយកមកពិចារណានៅពេលរក្សាទុកកោសិកានៅសីតុណ្ហភាពទាបបែបនេះ។

ការបង្ហោះនេះមានគោលបំណងផ្តល់នូវទិដ្ឋភាពទូទៅអំពីរបៀបដែល cryovials ត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងអាសូតរាវ។

តើអ្វីទៅជា Cryovials

Cryovials គឺជាដបតូចដែលមានមួកដែលត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់រក្សាទុកសំណាករាវនៅសីតុណ្ហភាពទាបបំផុត។ ពួកគេធានាថាកោសិកាដែលរក្សាទុកក្នុងសារធាតុ cryoprotectant មិនទាក់ទងដោយផ្ទាល់ជាមួយអាសូតរាវ កាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការបាក់ឆ្អឹងកោសិកា ខណៈនៅតែទទួលបានអត្ថប្រយោជន៍ពីឥទ្ធិពលត្រជាក់ខ្លាំងនៃអាសូតរាវ។

ជាធម្មតា ដបកែវមាននៅក្នុងទំហំ និងការរចនាជាច្រើនប្រភេទ - ពួកវាអាចភ្ជាប់ខាងក្នុង ឬខាងក្រៅជាមួយនឹងបាតរាបស្មើ ឬរាងមូល។ ទម្រង់មិនក្រៀវ និងមិនក្រៀវក៏មានផងដែរ។

អ្នកណាប្រើស៊ីរ៉ូវៀល។ដើម្បីទុកកោសិកាក្នុងអាសូតរាវ

ជួរនៃ NHS និងមន្ទីរពិសោធន៍ឯកជន ក៏ដូចជាស្ថាប័នស្រាវជ្រាវដែលមានឯកទេសខាងធនាគារឈាមទងផ្ចិត ជីវវិទ្យាកោសិកា epithelial ភាពស៊ាំ និងជីវវិទ្យាកោសិកាដើមប្រើ cryovials ដើម្បីរក្សាទុកកោសិកា។

កោសិកាដែលត្រូវបានរក្សាទុកតាមរបៀបនេះរួមមាន B និង T Cells កោសិកា CHO កោសិកាដើម Hematopoietic និងកោសិកា Progenitor កោសិកាកូនកាត់ កោសិកាពោះវៀន Macrophages ដើម Mesenchymal និងកោសិកា Progenitor Monocytes Myeloma កោសិកា NK និងកោសិកាដើម Pluripotent ។

ទិដ្ឋភាពទូទៅនៃរបៀបរក្សាទុក Cryovials ក្នុងអាសូតរាវ

Cryopreservation គឺជាដំណើរការដែលរក្សាកោសិកា និងរចនាសម្ព័ន្ធជីវសាស្រ្តផ្សេងទៀត ដោយធ្វើឱ្យពួកវាត្រជាក់ដល់សីតុណ្ហភាពទាបបំផុត។ កោសិកាអាចត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងអាសូតរាវអស់រយៈពេលជាច្រើនឆ្នាំដោយមិនបាត់បង់លទ្ធភាពនៃកោសិកា។ នេះ​ជា​ទិដ្ឋភាព​នៃ​នីតិវិធី​ដែល​បាន​ប្រើ។

ការរៀបចំកោសិកា

វិធីសាស្រ្តពិតប្រាកដសម្រាប់ការរៀបចំគំរូនឹងប្រែប្រួលអាស្រ័យលើប្រភេទកោសិកា ប៉ុន្តែជាទូទៅ កោសិកាត្រូវបានប្រមូល និងផ្ចិតផ្ចង់ដើម្បីបង្កើតកោសិកាដែលសំបូរទៅដោយកោសិកា។ គ្រាប់នេះត្រូវបានផ្អាកឡើងវិញនៅក្នុង supernatant លាយជាមួយ cryoprotectant ឬឧបករណ៍ផ្ទុក cryopreservation ។

កម្រិតមធ្យមនៃការរក្សាទុកគ្រីប

ឧបករណ៍ផ្ទុកនេះត្រូវបានប្រើប្រាស់ដើម្បីរក្សាកោសិកានៅក្នុងបរិយាកាសសីតុណ្ហភាពទាប ដែលពួកវានឹងត្រូវទទួលរងដោយការរារាំងការបង្កើតគ្រីស្តាល់ខាងក្នុង និងក្រៅកោសិកា ហើយហេតុដូច្នេះហើយការស្លាប់កោសិកា។ តួនាទីរបស់ពួកគេគឺផ្តល់បរិយាកាសការពារ និងសុវត្ថិភាពសម្រាប់កោសិកា និងជាលិកាក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការត្រជាក់ ការផ្ទុក និងរលាយ។

ឧបករណ៍ផ្ទុកដូចជាប្លាស្មាទឹកកកស្រស់ (FFP) ដំណោះស្រាយប្លាស្មាលីត heparinised ឬដំណោះស្រាយគ្មានសមាសធាតុសត្វគ្មានសេរ៉ូមត្រូវបានលាយជាមួយនឹងសារធាតុការពារដូចជា dimethyl sulphoxide (DMSO) ឬ glycerol ។

គ្រាប់សំណាកគំរូដែលរាវឡើងវិញត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរទៅជាសារធាតុ polypropylene cryovials ដូចជាក្រុមហ៊ុន Suzhou Ace Biomedical Vials Cryogenic Storage Vials.

វាជាការសំខាន់ណាស់ដែលមិនត្រូវបំពេញសារធាតុ cryovials ច្រើនពេកទេព្រោះវានឹងបង្កើនហានិភ័យនៃការបង្ក្រាប និងការចេញផ្សាយមាតិកាដែលអាចកើតមាន (1) ។

គ្រប់គ្រងអត្រាបង្កក

ជាទូទៅ អត្រាបង្កកដែលបានគ្រប់គ្រងយឺតគឺត្រូវបានប្រើប្រាស់សម្រាប់ការរក្សាទុកកោសិកាដោយជោគជ័យ។

បន្ទាប់ពីសំណាកសំណាកត្រូវបានបញ្ចោញចូលទៅក្នុងដបទឹកត្រជាក់ ពួកវាត្រូវបានដាក់នៅលើទឹកកកសើម ឬក្នុងទូទឹកកក 4 ℃ ហើយនីតិវិធីបង្កកត្រូវបានចាប់ផ្តើមក្នុងរយៈពេល 5 នាទី។ តាមការណែនាំទូទៅ កោសិកាត្រូវបានធ្វើឱ្យត្រជាក់ក្នុងអត្រាពី -1 ទៅ -3 ក្នុងមួយនាទី (2)។ នេះត្រូវបានសម្រេចដោយប្រើម៉ាស៊ីនត្រជាក់ដែលអាចសរសេរកម្មវិធីបាន ឬដោយការដាក់ដបនៅក្នុងប្រអប់ដែលមានអ៊ីសូឡង់ដែលដាក់ក្នុងម៉ាស៊ីនបង្កកដែលមានអត្រា -70°C ទៅ -90°C។

ផ្ទេរទៅអាសូតរាវ

បន្ទាប់​មក ដប​ទឹក​ត្រជាក់​ដែល​បង្កក​ត្រូវ​បាន​ផ្ទេរ​ទៅ​ធុង​អាសូត​រាវ​ក្នុង​រយៈពេល​មិន​កំណត់​ដែល​បាន​រក្សា​សីតុណ្ហភាព​ក្រោម -135 ℃។

សីតុណ្ហភាពទាបបំផុតទាំងនេះអាចទទួលបានដោយការជ្រមុជនៅក្នុងអាសូតដំណាក់កាលរាវ ឬចំហាយ។

ដំណាក់កាលរាវ ឬចំហាយ?

ការផ្ទុកនៅក្នុងអាសូតដំណាក់កាលរាវត្រូវបានគេស្គាល់ថាដើម្បីរក្សាសីតុណ្ហភាពត្រជាក់ជាមួយនឹងភាពស្ថិតស្ថេរដាច់ខាត ប៉ុន្តែជារឿយៗមិនត្រូវបានណែនាំសម្រាប់ហេតុផលដូចខាងក្រោមៈ

• តម្រូវការសម្រាប់បរិមាណដ៏ធំ (ជម្រៅ) នៃអាសូតរាវ ដែលជាគ្រោះថ្នាក់ដែលអាចកើតមាន។ រលាក ឬថប់ដង្ហើម ដោយសារនេះជាហានិភ័យពិតប្រាកដ។
• ករណីឯកសារនៃការចម្លងរោគដោយភ្នាក់ងារបង្ករោគដូចជា aspergillus, hep B និងការរីករាលដាលមេរោគតាមរយៈឧបករណ៍ផ្ទុកអាសូតរាវ (2,3)
• សក្តានុពលសម្រាប់អាសូតរាវដើម្បីលេចធ្លាយចូលទៅក្នុងដបកំឡុងពេលជ្រមុជ។ នៅពេល​យក​ចេញពី​កន្លែង​ផ្ទុក ហើយ​ឡើង​កំដៅ​ដល់​សីតុណ្ហភាព​បន្ទប់ អាសូត​នឹង​ពង្រីក​យ៉ាង​ឆាប់រហ័ស​។ ហេតុដូច្នេះ ដបអាចរុះរើនៅពេលដកចេញពីកន្លែងផ្ទុកអាសូតរាវ បង្កើតគ្រោះថ្នាក់ពីទាំងកំទេចកំទីហោះ និងការប៉ះពាល់នឹងមាតិកា (1, 4)។

សម្រាប់ហេតុផលទាំងនេះ ការផ្ទុកសីតុណ្ហភាពទាបបំផុតគឺជារឿងធម្មតាបំផុតនៅក្នុងអាសូតដំណាក់កាលចំហាយ។ នៅពេលដែលសំណាកត្រូវតែត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងដំណាក់កាលរាវ បំពង់ cryoflex ឯកទេសគួរតែត្រូវបានប្រើ។

ការធ្លាក់ចុះនៃដំណាក់កាលចំហាយគឺថាជម្រាលសីតុណ្ហភាពបញ្ឈរអាចកើតឡើងដែលបណ្តាលឱ្យមានការប្រែប្រួលសីតុណ្ហភាពរវាង -135 ℃ទៅ -190 ℃។ នេះតម្រូវឱ្យមានការត្រួតពិនិត្យដោយប្រុងប្រយ័ត្ន និងឧស្សាហ៍ព្យាយាមនៃកម្រិតអាសូតរាវ និងការប្រែប្រួលសីតុណ្ហភាព (5)។

ក្រុមហ៊ុនផលិតជាច្រើនបានផ្តល់អនុសាសន៍ថា cryovials គឺសមរម្យសម្រាប់ការរក្សាទុករហូតដល់ -135 ℃ ឬសម្រាប់ប្រើក្នុងដំណាក់កាលចំហាយតែប៉ុណ្ណោះ។

រលាយកោសិកាដែលរក្សាទុកដោយគ្រីបតូ

នីតិវិធីនៃការរលាយគឺមានភាពតានតឹងសម្រាប់វប្បធម៌ដែលកក ហើយការដោះស្រាយ និងបច្ចេកទេសត្រឹមត្រូវគឺត្រូវបានទាមទារ ដើម្បីធានាបាននូវលទ្ធភាពល្អបំផុត ការស្តារឡើងវិញ និងមុខងារនៃកោសិកា។ ពិធីការរលាយពិតប្រាកដនឹងអាស្រ័យលើប្រភេទក្រឡាជាក់លាក់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការរលាយឆាប់រហ័សត្រូវបានចាត់ទុកថាជាស្តង់ដារសម្រាប់៖

• កាត់បន្ថយផលប៉ះពាល់លើការស្តារកោសិកាឡើងវិញ
• ជួយកាត់បន្ថយពេលវេលានៃការប៉ះពាល់ទៅនឹងសារធាតុរំលាយដែលមាននៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយដែលបង្កក
• កាត់បន្ថយការខូចខាតណាមួយដោយការបង្កើតឡើងវិញនូវទឹកកក

អាងងូតទឹក អាងងូតទឹកអង្កាំ ឬឧបករណ៍ស្វ័យប្រវត្តិពិសេស ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅដើម្បីរលាយសំណាក។

ជាញឹកញាប់បំផុត 1-2 នាទី ខ្សែកោសិកាត្រូវរលាយក្នុងទឹក 1-2 នាទីដោយបង្វិលថ្នមៗក្នុងអាងទឹក 37 ℃ រហូតទាល់តែមានទឹកកកនៅសល់ក្នុងដបតូច មុននឹងពួកគេត្រូវលាងសម្អាតក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកលូតលាស់ជាមុន។

សម្រាប់កោសិកាមួយចំនួនដូចជា អំប្រ៊ីយ៉ុងថនិកសត្វ ការឡើងកំដៅយឺតគឺចាំបាច់សម្រាប់ការរស់រានមានជីវិតរបស់ពួកគេ។

ឥឡូវនេះកោសិកាបានត្រៀមខ្លួនរួចជាស្រេចសម្រាប់ការបណ្តុះកោសិកា ការបំបែកកោសិកា ឬនៅក្នុងករណីនៃកោសិកាដើម heematopoietic - ការសិក្សាលទ្ធភាពជោគជ័យដើម្បីធានានូវភាពសុចរិតនៃកោសិកាដើមរបស់ម្ចាស់ជំនួយ មុនពេលការព្យាបាលដោយ myeloablative ។

វាគឺជាការអនុវត្តធម្មតាក្នុងការយក aliquots តូចៗនៃសំណាកដែលបានលាងសម្អាតជាមុន ដែលប្រើដើម្បីធ្វើការរាប់កោសិកា ដើម្បីកំណត់កំហាប់កោសិកាសម្រាប់ការដាក់ចាននៅក្នុងវប្បធម៌។ បន្ទាប់មក អ្នកអាចវាយតម្លៃលទ្ធផលនៃនីតិវិធីបំបែកកោសិកា និងកំណត់លទ្ធភាពជោគជ័យរបស់កោសិកា។

ការអនុវត្តល្អបំផុតសម្រាប់ការផ្ទុក Cryovials

ការរក្សាទុកសំណាកដោយជោគជ័យនៃសំណាកដែលរក្សាទុកក្នុង cryovials អាស្រ័យលើធាតុជាច្រើននៅក្នុងពិធីការ រួមទាំងការផ្ទុកត្រឹមត្រូវ និងការរក្សាកំណត់ត្រា។

• បំបែកក្រឡារវាងទីតាំងផ្ទុក- ប្រសិនបើបរិមាណអនុញ្ញាត បំបែកកោសិការវាង vials និងរក្សាទុកពួកវានៅក្នុងទីតាំងដាច់ដោយឡែក ដើម្បីកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការបាត់បង់គំរូដោយសារតែការបរាជ័យឧបករណ៍។
• ការពារការចម្លងរោគ– ជ្រើសរើស​ប្រើ​តែ​មួយ​ដប​ដែល​គ្មាន​មេរោគ cryogenic ឬ autoclave មុន​នឹង​ប្រើ​ជា​បន្តបន្ទាប់
• ប្រើដបដែលមានទំហំសមស្របសម្រាប់កោសិការបស់អ្នក។- ដបមានបរិមាណពី 1 ទៅ 5mls ។ ជៀសវាងការបំពេញដបច្រើនពេក ដើម្បីកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការប្រេះ។
• ជ្រើសរើសដបកែវគ្រីស្តាល់ដែលមានខ្សែស្រឡាយខាងក្នុង ឬខាងក្រៅ- ដបដែលមានខ្សែស្រឡាយខាងក្នុងត្រូវបានណែនាំដោយសាកលវិទ្យាល័យមួយចំនួនសម្រាប់វិធានការសុវត្ថិភាព - ពួកគេក៏អាចការពារការចម្លងរោគក្នុងអំឡុងពេលបំពេញ ឬនៅពេលរក្សាទុកក្នុងអាសូតរាវ។
• ការពារការលេចធ្លាយ- ប្រើការផ្សាភ្ជាប់ដែលចាក់បញ្ចូលពីរគ្រាប់ ចូលទៅក្នុងមួកវីស ឬ O-rings ដើម្បីការពារការលេចធ្លាយ និងការចម្លងរោគ។
• ប្រើបាកូដ 2D និងដបដាក់ស្លាក- ដើម្បីធានាបាននូវការតាមដាន ដបដែលមានផ្នែកសរសេរធំអាចឱ្យដបនីមួយៗមានស្លាកសញ្ញាគ្រប់គ្រាន់។ បាកូដ 2D អាចជួយក្នុងការគ្រប់គ្រងការផ្ទុក និងការរក្សាកំណត់ត្រា។ មួកដែលមានកូដពណ៌មានប្រយោជន៍សម្រាប់ការកំណត់អត្តសញ្ញាណកាន់តែងាយស្រួល។
• ការថែទាំការផ្ទុកគ្រប់គ្រាន់- ដើម្បីធានាថាកោសិកាមិនត្រូវបានបាត់បង់ នាវាផ្ទុកគួរតែត្រួតពិនិត្យសីតុណ្ហភាព និងកម្រិតអាសូតរាវជានិច្ច។ ការជូនដំណឹងគួរតែត្រូវបានបំពាក់ដើម្បីជូនដំណឹងដល់អ្នកប្រើប្រាស់អំពីកំហុស។

ការប្រុងប្រយ័ត្នសុវត្ថិភាព

អាសូតរាវបានក្លាយជាការអនុវត្តទូទៅក្នុងការស្រាវជ្រាវទំនើប ប៉ុន្តែមានហានិភ័យនៃការរងរបួសធ្ងន់ធ្ងរ ប្រសិនបើប្រើមិនត្រឹមត្រូវ។

ឧបករណ៍ការពារផ្ទាល់ខ្លួនត្រឹមត្រូវ (PPE) គួរតែត្រូវបានពាក់ដើម្បីកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការកក រលាក និងឧប្បត្តិហេតុមិនល្អផ្សេងទៀតនៅពេលដោះស្រាយអាសូតរាវ។ ពាក់

• ស្រោមដៃ Cryogenic
• ថ្នាំកូតមន្ទីរពិសោធន៍
• របាំងមុខពេញដែលធន់នឹងផលប៉ះពាល់ ដែលគ្របលើកញ្ចឹងកផងដែរ។
• ស្បែកជើងបិទម្រាមជើង
• អាវផាយប្លាស្ទិកមិនជ្រាបទឹក

ទូរទឹកកកអាសូតរាវគួរតែដាក់នៅកន្លែងដែលមានខ្យល់ចេញចូលបានល្អ ដើម្បីកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការដកដង្ហើមចេញ – អាសូតដែលរួចផុតពីចំហាយទឹក និងផ្លាស់ទីលំនៅអុកស៊ីសែនបរិយាកាស។ ហាងលក់បរិមាណធំគួរតែមានប្រព័ន្ធរោទិ៍អុកស៊ីសែនទាប។

ការធ្វើការជាគូនៅពេលគ្រប់គ្រងអាសូតរាវគឺល្អ ហើយការប្រើប្រាស់របស់វានៅខាងក្រៅម៉ោងធ្វើការធម្មតាគួរតែត្រូវបានហាមឃាត់។

Cryovials ដើម្បីគាំទ្រលំហូរការងាររបស់អ្នក។

ក្រុមហ៊ុន Suzhou Ace Biomedical ផ្តល់ជូននូវជម្រើសដ៏ធំទូលាយនៃផលិតផលដែលបំពេញតាមតម្រូវការនៃការរក្សាទុកកោសិការបស់អ្នកសម្រាប់ប្រភេទផ្សេងៗនៃកោសិកា។ ផលប័ត្ររួមមានបំពង់ជាច្រើនក៏ដូចជាជួរនៃ cryovials ដែលគ្មានមេរោគ។

cryovials របស់យើងគឺ:

• Lab Screw Cap 0.5mL 1.5mL 2.0mL Cryovial Cryogenic Vials Conical Bottom Cryotube with Gasket

  ● 0.5ml,1.5ml,2.0ml ការបញ្ជាក់ ដោយមានសំពត់ ឬគ្មានសំពត់
  ● ការរចនារាងសាជី ឬឈរដោយខ្លួនឯង មាប់មគ ឬមិនក្រៀវ គឺអាចប្រើបានទាំងពីរ
  ● បំពង់មួកវីសត្រូវបានផលិតពីសារធាតុ polypropylene ថ្នាក់វេជ្ជសាស្ត្រ
  ● PP Cryotube Vials អាចត្រូវបានកក និងរលាយម្តងហើយម្តងទៀត
  ● ការរចនាមួកខាងក្រៅអាចកាត់បន្ថយប្រូបាប៊ីលីតេនៃការចម្លងរោគក្នុងអំឡុងពេលព្យាបាលគំរូ។
  ● Screw cap cryogenic tubes វីសជាសកលសម្រាប់ប្រើប្រាស់
  ● បំពង់ត្រូវនឹង rotor ទូទៅបំផុត
  ● បំពង់ o-ring tube Cryogenic សមនឹងស្តង់ដារ 1-inch និង 2-inch, 48well, 81well,96well និង 100well freezer boxes
  ● Autoclavable ដល់ 121°C និងអាចបង្កកដល់ -86°C

  ផ្នែកលេខ	សម្ភារៈ	បរិមាណ	CAPពណ៌	PCS/កាបូប	កាបូប/ករណី
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	ខ្មៅ លឿង ខៀវ ក្រហម ស្វាយ ស	៥០០	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	ខ្មៅ លឿង ខៀវ ក្រហម ស្វាយ ស	៥០០	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	ខ្មៅ លឿង ខៀវ ក្រហម ស្វាយ ស	៥០០	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	ខ្មៅ លឿង ខៀវ ក្រហម ស្វាយ ស	៥០០	10