ស្តង់ដារនៃដំណើរការរួមមានការបង្កើនប្រសិទ្ធភាព និងការបង្កើតជាបន្តបន្ទាប់ និងការចុះសម្រុងគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានដំណើរការល្អប្រសើរក្នុងរយៈពេលវែង - ឯករាជ្យពីអ្នកប្រើប្រាស់។ ស្ដង់ដារធានាបាននូវលទ្ធផលគុណភាពខ្ពស់ ក៏ដូចជាការផលិតឡើងវិញ និងការប្រៀបធៀបរបស់ពួកគេ។
គោលដៅនៃ PCR (បុរាណ) គឺជាការបង្កើតលទ្ធផលដែលអាចទុកចិត្តបាន និងអាចផលិតឡើងវិញបាន។ សម្រាប់កម្មវិធីជាក់លាក់ ទិន្នផលនៃផលិតផល PCRក៏ពាក់ព័ន្ធផងដែរ។ ចំពោះប្រតិកម្មទាំងនេះ ត្រូវតែយកចិត្តទុកដាក់ដើម្បីធានាថាគំរូមិនត្រូវបានសម្របសម្រួល ហើយលំហូរការងារ PCR នៅតែមានស្ថេរភាព។ ជាពិសេស វាប្រែថាការបង្រួមអប្បបរមានៃការណែនាំនៃការចម្លងរោគ ដែលអាចនាំឱ្យមានលទ្ធផលវិជ្ជមាន ឬអវិជ្ជមានមិនពិត ឬសូម្បីតែរារាំងប្រតិកម្ម PCR ។ លើសពីនេះ លក្ខខណ្ឌនៃប្រតិកម្មគួរតែដូចគ្នាបេះបិទតាមដែលអាចធ្វើទៅបានសម្រាប់គំរូនីមួយៗក្នុងដំណើរការមួយ ហើយក៏អាចផ្ទេរទៅប្រតិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ (នៃវិធីសាស្ត្រដូចគ្នា)។ នេះសំដៅទៅលើសមាសភាពនៃប្រតិកម្មក៏ដូចជាប្រភេទនៃការត្រួតពិនិត្យសីតុណ្ហភាពនៅក្នុងអ្នកជិះកង់។ ជាការពិត កំហុសរបស់អ្នកប្រើប្រាស់គឺត្រូវជៀសវាងឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។
ខាងក្រោមនេះ យើងនឹងបង្ហាញពីបញ្ហាប្រឈមដែលជួបប្រទះកំឡុងពេលរៀបចំ និងពេញមួយដំណើរការនៃ PCR - និងវិធីសាស្រ្តនៃដំណោះស្រាយដែលមានទាក់ទងនឹងឧបករណ៍ និងសម្ភារៈប្រើប្រាស់សម្រាប់ធ្វើស្តង់ដារនៃលំហូរការងារ PCR ។
ការរៀបចំប្រតិកម្ម
ការចែកចាយសមាសធាតុប្រតិកម្មទៅក្នុងនាវា PCR ឬចានរៀងៗខ្លួន រួមមានបញ្ហាប្រឈមជាច្រើនដែលត្រូវតែជំនះ៖
លក្ខខណ្ឌប្រតិកម្ម
កម្រិតថ្នាំត្រឹមត្រូវ និងច្បាស់លាស់នៃសមាសធាតុនីមួយៗគឺមិនអាចខ្វះបាននៅពេលកំណត់លក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មដូចគ្នាច្រើនបំផុតដែលអាចធ្វើទៅបាន។ បន្ថែមពីលើបច្ចេកទេសបំពង់ល្អ ការជ្រើសរើសឧបករណ៍ត្រឹមត្រូវគឺសំខាន់ណាស់។ PCR master-mixes ជាញឹកញាប់មានសារធាតុដែលបង្កើន viscosity ឬបង្កើតពពុះ។ កំឡុងពេលដំណើរការបំពង់ ទាំងនេះនាំទៅរកការសើមយ៉ាងសំខាន់គន្លឹះ pipetteដូច្នេះកាត់បន្ថយភាពត្រឹមត្រូវនៃបំពង់។ ការប្រើប្រាស់ប្រព័ន្ធចែកចាយដោយផ្ទាល់ ឬគន្លឹះបំពង់ជំនួសដែលមិនសូវងាយនឹងសើម អាចធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពត្រឹមត្រូវនិងភាពជាក់លាក់នៃដំណើរការបំពង់។
ការចម្លងរោគ
កំឡុងពេលដំណើរការចែកចាយ សារធាតុ aerosols ត្រូវបានបង្កើតឡើង ដែលប្រសិនបើត្រូវបានអនុញ្ញាតឱ្យចូលទៅខាងក្នុងនៃ pipette នោះ អាចមានសក្តានុពលបំពុលសំណាកផ្សេងទៀតក្នុងដំណាក់កាលបន្ទាប់នៃបំពង់បង្ហូរ។ នេះអាចត្រូវបានរារាំងដោយប្រើគន្លឹះតម្រង ឬប្រព័ន្ធផ្លាស់ប្តូរទីតាំងដោយផ្ទាល់។
សម្ភារៈប្រើប្រាស់ដូចជាគន្លឹះនាវា និងចានដែលប្រើក្នុងដំណើរការការងារ PCR មិនត្រូវមានសារធាតុដែលសម្របសម្រួលគំរូ ឬក្លែងបន្លំលទ្ធផលនោះទេ។ ទាំងនេះរួមមាន DNA, DNases, RNases និង PCR inhibitors ក៏ដូចជាសមាសធាតុដែលអាចលេចធ្លាយចេញពីសម្ភារៈក្នុងអំឡុងពេលមានប្រតិកម្ម – សារធាតុដែលគេស្គាល់ថាជាសារធាតុដែលអាចបំបែកបាន។
កំហុសអ្នកប្រើប្រាស់
គំរូកាន់តែច្រើនត្រូវបានដំណើរការ ហានិភ័យនៃកំហុសកាន់តែខ្ពស់។ វាអាចកើតឡើងយ៉ាងងាយស្រួលដែលសំណាកមួយត្រូវបានបង្ហូរចូលទៅក្នុងធុងខុស ឬអណ្តូងខុស។ ហានិភ័យនេះអាចត្រូវបានកាត់បន្ថយយ៉ាងខ្លាំងដោយការសម្គាល់អណ្តូងដែលងាយសម្គាល់។ តាមរយៈស្វ័យប្រវត្តិកម្មនៃជំហានចែកចាយ "កត្តាមនុស្ស" ពោលគឺ កំហុស និងការប្រែប្រួលទាក់ទងនឹងអ្នកប្រើប្រាស់ត្រូវបានបង្រួមអប្បបរមា ដូច្នេះការបង្កើនការផលិតឡើងវិញ ជាពិសេសនៅក្នុងករណីនៃបរិមាណប្រតិកម្មតិចតួច។ នេះតម្រូវឱ្យមានចាននៃស្ថេរភាពវិមាត្រគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីប្រើប្រាស់នៅក្នុងស្ថានីយការងារ។ បាកូដដែលភ្ជាប់មកជាមួយផ្តល់នូវការអានម៉ាស៊ីនបន្ថែម ដែលជួយសម្រួលដល់ការតាមដានគំរូពេញដំណើរការទាំងមូល។
ការសរសេរកម្មវិធីនៃ thermocycler
ការសរសេរកម្មវិធីឧបករណ៍អាចបង្ហាញថាត្រូវចំណាយពេលវេលាក៏ដូចជាងាយនឹងមានកំហុស។ លក្ខណៈពិសេសរបស់ PCR thermal cycler ផ្សេងគ្នាធ្វើការជាមួយគ្នាដើម្បីធ្វើឱ្យជំហានដំណើរការនេះងាយស្រួល ហើយសំខាន់បំផុតគឺដើម្បីធ្វើឱ្យវាមានសុវត្ថិភាព៖
ប្រតិបត្តិការងាយស្រួល និងការណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ល្អ គឺជាមូលដ្ឋាននៃការសរសេរកម្មវិធីប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព។ ដោយផ្អែកលើមូលដ្ឋាននេះ ការគ្រប់គ្រងអ្នកប្រើប្រាស់ដែលការពារដោយពាក្យសម្ងាត់នឹងការពារកម្មវិធីផ្ទាល់ខ្លួនរបស់ពួកគេពីការកែប្រែដោយអ្នកប្រើប្រាស់ផ្សេងទៀត។ ប្រសិនបើឧបករណ៍ជិះកង់ច្រើន (ប្រភេទដូចគ្នា) កំពុងប្រើប្រាស់ វាមានប្រយោជន៍ប្រសិនបើកម្មវិធីមួយអាចត្រូវបានផ្ទេរដោយផ្ទាល់ពីឧបករណ៍មួយទៅឧបករណ៍មួយទៀតតាមរយៈ USB ឬការតភ្ជាប់។ កម្មវិធីកុំព្យូទ័រអាចឱ្យការគ្រប់គ្រងកណ្តាល និងសុវត្ថិភាពនៃកម្មវិធី សិទ្ធិអ្នកប្រើប្រាស់ និងឯកសារនៅលើកុំព្យូទ័រ។
ដំណើរការ PCR
ក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការ DNA ត្រូវបានពង្រីកនៅក្នុងនាវាប្រតិកម្ម ដែលសំណាកនីមួយៗគួរតែត្រូវទទួលរងនូវលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មដូចគ្នា និងស្រប។ ទិដ្ឋភាពខាងក្រោមគឺពាក់ព័ន្ធសម្រាប់ដំណើរការ៖
ការត្រួតពិនិត្យសីតុណ្ហភាព
ភាពត្រឹមត្រូវដ៏ល្អឥតខ្ចោះក្នុងការគ្រប់គ្រងសីតុណ្ហភាព និងភាពដូចគ្នានៃប្លុកអ្នកជិះកង់គឺជាមូលដ្ឋានសម្រាប់សូម្បីតែលក្ខខណ្ឌសីតុណ្ហភាពនៃគំរូទាំងអស់។ គុណភាពខ្ពស់នៃធាតុកំដៅនិងត្រជាក់ (ធាតុ peltier) ក៏ដូចជាវិធីដែលវត្ថុទាំងនេះភ្ជាប់ទៅនឹងប្លុកគឺជាកត្តាសម្រេចចិត្តដែលនឹងកំណត់ហានិភ័យនៃភាពខុសគ្នានៃសីតុណ្ហភាពដែលគេស្គាល់ថាជា "ឥទ្ធិពលគែម"
ការហួត
ការប្រមូលផ្តុំនៃសមាសធាតុប្រតិកម្មបុគ្គលមិនគួរផ្លាស់ប្តូរក្នុងអំឡុងពេលនៃប្រតិកម្មដោយសារតែការហួត។ បើមិនដូច្នេះទេ វាអាចទៅរួចតិចណាស់។ផលិតផល PCRអាចត្រូវបានបង្កើត ឬគ្មានទាំងអស់។ ដូច្នេះវាមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការកាត់បន្ថយការហួតដោយធានានូវត្រាសុវត្ថិភាព។ ក្នុងករណីនេះ គម្របកំដៅរបស់ម៉ាស៊ីនកម្តៅ និងត្រានៃនាវាដំណើរការក្នុងដៃ។ ជម្រើសនៃការផ្សាភ្ជាប់ផ្សេងគ្នាគឺអាចរកបានសម្រាប់បន្ទះ PCR (តំណភ្ជាប់៖ អត្ថបទផ្សាភ្ជាប់)ដែលការផ្សាភ្ជាប់ដ៏ល្អបំផុតត្រូវបានសម្រេចតាមរយៈការផ្សាភ្ជាប់កំដៅ។ ការបិទផ្សេងទៀតក៏អាចមានលក្ខណៈសមរម្យផងដែរ ដរាបណាសម្ពាធទំនាក់ទំនងនៃគម្របកង់អាចត្រូវបានកែតម្រូវទៅនឹងត្រាដែលបានជ្រើសរើស។
ស្តង់ដារដំណើរការគឺស្ថិតនៅក្នុងគោលបំណងដើម្បីការពារលទ្ធផលត្រឹមត្រូវ និងអាចផលិតឡើងវិញបានក្នុងរយៈពេលយូរ។ នេះរួមបញ្ចូលទាំងការថែទាំឧបករណ៍ជាប្រចាំដើម្បីធានាថាវាស្ថិតក្នុងស្ថានភាពដំណើរការល្អ។ សម្ភារៈប្រើប្រាស់ទាំងអស់គួរតែមានគុណភាពខ្ពស់ជាប់លាប់នៅគ្រប់ឡូតិ៍ទាំងអស់ដែលបានផលិត ហើយភាពអាចជឿជាក់បានរបស់ពួកវាត្រូវតែត្រូវបានធានា។
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ២៩ ខែវិច្ឆិកា ឆ្នាំ ២០២២