ការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរនិងវិធីសាស្រ្តអង្កាំម៉ាញេទិក

ការនេនាមអាេយស្គាល់

តើអ្វីទៅជាការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរ?

ក្នុងន័យសាមញ្ញបំផុតនៃពាក្យការស្រង់ចេញជាតិអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរគឺជាការដកយករបស់ RNA និង / ឬ DNA ពីគំរូមួយហើយលើសទាំងអស់ដែលមិនចាំបាច់។ ដំណើរការនៃការទាញយកចេញនូវអាស៊ីដនុយក្លេអ៊ែរពីគំរូមួយហើយផ្តល់ឱ្យពួកគេនូវទម្រង់នៃការប្រមូលផ្តុំដោយគ្មានការជំរុញនិងភាពកខ្វក់ដែលអាចប៉ះពាល់ដល់កម្មវិធីនៅខាងក្រោម។

ការដាក់ពាក្យសុំការស្រង់ចេញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរ

អាស៊ីតស្នូលបន្សុតត្រូវបានប្រើក្នុងកម្មវិធីប្លែកៗនៃកម្មវិធីផ្សេងៗគ្នារាប់ចាប់ពីឧស្សាហកម្មផ្សេងៗគ្នាជាច្រើន។ ការថែទាំសុខភាពប្រហែលជាតំបន់ដែលវាត្រូវបានគេប្រើច្រើនបំផុតដោយមាន RNA បានបន្សុតនិងឌីអិនអេដែលត្រូវការសម្រាប់ម៉ាស៊ីនដែលមានគោលបំណងធ្វើតេស្តផ្សេងៗគ្នា។

ការដាក់ពាក្យសុំការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរក្នុងថែទាំសុខភាពរួមមាន:

- PCR និង QPCrcification

- លំដាប់មនុស្សជំនាន់ក្រោយ (NGS)

- អេសភីភីភីដែលមានមូលដ្ឋានលើអេឡិចត្រូនិច

- ប្រភេទហ្សែនដែលមានមូលដ្ឋានលើអារេ

- ការរំលាយអាហារអង់ស៊ីមអង់ស៊ីម

- វិភាគដោយប្រើការកែប្រែអង់ស៊ីម (ឧទាហរណ៍ការញែកនិងក្លូន)

វាក៏មានវិស័យផ្សេងទៀតក្រៅពីការថែទាំសុខភាពដែលការទាញយកទឹកអាស៊ីតត្រូវបានប្រើរួមទាំងប៉ុន្តែមិនមានកំណត់ចំពោះការធ្វើតេស្តភាពជាឪពុកការប្រគត្ដិភាពប្រតិកម្មជាមុននិងហ្សែន។

ប្រវត្តិសង្ខេបនៃការស្រង់ចេញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរ

ការស្រង់ចេញ DNAកាលបរិច្ឆេទត្រឡប់មកវិញដ៏វែងមួយជាមួយនឹងភាពឯកោដំបូងដែលត្រូវបានសម្តែងដោយគ្រូពេទ្យស្វីសឈ្មោះ Friedrich Messcher ក្នុងឆ្នាំ 1869 ។ Miescher សង្ឃឹមថានឹងដោះស្រាយគោលការណ៍គ្រឹះនៃជីវិតដោយកំណត់សមាសភាពគីមីនៃកោសិកា។ បន្ទាប់ពីបរាជ័យជាមួយឡាំហ្វាយយសៀគាត់អាចទទួលបានទឹកភ្លៀងពីឌីអិនអេពី Leucocytes ដែលមាននៅក្នុងខ្ទុះនៅលើបង់រុំដែលបានបោះបង់ចោល។ គាត់បានធ្វើដូច្នេះដោយបន្ថែមអាស៊ីតហើយបន្ទាប់មកអាល់កាឡាំងចូលក្នុងក្រឡាដើម្បីចាកចេញពីស៊ីតូឡោមរបស់កោសិកាហើយបន្ទាប់មកបានបង្កើតពិធីការដើម្បីបំបែកឌីអិនអេពីប្រូតេអ៊ីនផ្សេងទៀត។

បន្ទាប់ពីការស្រាវជ្រាវបំបែកជាជួររបស់ក្រុមហ៊ុន Miescher អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រជាច្រើនទៀតបានបន្តទៅមុខនិងអភិវឌ្ឍបច្ចេកទេសដើម្បីញែកនិងបន្សុទ្ធ DNA ។ Edwin Joseph Cohn អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រប្រូតេអ៊ីនបានបង្កើតបច្ចេកទេសជាច្រើនសម្រាប់ការបន្សុតប្រូតេអ៊ីនក្នុងកំឡុងពេល WW2 ។ គាត់ទទួលខុសត្រូវចំពោះការញែកប្រភាគ Albumin Fract នៃផ្លាស្មាឈាមដែលមានសារៈសំខាន់ក្នុងការថែរក្សាសម្ពាធ Osmotic នៅក្នុងសរសៃឈាម។ នេះពិតជាមានសារៈសំខាន់ណាស់សម្រាប់ការរក្សាទាហានឱ្យមានជីវិត។

នៅឆ្នាំ 1953 លោក Crancis Crick រួមជាមួយ Rosalind Franklin និងលោក James Watson បានកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធរចនាសម្ព័ន្ធរបស់ឌីអិនអេបង្ហាញថាវាត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយមានខ្សែសង្វាក់វែងពីរនៃនុយក្លេអ៊ែរជាតិអាស៊ីតអាស៊ីត។ របកគំហើញដ៏លេចធ្លោនេះបានត្រួសត្រាយផ្លូវសម្រាប់ Meselson និង Stahl ដែលអាចអភិវឌ្ឍពិធីសារ CentiFug ដែលមានដង់ស៊ីតេបានដាច់ពីគ្នាពី DI. Coli ដែលពួកគេបានបង្ហាញការថតចម្លង DNA ដែលមានពាក់កណ្តាលអភិរក្ស DNA ក្នុងការពិសោធន៏ 1958 របស់ពួកគេ។

បច្ចេកទេសនៃការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរ

តើការទាញយក DNA 4 ដំណាក់កាលមានអ្វីខ្លះ?
វិធីសាស្រ្តទាញចេញទាំងអស់ពុះចុះទៅជំហានគ្រឹះដូចគ្នា។

ការរំខានកោសិកា។ ដំណាក់កាលនេះដែលត្រូវបានគេស្គាល់ថាលីសស៊ីសលីសទាក់ទងនឹងការបំបែកជញ្ជាំងក្រឡានិង / ឬភ្នាសកោសិកាក្នុងការបញ្ចេញវត្ថុរាវក្នុងកោសិកាដែលមានផ្ទុកជាតិអាស៊ីតដែលមានផ្ទុកសារធាតុនុយក្លេអ៊ែរដែលមានជាតិអាស៊ីតដែលមានផ្ទុក។

ការដកយកកំទេចកំទីដែលមិនចង់បាន។ នេះរាប់បញ្ចូលទាំងជាតិខ្លាញ់ក្នុងភ្នាសប្រូតេអ៊ីននិងអាស៊ីតស្នូលដែលមិនចង់បានផ្សេងទៀតដែលអាចរំខានដល់កម្មវិធីខ្សែទឹកខាងក្រោម។

ការដាក់ឱ្យនៅដាច់ដោយឡែក។ មានវិធីផ្សេងៗគ្នាជាច្រើនក្នុងការញែកអាស៊ីតស្នូលនៃចំណាប់អារម្មណ៍ពីមើមដែលអ្នកបានបង្កើតដែលស្ថិតនៅចន្លោះពីរប្រភេទ: ដំណោះស្រាយដែលផ្អែកលើឬរដ្ឋរឹង (សូមមើលផ្នែកបន្ទាប់) ។

ការផ្តោតអារម្មណ៍។ បន្ទាប់ពីអាស៊ីតស្នូលត្រូវបានដាច់ឆ្ងាយពីការចម្លងរោគនិងជម្រុញផ្សេងទៀតទាំងអស់ពួកគេត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងការយល់ដឹងខ្ពស់។

ការស្រង់ចេញពីរប្រភេទ
ការទាញយកជាតិអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរមានពីរប្រភេទ - វិធីសាស្រ្តផ្អែកលើដំណោះស្រាយនិងវិធីសាស្ត្ររដ្ឋរឹងមាំ។ វិធីសាស្រ្តដែលផ្អែកលើដំណោះស្រាយត្រូវបានគេស្គាល់ផងដែរថាជាវិធីសាស្ត្រទាញយកសារធាតុគីមីព្រោះវាពាក់ព័ន្ធនឹងការប្រើប្រាស់សារធាតុគីមីបំបែកកោសិកានិងចូលប្រើសម្ភារៈនុយក្លេអ៊ែរ។ នេះអាចប្រើសមាសធាតុសរីរាង្គមួយចំនួនដូចជា Phenol និង Chloroform ឬមិនសូវមានគ្រោះថ្នាក់ហើយដូច្នេះសមាសធាតុសរីរាង្គច្រើនទៀតដែលត្រូវបានណែនាំដូចជាប្រូតេអ៊ីន K ឬជែលស៊ីលីកា។

ឧទាហរណ៏នៃវិធីសាស្រ្តទាញយកសារធាតុគីមីខុសគ្នាដើម្បីបំបែកក្រឡារួមមាន:

- ការដាច់សរសៃឈាមខួរក្បាលរបស់ OSBREN

- ការរំលាយអាហារអេស្ប៉ាញនៃជញ្ជាំងកោសិកា

- SublioSation នៃភ្នាស

- ជាមួយសាប៊ូម្ស៉ៅ

- ជាមួយការព្យាបាលអាល់កាលី

បច្ចេកទេសរដ្ឋរឹងដែលត្រូវបានគេស្គាល់ផងដែរថាជាវិធីសាស្រ្តមេកានិចទាក់ទងនឹងការកេងប្រវ័ញ្ចថាតើឌីអិនអេមានអន្តរកម្មជាមួយនឹងស្រទាប់ខាងក្រោមរឹង។ តាមរយៈការជ្រើសរើសអង្កាំឬម៉ូលេគុលដែលឌីអិនអេនឹងចងភ្ជាប់ទៅប៉ុន្តែអ្នកវិភាគនឹងមិនមានទេវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីបំបែកអ្នកទាំងពីរ។ ឧទាហរណ៏នៃបច្ចេកទេសទាញយករ៉ែរឹងដែលរួមមានការប្រើប្រាស់ស៊ីលីកានិងអង្កាំម៉ាញេទិក។

ការពន្យល់អំពីអង្កាំម៉ាញេទិកពន្យល់

វិធីសាស្ត្រទាញអង្កាំម៉ាញេទិក
សក្តានុពលនៃការទាញយកការទាញយកការទាញយកអង្កាំម៉ាញេទិកត្រូវបានទទួលស្គាល់ជាលើកដំបូងនៅក្នុងប៉ាតង់របស់សហរដ្ឋអាមេរិកដែលដាក់ដោយ Trevor Hawkins សម្រាប់ស្ថាប័នស្រាវជ្រាវវិទ្យាស្ថាន Whitehead ។ ប៉ាតង់នេះបានទទួលស្គាល់ថាវាអាចធ្វើទៅបានថាក្នុងការដកស្រង់សំភារៈហ្សែនដោយភ្ជាប់វាទៅក្រុមហ៊ុនផ្តល់ជំនួយដ៏រឹងមាំដែលអាចជាអង្កាំម៉ាញេទិក។ គោលការណ៍គឺថាអ្នកប្រើអង្កាំម៉ាញេទិកដែលមានមុខងារខ្ពស់ដែលសម្ភារៈហ្សែននឹងចងភ្ជាប់ទៅដែលបន្ទាប់មកអាចត្រូវបានបំបែកចេញពីជំនឿម៉ាញេទិកដោយប្រើនាវាខាងក្រៅដែលកាន់គំរូ។

ហេតុអ្វីបានជាប្រើការទាញយកអង្កាំម៉ាញេទិក?
បច្ចេកវិទ្យាទាញយករ៉ែម៉ាញេទិកកំពុងកើតមានជាទូទៅដោយសារតែសក្តានុពលដែលវាមានសម្រាប់នីតិវិធីស្រង់ចេញយ៉ាងឆាប់រហ័សនិងមានប្រសិទ្ធភាព។ នាពេលថ្មីៗនេះមានការរីកចម្រើននៃអង្កាំម៉ាញេទិកដែលមានមុខងារខ្ពស់ជាមួយនឹងប្រព័ន្ធសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលបានធ្វើឱ្យស្វ័យប្រវត្តិកម្មនៃការទាញយកជាតិអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរនិងលំហូរការងារដែលមានពន្លឺធនធាននិងមានប្រសិទ្ធិភាពចំណាយ។ ដូចគ្នានេះផងដែរវិធីសាស្រ្តទាញយកមេដែកមិនពាក់ព័ន្ធនឹងជំហាន centrifugation ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានកម្លាំងកាត់ដែលបំបែកបំណែក DNA យូរជាងនេះ។ នេះមានន័យថាខ្សែឌីអិនអេកាន់តែយូរនៅតែដដែលដែលមានសារៈសំខាន់ក្នុងការធ្វើតេស្តហ្សែនហ្សែន។