ប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ Polymerase (PCR) គឺជាវិធីសាស្រ្តមួយដែលគេស្គាល់យ៉ាងទូលំទូលាយដែលប្រើនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍វិទ្យាសាស្ត្រជីវិត។
ចាន PCR ត្រូវបានផលិតចេញពីផ្លាស្ទិចថ្នាក់ទីមួយសម្រាប់ដំណើរការ និងការវិភាគដ៏ល្អនៃគំរូ ឬលទ្ធផលដែលប្រមូលបាន។
ពួកវាមានជញ្ជាំងស្តើង និងដូចគ្នា ដើម្បីផ្តល់ការផ្ទេរកំដៅយ៉ាងជាក់លាក់។
ក្នុងការរៀបចំសម្រាប់កម្មវិធីពេលវេលាពិត ផ្នែកនាទីនៃ DNA ឬ RNA ត្រូវបានបិទ និងរក្សាទុកក្នុងចាន PCR ។
បន្ទះ PCR មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការផ្សាភ្ជាប់កំដៅ និងរឹតបន្តឹងលំហូរនៃកំដៅផងដែរ។
ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ ដោយសារបន្ទះ PCR មានប្រសិទ្ធភាព និងអាចទុកចិត្តបាន កំហុស និងភាពមិនត្រឹមត្រូវ ទុកចោលយ៉ាងងាយស្រួល ខណៈពេលដែលកំពុងដំណើរការគំរូ។
អាស្រ័យហេតុនេះ បើលោកអ្នកចាប់អារម្មណ៍ចង់បានរបស់ល្អ និងគុណភាពខ្ពស់ចាន PCR ។វាជាការល្អក្នុងការទាក់ទងក្រុមហ៊ុនផលិតបន្ទះ PCR ដែលអាចទុកចិត្តបាន។ ជាមួយនេះ អ្នកប្រាកដជាទទួលបានកិច្ចព្រមព្រៀងដ៏ល្អបំផុត។
នេះគឺជាការប្រុងប្រយ័ត្នមួយចំនួនដែលត្រូវអនុវត្តតាម ដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគនៃសារធាតុប្រតិកម្ម ឬសំណាក និងការពារភាពមិនត្រឹមត្រូវពីការជ្រៀតចូលទៅក្នុងលទ្ធផល។
ការក្រៀវជុំវិញ
ភាពវិជ្ជមាន ឬអវិជ្ជមានមិនត្រឹមត្រូវកើតឡើងដោយសារតែវត្តមាននៃភាពមិនបរិសុទ្ធ ដែលធ្វើឱ្យអ្នកសង្ស័យលទ្ធផល។
ភាពមិនបរិសុទ្ធ និងភាពកខ្វក់កើតឡើងក្នុងទម្រង់ផ្សេងៗគ្នា ដូចជា DNA ដែលមិនមានទំនាក់ទំនង ឬសារធាតុបន្ថែមគីមី ដែលនៅទីបំផុតកាត់បន្ថយប្រសិទ្ធភាព និងប្រសិទ្ធភាពនៃប្រតិកម្ម។
មានវិធីជាច្រើនដើម្បីកាត់បន្ថយអត្រានៃការចម្លងរោគនៃបន្ទះ PCR យ៉ាងខ្លាំង។
ការប្រើគន្លឹះតម្រងមាប់មគគឺជាមធ្យោបាយដ៏មានប្រយោជន៍មួយផ្សេងទៀតដើម្បីទប់ស្កាត់ភាពមិនស្អាតពីការជ្រៀតចូលទៅក្នុងសំណាករបស់អ្នកតាមរយៈបំពង់។
លះបង់ឧបករណ៍ស្អាតទាំងស្រុងដែលមានបំពង់ទុយោ និងរ៉ាកែតសម្រាប់ប្រើ PCR ទាំងស្រុង។ នេះនឹងធានាការផ្ទេរសារធាតុមិនស្អាត ឬសារធាតុកខ្វក់ជុំវិញមន្ទីរពិសោធន៍។
ប្រើប្រាស់សារធាតុ bleaches, អេតាណុល នៅលើ pipettes, racks និង benches ដើម្បីលុបភាពកខ្វក់។
បែងចែកកន្លែងបម្រុងទុកសម្រាប់ប្រតិកម្ម PCR របស់អ្នកទាំងអស់ ដើម្បីកាត់បន្ថយការបំពុលភាគល្អិតបន្ថែមទៀត។
ប្រើស្រោមដៃស្អាតគ្រប់ជំហាន ហើយជំនួសវាឱ្យបានញឹកញាប់។
ចាន PCR
ពិនិត្យមើលការប្រមូលផ្តុំនិងភាពបរិសុទ្ធនៃគំរូ។
ភាពស្អាតនៃកៅអី និងឧបករណ៍ដែលប្រើនៅពេលវិភាគសំណាកជាមួយ PCR គួរតែត្រូវបានរក្សា។ វាចាំបាច់ណាស់ក្នុងការត្រួតពិនិត្យកម្រិតនៃភាពបរិសុទ្ធនៃសំណាកមុនពេលវិភាគ និងដំណើរការ។
ជាទូទៅ អ្នកវិភាគគិតពិចារណាអំពីកម្រិតកំហាប់ និងភាពបរិសុទ្ធនៃគំរូ DNA ។
ព្យាយាមសមាមាត្រនៃការស្រូបចូលសម្រាប់ 260nm/280nm មិនត្រូវតិចជាង 1.8 ទេ។ ខណៈពេលដែលរលកបន្តបន្ទាប់គ្នារវាង 230nm និង 320nm ត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណមិនបរិសុទ្ធ។
ក្នុងឧទាហរណ៍មួយ អំបិល chaotropic និងសមាសធាតុសរីរាង្គផ្សេងទៀតត្រូវបានរកឃើញក្នុងអត្រាស្រូបយក 230nm ។ ខណៈពេលដែលភាពច្របូកច្របល់នៅក្នុងសំណាក DNA ក៏ត្រូវបានរកឃើញ និងផ្ទៀងផ្ទាត់ក្នុងអត្រាស្រូបយក 320nm ។
ជៀសវាងការផ្ទុកលើសទម្ងន់បន្ទះ PCR ជាមួយផលិតផល
តាមដែលវាចង់ដំណើរការផលិតផលច្រើនក្នុងពេលដំណាលគ្នា វាបណ្តាលឱ្យមានការចម្លងរោគនៃបន្ទះ PCR ។
ការផ្ទុកលើសទម្ងន់នៃចាន PCR ជាមួយនឹងផលិតផលផ្សេងគ្នា ធ្វើឱ្យមានការលំបាកខ្លាំងក្នុងការបញ្ជាក់គំរូ។
រក្សាកំណត់ត្រារបស់ Aliquot PCR Reagents
វដ្តនៃការបង្កក/រលាយជាបន្តបន្ទាប់ និងការប្រើប្រាស់ជាញឹកញាប់នៃ aliquot អាចធ្វើឱ្យខូចខាតដល់សារធាតុ PCR, អង់ស៊ីម និង DNTP តាមរយៈការធ្វើគ្រីស្តាល់ឡើងវិញ។
តែងតែព្យាយាមតាមដានអត្រានៃ aliquot ដែលបានប្រើខណៈពេលដែលកំពុងរៀបចំគំរូដែលត្រូវវិភាគ។
LIMS ដែលពេញចិត្តគឺស័ក្តិសមជាងក្នុងការគ្រប់គ្រងសារពើភ័ណ្ឌ និងបរិមាណនៃសារធាតុ និងសំណាកដែលបង្កក ឬរលាយ។
ជ្រើសរើសសីតុណ្ហភាពល្អបំផុត។
ការជ្រើសរើស និងប្រើប្រាស់សីតុណ្ហភាព annealing ខុសគឺជាវិធីសាស្រ្តមួយផ្សេងទៀតដែលលទ្ធផល PCR មានកំហុស។
ពេលខ្លះ ប្រតិកម្មមិនបានសម្រេចដូចការគ្រោងទុក។ វាគឺចង់កាត់បន្ថយសីតុណ្ហភាព annealing ដើម្បីជួយសម្រួលដល់ប្រតិកម្មជោគជ័យ។
ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការបន្ថយសីតុណ្ហភាពបង្កើនឱកាសនៃការវិជ្ជមានមិនពិត និងរូបរាងរបស់ primer dimers ។
វាមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការបញ្ជាក់ការវិភាគនៃខ្សែកោងរលាយនៅពេលប្រើបន្ទះ PCR ព្រោះថាវាជាសូចនាករដ៏ល្អក្នុងការជ្រើសរើសសីតុណ្ហភាពនៃការរលាយត្រឹមត្រូវ។
កម្មវិធីឌីហ្សាញបឋមជួយក្នុងការរចនា ការផ្តល់សីតុណ្ហភាពការបន្ទោរបង់ត្រឹមត្រូវ ជាមួយនឹងការកាត់បន្ថយដោយផ្ទាល់នូវកំហុសនៅក្នុងបន្ទះ PCR ។
ត្រូវការបន្ទះ PCR ដែលមានគុណភាពខ្ពស់មែនទេ?
ក្នុងករណីដែលអ្នកបានកំពុងពិចារណាកន្លែងដែលត្រូវស្វែងរកក្រុមហ៊ុនផលិតដែលអាចទុកចិត្តបាន។ចាន PCR. លែងស្វែងរកទៀតហើយ ព្រោះអ្នកនៅកន្លែងត្រឹមត្រូវ។
ដោយក្តីសប្បុរសចុចទីនេះដើម្បីទាក់ទងមកយើងខ្ញុំសម្រាប់ផលិតផល និងសេវាកម្មដែលមានគុណភាពខ្ពស់ ក្នុងតម្លៃដែលមិនធ្វើឱ្យខូចធនាគារ។
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ៣០ តុលា ២០២១