Табысты күшейту реакциясы үшін жеке реакция компоненттері әр препараттағы дұрыс концентрацияда болуы керек. Сонымен қатар, ластанудың болмауы маңызды.
Әсіресе, көптеген реакцияларды орнату керек болған кезде, әрбір реагентке әр кемеге бөлек тамыздың орнына шеберлікті дайындау үшін құрылды. Алдын ала конфигурацияланған қоспалар коммерциялық тұрғыдан қол жетімді, оның ішінде тек үлгілерге арналған компоненттер (праймер) және су қосылады. Сонымен қатар, шеберлік қоспаны өзіңіз дайындауға болады. Екі нұсқада да, қоспасы шаблонсыз әр ПТР кемесіне таратылады және жеке ДНҚ үлгі соңында бөлек қосылады.
Мастер қоспасын пайдалану бірнеше артықшылықтары бар: біріншіден, біртұтас тамшуарлардың біртұтас саны азаяды. Осылайша, тамшу кезінде пайдаланушының қателіктері және ластану қаупі бар, әрине, уақыт үнемделеді. Негізінде, тамшықтың дәлдігі одан да жоғары, өйткені үлкен көлемдер дозаланады. Тоқтардың техникалық мәліметтерін тексеру кезінде мұны түсіну оңай: мөлшерден кіші, алайда ауытқулар соғұрлым жоғары болуы мүмкін. Барлық дайындықтың сол кемеден келетіндігі біртектілікке оң әсер етеді (егер жақсы араласса). Бұл сонымен қатар эксперименттердің репродукциясын жақсартады.
Мастер қоспасын дайындаған кезде, кем дегенде 10% қосымша көлем қосылады (мысалы, егер 10 препарат қажет болса, онда 11-дің негізінде есептеңіз, 11), осылайша соңғы ыдыс дұрыс толтырылғандай етіп. Осылайша, (шамалы) тамштардың дұрыс еместігі, және жуғыш зат бар шешімдерді мөлшерлеу кезінде үлгінің жоғалуының әсері өтеледі. Жуғыш заттар полимеразалар мен шебер қоспалар сияқты, мысалы, көпшілігінің қалыптасуы мен қалдықтарын тудырадытамшуыр ұштары.
Қолданбаға және сұйықтықтың түріне байланысты таратылатын сұйықтық түріне байланысты, дұрыс тамшу техникасы (1) таңдау керек және тиісті жабдық таңдалуы керек. Жуғыш заттар бар шешімдер үшін, тікелей жылжыту жүйесі немесе «төмен ұстап қалу» деп аталатын түйісу қабаттарының ұштары әуе-жастықшалар үшін балама ретінде ұсынылады. ӘсеріAce тамшуының ұшыәсіресе гидрофобты бетіне негізделген. Жуғыш заттар бар сұйықтықтар бар сұйықтықтардың ішінде қалдық пленканы ішкі және сыртқы жағынан қалдырмайды, сондықтан шешімнің жоғалуын азайтуға болады.
Барлық компоненттердің дәл мөлшерінен басқа, дайындықтың ластануы да маңызды. Жоғары тазалықтың шығын материалдарын пайдалану жеткіліксіз, өйткені ауа жату тамшуының тамшу процесі тамшуырда қалған аэрозольдер шығарады. Аэрозольде болуы мүмкін ДНҚ-ны бір үлгіні келесі тамшуардағы қадаммен келесіге ауыстыруға болады және осылайша ластануға әкеледі. Жоғарыда аталған тікелей жылжу жүйелері де осы тәуекелді азайтуға болады. Ауа жатылығы тампондары үшін түтік конусты шашыраңқы, аэрозольдер және биомолекулаларды сақтау арқылы қорғау үшін сүзгі кеңестерін қолданудың мағынасы бар.
POST TIME: Dec-06-2022