Процестерді стандарттауды олардың оңтайландыру және кейіннен құрылуы және үйлестіру, пайдаланушыға тәуелсіз оңтайлы нәтижеге мүмкіндік береді. Стандарттау жоғары сапалы нәтижелерге, сондай-ақ олардың репродукциясын және салыстырмалығын қамтамасыз етеді.
(Классикалық) ПТР мақсаты - сенімді және репродуктивті нәтиже қалыптастыру. Белгілі бір қосымшалар үшін кірістілікПТР өніміде өзекті. Бұл реакциялар үшін үлгілердің бұзылуын және ПТР жұмыс процесінің тұрақты болып қалуын қамтамасыз ету үшін күтім қажет. Атап айтқанда, бұл жалған оң немесе жалған теріс нәтижелерге әкелуі мүмкін ластануды азайтуға және тіпті ПТР реакциясын тежеуге болады. Сонымен қатар, реакция шарттары бар әрбір жеке үлгі бойынша, сонымен қатар, келесідей үлгі үшін бірдей болуы керек, сонымен қатар келесі реакцияларға (бірдей әдіспен) ауысуға болады. Бұл реакциялардың құрамына, сондай-ақ циклдегі температура бақылауының түріне қатысты. Пайдаланушының қателері, әрине, мүмкіндігінше аулақ болу керек.
Төменде біз ПТР-ді дайындау кезінде және бүкіл ПТР іске қосылған қиындықтарды және ПТР жұмыс ағындарын стандарттау үшін пайдаланылатын құралдар мен шығын материалдарына қатысты шешімдерді көрсетеміз.
Реакцияны дайындау
Реакция компоненттерін ПТР-кемелерге немесе плиталарға бөлу сәйкесінше, оларды шешу керек бірнеше қиындықтарды қамтиды:
Реакция шарттары
Жеке компоненттердің нақты және дәл мөлшері, мүмкін, реакцияның ең бірдей болуы мүмкін болған кезде қажет. Жақсы тамақтану техникасына қосымша, дұрыс құралды таңдау өте маңызды. PCR Master-Mexes жиі тұтқырлықты арттыратын немесе көбік шығаратын заттар бар. Тамақ процесі кезінде бұлар едәуір сулауға әкеледітамшуыр ұштары, осылайша тамшудың дәлдігін төмендетеді. Тікелей ағызу жүйелерін немесе суларды сулауға бейім балама тамшуыр ұштарын пайдалану тамшу процесінің дәлдігі мен дәлдігін жақсарта алады.
Ластану
Тарату процесінде, егер тамшуырдың ішкі жағына жетуге рұқсат етілген болса, аэрозольдер пайда болады, олар келесі тамырлы қадам кезінде басқа үлгіні ластауы мүмкін. Мұны сүзгі туралы кеңестер немесе тікелей жылжыту жүйелерін пайдалану арқылы болдырмауға болады.
Сияқты шығын материалдарынұсқау, ПТР жұмыс процесінде қолданылатын ыдыстар мен тақтайшаларда үлгіні ымыраға немесе нәтижесін бұрайтын заттар болмауы керек. Оларға ДНҚ, ДНСА, ДНСА, RNASES және PCR ингибиторлары, сондай-ақ реакция кезінде пайда болуы мүмкін компоненттер - сілтiлеткалар ретінде белгілі болуы мүмкін.
Пайдаланушы қатесі
Қосымша үлгілер өңделеді, қате қаупі соғұрлым жоғары болады. Үлгі дұрыс ыдысқа немесе дұрыс емес жаққа енетіні оңай болуы мүмкін. Ұңғымалардың оңай айқын таңбалауымен бұл тәуекел едәуір азаяды. Тарату кезеңдерін автоматтандыру арқылы «Адам факторы», яғни қателер және пайдаланушылық қателер және пайдаланушылыққа қатысты өзгерістер, сондықтан репродукцияны, әсіресе, әсіресе, шағын реакция көлемі жағдайында көбейтіледі. Бұл жұмыс станциясында жұмыс істейтін жеткілікті өлшемді тұрақтылық тақталарын қажет етеді. Тіркелген штрих-кодтар барлық процесті бақылауды жеңілдететін қосымша машиналық оқылуды қамтамасыз етеді.
Термоциклерді бағдарламалау
БАҒДАРЛАМАСЫНА БАҒДАРЛАМАСЫЗ ЕТУ ҮШІН, сонымен қатар қателікке бейім болуы мүмкін. Әр түрлі ПТР жылу циклінің ерекшеліктері осы процесстің қадамын жеңілдету үшін бірге жұмыс істейді және ең бастысы, оны қауіпсіз ету үшін:
Оңай пайдалану және пайдаланушының жақсы нұсқаулығы тиімді бағдарламалаудың негізі болып табылады. Бұл іргетастың құрылысы, парольмен қорғалған пайдаланушылар әкімшілігі басқа пайдаланушылардың өзгеретін бағдарламаларын болдырмайды. Егер бірнеше велосипедтер (бірдей типтегі) қолданылса, егер бағдарламаны бір құралдан екіншісіне USB немесе қосылым арқылы тікелей бір құралға беруге болады. Компьютерлік бағдарламалық жасақтама бағдарламаларды, пайдаланушының құқықтарын және құжаттарын орталық және қауіпсіз басқаруға мүмкіндік береді.
ПТР жүгіру
Жүгіру кезінде ДНҚ реакция ыдысында күшейтіледі, онда әр үлгіге бірдей, дәйекті реакция шарттары болуы керек. Келесі аспектілер процеске қатысты:
Температураны бақылау
Температураны басқару және цикл блогының біртектілігі барлық үлгілердің температуралық жай-күйі үшін негіз болып табылады. Қыздыру және салқындату элементтерінің (пелить элементтерінің) жоғары сапасы, сондай-ақ олардың блокқа қосылған әдісі - «Жиек әсері» деп аталатын температуралық факторлардың пайда болу қаупі бар шешімдер
Булану
Булану салдарынан реакцияның жеке компоненттерінің концентрациясы реакция барысында өзгермеуі керек. Әйтпесе, бұл өте азПТР өніміқұрылуы мүмкін немесе мүлдем жоқ. Сондықтан булануды азайту өте маңызды, бұл қауіпсіз мөрді қамтамасыз ету арқылы. Бұл жағдайда термоциклердің жылытылатын қақпағы және кеме жұмысының мөрі. Әр түрлі герметикалық опциялар қол жетімдіPCR нөмірлері (Сілтеме: герметикалық мақала), мұнда ең жақсы мөрді жылу тығыздау арқылы қол жеткізеді. Басқа жабылулар да жарамды болуы мүмкін, өйткені Cycler қақпағының контакт қысымы таңдалған тығыздағышқа реттеуге болады.
Технологиялық стандарттау ұзақ мерзімді перспективада дәл және көбейту нәтижелерін сақтау үшін жүзеге асырылады. Бұған жабдықтың үнемі жұмыс істеуін қамтамасыз ету үшін жабдықты үнемі жүргізуге болады. Барлық шығын материалдар барлық өндірілген барлық өнімдер бойынша тұрақты жоғары сапалы болуы керек, олардың сенімді қол жетімділігі кепілдендірілуі керек.
POST TIME: қараша-29-2022