წარმატებული გამაძლიერებელი რეაქციებისთვის, აუცილებელია, რომ ინდივიდუალური რეაქციის კომპონენტები იმყოფებოდეს სწორ კონცენტრაციაში თითოეულ მომზადებაში. გარდა ამისა, მნიშვნელოვანია, რომ არ მოხდეს დაბინძურება.
განსაკუთრებით მაშინ, როდესაც მრავალი რეაქცია უნდა შეიქმნას, დადგინდა, რომ მოამზადოს ეგრეთ წოდებული სამაგისტრო მიქსი, ნაცვლად იმისა, რომ თითოეული რეაგენტი ცალკე იყოს თითოეულ ჭურჭელში. წინასწარ კონფიგურირებული მიქსები კომერციულად ხელმისაწვდომია, რომელშიც დამატებულია მხოლოდ ნიმუშის სპეციფიკური კომპონენტები (პრაიმერი) და წყალი. ალტერნატიულად, სამაგისტრო მიქსი შეიძლება მომზადდეს საკუთარი თავის მიერ. ორივე ვარიანტში, ნარევი გადანაწილებულია თითოეულ PCR გემზე შაბლონის გარეშე, ხოლო დნმ -ის ინდივიდუალური ნიმუში დამატებულია ცალკე.
სამაგისტრო მიქსის გამოყენებით რამდენიმე უპირატესობა აქვს: პირველი, მცირდება ერთჯერადი პიპეტინგის ნაბიჯების რაოდენობა. ამ გზით, როგორც მომხმარებლის შეცდომების რისკია პიპეტინგის დროს, ასევე დაბინძურების რისკი მინიმუმამდეა დაყვანილი და, რა თქმა უნდა, დრო შენახულია. პრინციპში, პიპეტინგის სიზუსტე ასევე უფრო მაღალია, რადგან უფრო დიდი მოცულობები დოზირდება. ეს მარტივია გასაგები პიპეტების ტექნიკური მონაცემების შემოწმებისას: რაც უფრო მცირეა დოზირებული მოცულობა, მით უფრო მაღალია გადახრები. ის ფაქტი, რომ ყველა პრეპარატი მოდის იმავე გემიდან, დადებით გავლენას ახდენს ჰომოგენურობაზე (თუ კარგად არის შერეული). ეს ასევე აუმჯობესებს ექსპერიმენტების რეპროდუქციულობას.
სამაგისტრო მიქსის მომზადებისას უნდა დაემატოს მინიმუმ 10 % დამატებითი მოცულობა (მაგ., თუ საჭიროა 10 პრეპარატი, გამოთვალეთ 11 -ის საფუძველზე), ისე, რომ ბოლო ჭურჭელიც კი სწორად ივსება. ამ გზით, (უმნიშვნელო) პიპეტინგის უზუსტობები და ნიმუშის დაკარგვის ეფექტი, როდესაც სარეცხი შემცველი გადაწყვეტილებების დოზირება შეიძლება ანაზღაურდეს. სარეცხი საშუალებები შეიცავს ფერმენტულ ხსნარებში, როგორიცაა პოლიმერაზები და სამაგისტრო მიქსები, რაც იწვევს ქაფის წარმოქმნას და ნარჩენებს ნორმალურ შიდა ზედაპირზეპიპეტის რჩევები.
აპლიკაციიდან და თხევადი ტიპიდან გამომდინარე, უნდა შეირჩეს პიპეტინგის სწორი ტექნიკა (1) და შერჩეული შესაბამისი მოწყობილობები. სარეცხი საშუალებების შემცველი გადაწყვეტილებებისთვის, პირდაპირი გადაადგილების სისტემა ან ე.წ. "დაბალი შეკავება" პიპეტის რჩევები, როგორც ალტერნატივა საჰაერო ბალიშის პიპეტებისთვის. ეფექტიAce Pipette რჩევაემყარება განსაკუთრებით ჰიდროფობიურ ზედაპირს. სარეცხი საშუალებების შემცველი სითხეები არ ტოვებენ ნარჩენების ფილმს შიგნიდან და გარეთ, ისე, რომ ხსნარის დაკარგვა მინიმუმამდე დაიყვანოს.
ყველა კომპონენტის ზუსტი დოზირების გარდა, ასევე მნიშვნელოვანია, რომ არ მოხდეს პრეპარატების დაბინძურება. საკმარისი არ არის მაღალი სიწმინდის სახარჯო მასალების გამოყენება, რადგან ჰაერის ბალიშის პიპეტში მილსადენის პროცესს შეუძლია აეროზოლები, რომლებიც პიპეტში რჩება. დნმ, რომელიც შეიძლება შეიცავდეს აეროზოლში, შეიძლება გადავიდეს ერთი ნიმუშიდან მეორეზე შემდეგ პიპეტინგის ეტაპზე და ამით გამოიწვიოს დაბინძურება. ზემოთ ნახსენები პირდაპირი გადაადგილების სისტემებმა შეიძლება ასევე შეამციროს ეს რისკი. საჰაერო ბალიშის პიპეტებისთვის აზრი აქვს ფილტრის რჩევების გამოყენებას პიპეტის კონუსის დასაცავად, აეროზოლების და ბიომოლეკულების შენარჩუნებით.
პოსტის დრო: დეკ. -06-2022