CryovialBiasane digunakake kanggo panyimpenan cryogenik garis sel lan bahan biologis kritis liyane, ing dewars kapenuhan nitrogen cair.

Ana sawetara tahap sing sukses ing pengawetan sel ing nitrogen cair. Nalika prinsip dhasar minangka beku sing alon, teknik tepat sing dipunginaake gumantung saka jinis sel lan cryoprotectant sing digunakake. Ana sawetara pertimbangan safety lan praktik sing paling apik kanggo digatekake nalika nyimpen sel ing suhu sing sithik.

Iki kirim tujuane menehi ringkesan babagan carane Crimovial disimpen ing nitrogen cair.

Apa sing dadi cryovial

Crimovial cilik, bokor sing dirancang dirancang kanggo nyimpen conto cairan ing suhu sing kurang. Dheweke njamin sel sing dilestarekake ing cryoprotectant ora mlebu kontak langsung karo nitrogen cair, minimalake risiko fraktur celabar nalika efek pendinginan nitrogen sing nitrogen sing nitrogen sing isih gedhe.

Vial biasane kasedhiya ing macem-macem volume lan desain - bisa uga ditambah karo internal utawa eksternal sing ana ing ngisor utawa bunder. Format resik lan ora resik uga kasedhiya.

Sing nggunakakeCyonovialKanggo nyimpen sel ing nitrogen cair

Sawetara laboratorium NHS lan pribadi, uga institusi riset sing duwe spesialis ing cal getih bank, cell epithelial, imunologi lan biologi sel batang nggunakake cryovial sel cryopreser.

Sel-sel sing dilestarekake kanthi cara iki kalebu sel B lan T, sel cho, sel hematoos, hibrida, sel egasit, myeloma, sel nk lan sel stem pluripotent.

Ringkesan babagan carane nyimpen Crimovial ing nitrogen cair

Cryopreservation minangka proses sing njaga sel lan konstruk biologis liyane kanthi adhem nganti sithik. Sel bisa disimpen ing nitrogen cair sajrone pirang-pirang taun tanpa ilang kekurangan sel. Iki minangka outline prosedur sing digunakake.

Persiapan sel

Cara sing tepat kanggo nyiapake conto bakal beda-beda gumantung saka jinis sel, nanging umume, sel diklumpukake lan centrifuged kanggo ngembangake pelet sing kaya sel. Pellet iki banjur diturunake ing supernatti dicampur karo cryoprotectant utawa medium cryopreservation.

Medium cryopreservation

Medium iki digunakake kanggo njaga sel ing lingkungan suhu rendah sing bakal ditindakake kanthi nyandhet pembentukan kristal intra lan kristal ekstra. Peran kasebut yaiku nyedhiyakake lingkungan sing aman, proteksi kanggo sel lan jaringan sajrone pembekuan, panyimpenan, lan proses thawing.

Medium kayata plasma beku seger (FFP), larutan plasumalte heparinister utawa solusi bebas serum, gratis dicampur karo cryoprothoxide kayata dimethyl.

PELET WE-LIVICOIED IS ISIQUOTED INTONGSPOPLENE THEPOVIALS kayataBesar panyimpenan cryogenik suzhou ace.

Penting ora bisa ngatasi cryovial amarga iki bakal nambah risiko retak lan bisa ngeculake konten (1).

Tingkat beku sing dikontrol

Umumé, tingkat beku sing luwih alon digunakake kanggo sel cryserairan sing sukses.

Sawise conto sing padha karo bokor cryogenik, diselehake ing es sing teles utawa ing kulkas 4 ℃ lan prosedur pembekuan diwiwiti sajrone 5 menit. Minangka pandhuan umum, sel wis digawe adhem ing tingkat -1 nganti -3 saben menit (2). Iki digayuh nggunakake sing luwih adhem utawa nggunakake bokor ing kothak insulated sing diselehake ing A -70 ° C nganti -90 ° C kontrol Rating freezer.

Transfer nitrogen cair

Bokor cryogenik beku banjur ditransfer menyang tank nitrogen cair kanggo wektu sing ora ditemtokake sing diwenehake suhu kurang saka -135 ℃ dijaga.

Suhu ultra-rendah iki bisa dipikolehi kanthi spase ing nitrogen fase cair utawa beluk.

Fase cair utawa beluk?

Panyimpen ing nitrogen phase Cairan dikenal kanggo njaga suhu kadhemen kanthi konsistensi mutlak, nanging asring ora dianjurake kanggo alasan ing ngisor iki:

• Kabutuhan kanggo volume gedhe (ambane) nitrogen cair sing dadi bebaya potensial. Burns utawa asphyxiation amarga iki minangka risiko nyata.
• Kasus kontaminasi salib salib kanthi agen infèksius kayata aspergillus, hep b lan virus nyebar liwat cair nitrogen medium (2,3)
• Potensi kanggo nitrogen cair kanggo bocor menyang bokor nalika kecemplung. Yen dicopot saka panyimpenan lan digawe panas menyang suhu kamar, nitrogen kanthi cepet nambah. Akibate, bokor bisa uga ora bisa dicopot nalika dicopot saka panyimpenan nitrogen cair, nggawe bahaya saka lebu lan cahya ing loro-lorone lan cahya kanggo konten (1, 4).

Kanggo alasan kasebut, panyimpenan suhu rendah biasane paling umum ing uap nitrogen fase uap. Nalika conto kudu disimpen ing fase cair, tabung cryoflex khusus kudu digunakake.

Kakurangan ing fase beluk yaiku manawa gradient suhu vertikal bisa kedadeyan nyebabake fluktuasi suhu ing antarane -135 ℃ lan -190 ℃. Iki mbutuhake ati-ati lan secahan variasi nitrogen cair (5).

Akeh manufaktur nyaranake manawa Crimovial cocog kanggo disimpen nganti -135 ℃ utawa kanggo digunakake ing fase uap mung.

Nganggo sel kreta sampeyan

Prosedur sing luwih apik kanggo budaya beku, lan nangani lan teknik sing tepat dibutuhake kanggo njamin panguripan optimal, pemulihan, lan fungsi sel. Protokol sing tepat bakal gumantung ing jinis sel tartamtu. Nanging, cemlorot kanthi cepet dianggep minangka standar:

• Nyuda dampak ing pemulihan selular
• Bantuan nyuda wektu cahya menyang larut sing ana ing media pembekuan
• Nyilikake karusakan saka recrystalisasi es

Mandi banyu, siram manik, utawa instrumen otomatis khusus umume digunakake kanggo conto kasebut.

Sing paling asring 1 garis sel dicelupake sajrone wektu 1-2 menit, adus banyu 37 ℃ nganti mung ana es cilik sing ditinggal ing medium wutah sing gedhe.

Kanggo sawetara sel kayata embrio mamalia, pemanasan alon penting kanggo kaslametanane.

Sel kasebut saiki wis siyap kanggo budaya sel, pamisahan sel, utawa ing kasus pasinaon haematopoietik - pasinaon viability kanggo njamin integritas sel-sel saka salam.

Praktek normal kanggo njupuk aliquot cilik saka conto prasah sing digunakake kanggo nindakake count sel kanggo nemtokake konsentrasi sel kanggo plating budaya. Sampeyan banjur bisa netep asil prosedur pemasutan sel lan nemtokake daya sel.

Praktik paling apik kanggo panyimpenan saka cryovial

Contone conto cryopreservation sukses sing disimpen ing Crimovial gumantung akeh unsur ing protokol kalebu panyimpenan sing tepat lan rekaman.

• Sel-irus pamisah ing antarane lokasi panyimpenan- Yen volume ngidini, sel Split antarane bokor lan simpen ing lokasi sing kapisah kanggo nyuda risiko kerugian sampel amarga gagal peralatan.
• Nyegah kontaminasi salib- milih bokong cryogenik sing siji utawa autlamlave sadurunge nggunakake sakteruse
• Gunakake bokor ukuran sing cocog kanggo sel sampeyan- bokor teka ing macem-macem volume antarane 1 lan 5mls. Aja nganti bokor sing overfilling kanggo nyuda risiko retak.
• Pilih bokor cryogenik internal utawa eksternal- Vial benang internal dianjurake dening sawetara universitas kanggo langkah-langkah safety - uga bisa nyegah kontaminasi sajrone ngisi utawa nalika disimpen ing nitrogen cair.
• Nyegah bocor- Gunakake segel sing disuntikake dipasang ing tutup skru utawa dering kanggo nyegah bocor lan kontaminasi.
• Gunakake bolong 2D lan label label- Kanggo njamin traceability, bokor kanthi tulisan sing gedhe-gedhe bisa ngaktifake saben val supaya bisa nyukupi label. Barcodes 2D bisa mbantu manajemen panyimpenan lan cathetan rekaman. Cap warna warna warna migunani kanggo ngenali luwih gampang.
• Pangopènan panyimpenan sing cukup- Kanggo njamin sel ora ilang, kapal panyimpenan kudu terus-terusan ngawasi suhu lan tingkat nitrogen cair. Weker kudu dipasang kanggo menehi tandha pangguna kesalahan.

Langkah-langkah keamanan

Nitrogen cair wis dadi praktik umum ing riset modern nanging nggawa risiko cedera serius yen ora salah.

Peralatan protèktif pribadi sing bener (PPE) kudu nyandhang risiko frostbite, ngobong lan kedadeyan liyane yen nangani nitrogen cairan. Nyandhang

• Sarung tangan Cryogenik
• Lambang Laboratorium
• Dampak tahan tameng pasuryan lengkap sing uga nutupi gulu
• Sepatu ditutup
• Apresi Plastik Plancong Splashproof

Kulkas nitrogen cair kudu diselehake ing wilayah sing apik kanggo nyilikake risiko asphyxiation - uwal nitrogen nguap lan mimpin oksigen atmosfer. Toko volume gedhe kudu duwe sistem weker oksigen sing kurang.

Makarya kanthi pasangan nalika nangani nitrogen cairan becik lan nggunakake ing njaba jam kerja normal kudu dilarang.

Crimovial nyengkuyung alur kerja sampeyan

Suzhou Ace Biomedical Company nawakake macem-macem produk sing cocog karo kabutuhan conopreservation kanggo macem-macem jinis sel. Portofolio kalebu macem-macem tubesas minangka macem-macem cryovial resik.

Krungu kita yaiku:

• LABRE LAB CAP 0.5ml 1.5ml 2.0ml Crimogenic Crimogenic Crimoolube kanthi gasket

  ● 0.5ml, 1.5mL, spesifikasi 2.0mL, kanthi rok utawa tanpa rok
  ● Desain conical utawa mandhiri, resik utawa ora resik bisa kalorone
  ● Tabung tutup skru digawe saka polipropilena polipropilena medis
  ● bokor cryotube PP bisa bola-bali bola-bali beku lan thawed
  ● Desain cap eksternal bisa nyuda kemungkinan kontaminasi sajrone perawatan.
  ● tabung cryogenik cargenik tabung semor universal kanggo digunakake
  ● Tubes cocog karo rotor umum sing umum
  ● Tubes tabung cryogenic cocog karo standar 1-inci lan 2 inci, 48well, 811well, 96well lan 100well Freerzer Box
  ● Autoclavable nganti 121 ° C lan dibebasake nganti -86 ° C

  Bagean ora	Bahan	Volume	TutupWerna	PCS /Tas	Kantong / cilik
  Act05-bl-n	PP	0,5ml	Ireng, Kuning, Biru, Abang, Ungu, Putih	500	10
  Tumindak15-bly n	PP	1.5mL	Ireng, Kuning, Biru, Abang, Ungu, Putih	500	10
  Act15-bl-nw	PP	1.5mL	Ireng, Kuning, Biru, Abang, Ungu, Putih	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Ireng, Kuning, Biru, Abang, Ungu, Putih	500	10